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      氟苯尼考對肉仔雞的急性中毒試驗

      2014-09-22 17:48:30胡曉軍
      安徽農(nóng)學(xué)通報 2014年17期
      關(guān)鍵詞:毒性

      胡曉軍

      摘 要:目的:了解氟苯尼考對肉仔雞經(jīng)口灌胃的毒性,求出氟苯尼考對肉雞的半數(shù)致死量。方法:先經(jīng)過預(yù)試驗,測出預(yù)試驗的各組劑量的差值;再進行正式實驗,取體重約0.2kg的肉仔雞50只,隨機分成5組,公母各50%,每組灌胃氟苯尼考劑量分別為6 250mg/kg,7 943mg/kg,10 000mg/kg,12 590mg/kg,16 000mg/kg,進行毒性試驗。結(jié)果:5組肉仔雞的死亡率分別為0,20%,50%,70%,90%,經(jīng)過數(shù)據(jù)處理,其半數(shù)致死量LD50為10 392.020 6mg/kg,其可信限為9 169.169 5~11 777.958 0mg/kg,其劑量屬于微毒(LD50>10 000)。結(jié)論:氟苯尼考對肉仔雞屬于無毒抗生素。

      關(guān)鍵詞:氟苯尼考;毒性;LD50;肉仔雞

      中圖分類號 S859.82 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731(2014)17-132-03

      氟苯尼考(Florfenicol),化學(xué)名為[R-(R1.T)]-2,2-二氯-N-{氟甲基)-2-羥-2-[4-(甲基磺酰)苯基]乙基}乙酰胺,分子式:C12H14CL2FNO4S,分子量為358.2。該藥是由美國先靈-葆雅公司研制的一種新合成的廣譜抗菌藥,屬于氯霉素類[1],是甲砜霉素(Thiamphenicol)的單氟衍生物,但其化學(xué)結(jié)構(gòu)不同于氯霉素,對位無硝基,對人體無潛在的骨髓抑制或再生障礙性貧血等危害。1984年美國FDA禁止氯霉素用于所有供食用的家畜、家禽[2],而氟苯尼考為氯霉素的結(jié)構(gòu)同系物,作用機理及抗菌譜與氯霉素和甲砜霉素相似,能與50S亞基結(jié)合,抑制酞酰基轉(zhuǎn)移酶,從而抑制酞鏈的延伸,干擾蛋白質(zhì)合成。氟苯尼考在結(jié)構(gòu)上以F原子取代了氯霉素、甲砜霉素中丙烷鏈3碳位置上的-OH,阻止了細(xì)菌乙酰轉(zhuǎn)移酶在此位置上的乙?;饔茫什皇茉撁赣绊懚粶缁?;而乙酰轉(zhuǎn)移酶又與細(xì)菌經(jīng)質(zhì)粒介導(dǎo)的對氯霉素、甲砜霉素的耐藥性有關(guān),使得氟苯尼考不會產(chǎn)生類似氯霉素、甲砜霉素質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性,而且對許多氯霉素耐藥菌株仍然敏感。因此,本產(chǎn)品具有抗菌譜廣、吸收良好、體內(nèi)分布廣的特點。

      最近的研究發(fā)現(xiàn),臨床分離到的234種病菌株中,對氯霉素有耐藥性的菌株超過50%,而低劑量的氟苯尼考對其中98%的分離菌株有殺菌性作用,特別是對耐氯霉素的流感嗜血桿菌、克雷白氏桿菌和擬桿菌抑制作用顯著。目前氟苯尼考已在亞洲、歐洲、美洲的20多個國家上市,其劑型有注射劑、預(yù)混劑等。最近報道稱,美國已有氟苯尼考植入劑,用于治療牛呼吸道疾病[3],尤其是牛的肺炎[4]及奶牛的乳腺炎[5],也適用于魚、豬、羊及其他家畜、家禽。氟苯尼考對革蘭氏陽性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-)均有抑制作用,1990年首次在日本上市用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),商品名Aquafen,其后還在智利和韓國上市,治療黃尾魚的假結(jié)核性巴氏桿菌病及鏈球菌病,效果良好,試驗顯示黃尾魚的累積死亡率明顯低于對照組[6]。近年來,我國也已合成該藥。為了解氟苯尼考對肉仔雞經(jīng)口灌胃的毒性,筆者特進行了本次試驗。

