Ki67、CyclinD1和E-cad在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義

余 琦，楊江輝，李 寧 (解放軍第309醫(yī)院病理科，北京 100091)

皮膚鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)是一種發(fā)生在表皮上皮細(xì)胞的惡性腫瘤，是一種常見的皮膚科惡性腫瘤。該腫瘤的發(fā)生是由多種因素共同作用的結(jié)果，本試驗通過免疫組化方法觀察ki67、CyclinD1和E-cad 3種抗體在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)以及3種抗體表達(dá)之間的關(guān)系，了解3種抗體在皮膚鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生和發(fā)展過程中的作用，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

本組35例皮膚鱗癌標(biāo)本均經(jīng)病理確診，其中男26例，女9例，平均60.4歲。對照組為外科手術(shù)皮損邊緣切除組織，為正常組織，共10例。根據(jù)WHO分級，將皮膚鱗癌分為3級，其中Ⅰ級(高分化)15例，Ⅱ級(中分化)13例，Ⅲ級(低分化)7例。

1.2 方法

采用免疫組化SP法，所有組織切片制作環(huán)境相同，每批切片均設(shè)陽性對照和陰性對照。Ki67、CyclinD1和E-cad抗體購于北京中杉金橋生物試劑公司。

1.3 結(jié)果判斷

細(xì)胞核或細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色反應(yīng)物顆粒表達(dá)為陽性。按著色細(xì)胞百分比劃分積分，1% ～25%積1分:;26% ～50%積2分;51% ～75%積3分;76% ～100%積4分。按染色強弱的深淺劃分積分，無染色，0分;弱陽性，1分;強陽性，2分。然后按照陽性細(xì)胞×染色強弱劃分積分［1］，陰性(－)積1～2分，弱陽性(+)積3～4分，陽性(++)積5～6分，強陽性(+++)積7～8分。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。兩樣本率的比較采用χ2檢驗，兩兩之間的相關(guān)性采用 Spearman等級相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Ki67 表達(dá)情況

Ki67陽性表達(dá)定位于細(xì)胞核，陽性染色細(xì)胞散在分布于表皮及癌組織中。Ki67在鱗癌組織中陽性表達(dá)高于正常組織，2組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=18.579，P ＜0.05)。在高、中、低分化組中陽性率分別為 73.3%、84.6%、100%(χ2=24.795，P ＜0.05)，見表1。

表1 ki67在皮膚鱗癌組織和正常皮膚組織的表達(dá)(例)

2.2 CyclinD1 表達(dá)情況

CyclinD1陽性表達(dá)定位于細(xì)胞核和細(xì)胞漿，陽性染色細(xì)胞散在分布于表皮及癌組織中。CyclinD1在鱗癌組織中陽性表達(dá)高于正常組織，2組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=9.643，P＜0.05)。在高、中、低分化組中陽性率分別為 46.7%、76.9%、100%(χ2=13.456，P ＜0.05)，見表 2。

表2 CyclinD1在皮膚鱗癌組織和正常皮膚組織的表達(dá)(例)

2.3 E-cad 表達(dá)情況

E-cad陽性表達(dá)定位于細(xì)胞漿，陽性染色細(xì)胞散在分布于表皮及癌組織中。E-cad在鱗癌組織中陽性表達(dá)低于正常組織，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=10.452，P ＜0.05)。在高、中、低分化組中陽性率分別為 86.7%、76.9%、57.1%(χ2=12.842，P ＜0.05)，見表 3。

表3 E-cad在皮膚鱗癌組織和正常皮膚組織的表達(dá)(例)

2.4 ki67、CyclinD1 和 E-cad相關(guān)性檢測

Ki67、CyclinD1和E-cad三者中兩兩之間的關(guān)系:Ki67與CyclinD1在皮膚鱗癌中表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.551，P ＜0.05);Ki67與E-cad在皮膚鱗癌中表達(dá)不相關(guān)(r=0.113，P＞0.05);CyclinD1與 E-cad在皮膚鱗癌中表達(dá)不相關(guān)(r=0.108，P ＞0.05)，見表4、表 5。

表4 抗體Ki67與CyclinD1、E-cad之間的表達(dá)關(guān)系(例)

表5 抗體CyclinD1和E-cad的表達(dá)關(guān)系(例)