      1 材料與方法

      1.1 試驗材料 肉仔雞約200只,由石臺天源生態(tài)種養(yǎng)殖專業(yè)合作社提供。飼養(yǎng)飼料配方:玉米57.2%、豆粕35.4%、食鹽0.3%、魚粉2.0%、磷酸氫鈣1.7%、石粉0.9%、多種維生素0.05%、微量元素0.45%、肉仔雞用預(yù)混料2%,粗蛋白21.5%。氟苯尼考粉(含量98.5%),大試管若干,標(biāo)簽若干,注射器1支,塑料導(dǎo)管1根,玻璃棒1支,燒杯若干,洗瓶1只,電子天平1臺,禽舍溫度調(diào)控器1組,科學(xué)計算器1臺,由石臺縣畜牧獸醫(yī)局實驗室提供。

      1.2 預(yù)試驗 取試驗肉仔雞50只(每只體重約200g),隨機分成5組,每組10只,公母各50%,試驗肉仔雞雞腳貼標(biāo)簽。氟苯尼考是氯霉素的第三代產(chǎn)品,其對小白鼠的LD50約為10 000mg/kg,所以取中間組劑量為10 000mg/kg,將組距設(shè)為對數(shù)值,差值為0.2,即劑量組間比值為1.6。分組與劑量如表1所示。

      將配好的劑量相應(yīng)放入50支大試管中(50支大試管附上相應(yīng)的標(biāo)簽,標(biāo)記各組的組別),用洗瓶在各試管中加入少量的蒸餾水配成懸濁液,溶液體積不超過5mL。灌胃時,大拇指堵住試管口,搖勻試管內(nèi)懸濁液,助手將雞保定,雞嘴向上張開,試驗者將導(dǎo)管連接注射器,吸入大試管中氟苯尼考懸濁液,再將導(dǎo)管伸入雞嗉囔將液體注入,再用洗瓶向大試管注入少量蒸餾水(因氟苯尼考不溶于水,需多次加水以求更精確的劑量),重復(fù)3次。50只肉仔雞灌胃后。詳細(xì)觀察被試驗的肉仔雞精神、采食和飲水狀態(tài),并作詳細(xì)記錄。

      1.3 正式實驗 以最低劑量組劑量對數(shù)值為3.8,其后各組對數(shù)值為3.9,4.0,4.1,4.2.各自查反對數(shù)表得出各隊的劑量為:6 250mg/kg,7 943mg/kg,10 000mg/kg,12 590mg/kg,16 000mg/kg,如表2所示。取試驗肉仔雞50只(每只體重約200g),隨機分成5組,每組10只,公母各50%,試驗肉仔雞雞腳按相應(yīng)的組別貼標(biāo)簽。正式試驗灌胃方法與預(yù)試驗灌胃方法相同。

      2 結(jié)果分析

      2.1 預(yù)試驗結(jié)果 經(jīng)24h后觀察結(jié)果得表3所示:

      根據(jù)表2得出正式試驗組距I=(logLD90-logLD10)/(n-1),式中,n代表組數(shù),I為組距(相鄰的劑量組劑量對數(shù)之差或相鄰兩組劑量比值的對數(shù)值)。

      以最低劑量組(LD50)劑量對數(shù)加上I值即為第二組的劑量的對數(shù),以此設(shè)定正式試驗各組的劑量的對數(shù),再通過劑量的對數(shù)求得各組的劑量。

      2.2 正式試驗結(jié)果 灌藥后24h后觀察結(jié)果如表4所示:

      半數(shù)致死量LD50為10 392.020 6。按農(nóng)業(yè)部《新獸藥一般毒性試驗技術(shù)要求》[8]在工業(yè)毒物急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中屬于微毒(LD50>10 000mg/kg);化合物經(jīng)口急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中屬于2級—實際無毒(5 001mg/kg> LD50>15 000mg/kg)。endprint

      2.3 中毒癥狀觀察 觀察肉仔雞接觸氟苯尼考的中毒癥狀是了解該化合物及本次實驗毒性的十分重要的一環(huán),是補充LD50這個參數(shù)不足的重要方面。本次實驗前隨機抽樣的50只健康狀況良好雞,經(jīng)灌胃服用氟苯尼考后6h觀察癥狀,劑量小的組別沒明顯癥狀,劑量大的組出現(xiàn)癥狀如表5所示。

      2.4 病理學(xué)檢查 取本次試驗中毒死亡的肉仔雞及時解剖做病理學(xué)檢查:剖檢見心腔淤血,心肌柔軟,心臟擴大,血液呈暗紅色,肝臟稍腫大,皮膚可視粘膜發(fā)紺。嗦囔積液,酸臭氣味,腸膨氣,嚴(yán)重幾只胃腸內(nèi)容物呈褐色。腎臟近曲小管、上皮細(xì)胞顆粒變性,腎小囊內(nèi)皮腫脹有出血,間質(zhì)充血,腸道粘膜上皮壞死,間質(zhì)血管出血,心肌纖維間有出血,脾臟及大腦均未見明顯病變。

      3 結(jié)論與討論

      (1)毒性是一種物質(zhì)對機體造成損害的能力。毒性較高的物質(zhì),只要相對較小的數(shù)量,即可對機體造成一定的損害,而毒性較低的物質(zhì),需要較多的劑量才呈現(xiàn)毒性[9],物質(zhì)毒性的高低,僅具有相對意義。本次試驗氟苯尼考對肉仔雞的急性中毒試驗中,氟苯尼考是屬于基本無毒性獸藥。在一定意義上,需達(dá)到比較大的數(shù)量,氟苯尼考對機體才具有毒性。

      (2)實驗動物染毒方法通常使用3種:即經(jīng)口,經(jīng)呼吸道及經(jīng)皮膚接觸方法。本實驗肉仔雞采用經(jīng)口灌服法,經(jīng)口比摻入飼料的優(yōu)點是劑量準(zhǔn)確、誤差小,其缺點是有傷及食道以及誤入氣管的可能。毒性試驗要求精確,所以采用經(jīng)口法。

      (3)本次試驗用改進寇氏法計算出氟苯尼考對肉仔雞的半數(shù)致死量LD50為10 392.020 6mg/kg,在工業(yè)毒物急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中屬于微毒(LD50>10 000mg/kg);化合物經(jīng)口急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中屬于2級—實際無毒

      (5 001mg/kg>LD50>15 000mg/kg)。說明氟苯尼考對肉仔雞的毒性非常小,可以在臨床上安全應(yīng)用,例如氟苯尼考長效制劑對雞大腸桿菌病的治療有很好的療效,并有較好的應(yīng)用前景[10]。

      (4)氟苯尼考屬于微毒性獸藥,在劑量6 250mg/kg體重之內(nèi)對機體無毒害作用。但在超過此劑量會造成中毒,如叫聲異常,呆立少動,肌顫,鼻孔溢液,皮膚充血、紫紺,眼球突出、充血、角膜混濁,瞳孔擴大的明顯中毒癥狀。

      (5)氟苯尼考的毒性非常小,一般在飼養(yǎng)過程中不會發(fā)生畜禽食用氟苯尼考中毒現(xiàn)象,所以廣大養(yǎng)殖戶可以放心使用。

      參考文獻

      [1]楊桂香,鄧國東,鄒明,等.氟砜霉素的急性毒性和亞慢性毒性試驗[J].中國獸醫(yī)學(xué)報,2000,20(3):275-278.

      [2]蕭志梅.氟苯尼考的臨床運用及市場狀況[J].中國獸醫(yī)藥雜志,2000,34(2):53-54.

      [3]杜向黨,閻若潛,沈建忠.氯霉菌類藥物耐藥機制的研究進展[J].動物醫(yī)學(xué)進展,2004,25(2):27-28.

      [4]Alm ajano J,Calvo J E,Madelenat A,et al.Efficacy of florfenicol compared to a penicillinstrep tomycin dexam ethasone form ulation in the rteatm ent of bovine respiatory syndrome[J].Medvet,1998,15(3):148-157.

      [5]Wilson D J,Sears P M,Gonzalez R N,et al.Efficacy of florfenicol for treatment of clinical and subclinical bovine mastitis[J].Am J Vet Res,1996,5(4):526-528.

      [6]邱銀生,吳佳.獸用廣譜抗菌藥物氟甲砜霉素[J].中國獸藥雜志,1996,30(2):47-48.

      [7]朱蓓蕾.動物毒理學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1989:49-50.

      [8]于船,王萬欽.中國獸醫(yī)知識大全[M].成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,1997:36-38.

      [9]劉毓谷.衛(wèi)生毒理學(xué)基礎(chǔ)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:5-6.