3 討論

Ki67是一種增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，其功能與細(xì)胞的有絲分裂密切相關(guān)，在細(xì)胞增殖過程中是不可缺少的，但其確切機制尚不清楚，Ki67作為標(biāo)記細(xì)胞增殖狀態(tài)的抗原，表達(dá)陽性說明癌細(xì)胞增殖活躍［2］。Ki67也是一種與細(xì)胞分裂相關(guān)的核抗原，它的表達(dá)量隨著細(xì)胞增殖周期不同而有所不同，是目前應(yīng)用最廣泛的細(xì)胞增殖標(biāo)志之一。在很多常見的惡性腫瘤中，Ki67的表達(dá)遠(yuǎn)高于正常組織細(xì)胞，并且與腫瘤的惡性生物學(xué)行為和預(yù)后相關(guān)。對此現(xiàn)象有2種解釋:一是Ki67本身就是原癌基因，它的過度表達(dá)使得細(xì)胞能夠無限制增生而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生，另一種是腫瘤的過度增生使Ki67抗原過度表達(dá)［3］。陳松波等［4］檢測皮膚鱗癌中Ki67的表達(dá)，結(jié)果顯示隨著腫瘤細(xì)胞分化程度的降低Ki67表達(dá)逐漸增高。沈金翠等［5］也證明Ki67在皮膚鱗癌中表達(dá)活躍，且陽性率與腫瘤的惡性程度顯著正相關(guān)。本研究中Ki67在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)強度明顯高于正常組織，且表達(dá)強度隨著腫瘤分級增高而呈增高趨勢。

細(xì)胞周期蛋白(CyclinD1)是細(xì)胞周期中短暫出現(xiàn)的基因表達(dá)產(chǎn)物，具有嚴(yán)格的周期順序性，與特定的CDK(周期素依賴性激酶)結(jié)合構(gòu)成復(fù)合體，可在G1/S交界處將信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與細(xì)胞周期調(diào)控聯(lián)系起來，完成各個時期的轉(zhuǎn)換，而后降解［6］。其過度表達(dá)可縮短G1期，并減少對生長因子的依賴性。故可在限制正常細(xì)胞生長的條件下越過G0/S和(或)G1/s過渡點而持續(xù)分裂增殖。研究顯示CyclinD1在ATC比DTC中的表達(dá)率要高，其陽性表達(dá)率與甲狀腺癌、皮膚鱗狀細(xì)胞癌的惡性程度、期別成正相關(guān)。CyclinD1基因位于11q13染色體上，全長約15 kD，編碼含有295個氨基酸的蛋白，該蛋白屬于核內(nèi)調(diào)控蛋白［7］。CyclinD1是細(xì)胞周期調(diào)節(jié)的主要因子之一，在細(xì)胞周期的G1/S期的轉(zhuǎn)變中起著關(guān)鍵的作用。CyclinD1在肺癌、肝癌等多種惡性腫瘤細(xì)胞中都有過量表達(dá)，本研究中CyclinD1在皮膚鱗癌組織中表達(dá)明顯高于正常組織，表明該抗體在皮膚鱗癌的發(fā)生過程中起某種促進(jìn)細(xì)胞增殖惡化的作用。這與李靈等［8］研究CyclinD1在皮膚鱗癌組織中的表達(dá)結(jié)果一致。

E-cad是鈣粘附蛋白家族中的一個重要組成成員，被廣泛分布于各類上皮細(xì)胞表面，具有促進(jìn)上皮細(xì)胞間相互粘附，是維持細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)的完整性和極性的重要分子［9］。E-Cad是分布在上皮組織中的糖蛋白，是調(diào)節(jié)細(xì)胞與細(xì)胞之間和細(xì)胞與基質(zhì)之間粘附反應(yīng)的重要媒介［4］。E-Cad丟失或功能缺失與惡性腫瘤的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移過程密切相關(guān)，腫瘤轉(zhuǎn)移過程中瘤細(xì)胞間粘附作用的下降及腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞黏附的增強都有利于其脫離原發(fā)灶，發(fā)生轉(zhuǎn)移［10］。本研究中E-Cad在皮膚鱗癌組織中的表達(dá)低于正常組織，且在高分化腫瘤中表達(dá)較多，低分化腫瘤中表達(dá)較少，E-Cad表達(dá)與腫瘤惡性程度相關(guān)。

本研究中Ki67和CyclinD1在皮膚鱗癌組織均高于正常組織，與腫瘤惡性程度正相關(guān)。二者均在細(xì)胞增殖周期中發(fā)揮作用，可能在腫瘤發(fā)展過程中協(xié)同。Ki67、CyclinD1和E-cad均和皮膚鱗癌組織的分化程度相關(guān)，三者中兩兩之間的相互關(guān)系怎樣在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中協(xié)調(diào)作用還有待進(jìn)一步研究。

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