      [10]畢聰明,周鐵忠,王坤,等.氟苯尼考長效制劑對雞大腸桿菌病的療效試驗[J].中國獸藥雜志,2004,38(7):56-58.

      (責(zé)編:張宏民)endprint

      2.3 中毒癥狀觀察 觀察肉仔雞接觸氟苯尼考的中毒癥狀是了解該化合物及本次實驗毒性的十分重要的一環(huán),是補充LD50這個參數(shù)不足的重要方面。本次實驗前隨機抽樣的50只健康狀況良好雞,經(jīng)灌胃服用氟苯尼考后6h觀察癥狀,劑量小的組別沒明顯癥狀,劑量大的組出現(xiàn)癥狀如表5所示。

      2.4 病理學(xué)檢查 取本次試驗中毒死亡的肉仔雞及時解剖做病理學(xué)檢查:剖檢見心腔淤血,心肌柔軟,心臟擴大,血液呈暗紅色,肝臟稍腫大,皮膚可視粘膜發(fā)紺。嗦囔積液,酸臭氣味,腸膨氣,嚴(yán)重幾只胃腸內(nèi)容物呈褐色。腎臟近曲小管、上皮細(xì)胞顆粒變性,腎小囊內(nèi)皮腫脹有出血,間質(zhì)充血,腸道粘膜上皮壞死,間質(zhì)血管出血,心肌纖維間有出血,脾臟及大腦均未見明顯病變。

      3 結(jié)論與討論

      (1)毒性是一種物質(zhì)對機體造成損害的能力。毒性較高的物質(zhì),只要相對較小的數(shù)量,即可對機體造成一定的損害,而毒性較低的物質(zhì),需要較多的劑量才呈現(xiàn)毒性[9],物質(zhì)毒性的高低,僅具有相對意義。本次試驗氟苯尼考對肉仔雞的急性中毒試驗中,氟苯尼考是屬于基本無毒性獸藥。在一定意義上,需達(dá)到比較大的數(shù)量,氟苯尼考對機體才具有毒性。

      (2)實驗動物染毒方法通常使用3種:即經(jīng)口,經(jīng)呼吸道及經(jīng)皮膚接觸方法。本實驗肉仔雞采用經(jīng)口灌服法,經(jīng)口比摻入飼料的優(yōu)點是劑量準(zhǔn)確、誤差小,其缺點是有傷及食道以及誤入氣管的可能。毒性試驗要求精確,所以采用經(jīng)口法。

      (3)本次試驗用改進寇氏法計算出氟苯尼考對肉仔雞的半數(shù)致死量LD50為10 392.020 6mg/kg,在工業(yè)毒物急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中屬于微毒(LD50>10 000mg/kg);化合物經(jīng)口急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中屬于2級—實際無毒

      (5 001mg/kg>LD50>15 000mg/kg)。說明氟苯尼考對肉仔雞的毒性非常小,可以在臨床上安全應(yīng)用,例如氟苯尼考長效制劑對雞大腸桿菌病的治療有很好的療效,并有較好的應(yīng)用前景[10]。

      (4)氟苯尼考屬于微毒性獸藥,在劑量6 250mg/kg體重之內(nèi)對機體無毒害作用。但在超過此劑量會造成中毒,如叫聲異常,呆立少動,肌顫,鼻孔溢液,皮膚充血、紫紺,眼球突出、充血、角膜混濁,瞳孔擴大的明顯中毒癥狀。

      (5)氟苯尼考的毒性非常小,一般在飼養(yǎng)過程中不會發(fā)生畜禽食用氟苯尼考中毒現(xiàn)象,所以廣大養(yǎng)殖戶可以放心使用。

      參考文獻

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      [3]杜向黨,閻若潛,沈建忠.氯霉菌類藥物耐藥機制的研究進展[J].動物醫(yī)學(xué)進展,2004,25(2):27-28.

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      [5]Wilson D J,Sears P M,Gonzalez R N,et al.Efficacy of florfenicol for treatment of clinical and subclinical bovine mastitis[J].Am J Vet Res,1996,5(4):526-528.

      [6]邱銀生,吳佳.獸用廣譜抗菌藥物氟甲砜霉素[J].中國獸藥雜志,1996,30(2):47-48.

      [7]朱蓓蕾.動物毒理學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1989:49-50.

      [8]于船,王萬欽.中國獸醫(yī)知識大全[M].成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,1997:36-38.

      [9]劉毓谷.衛(wèi)生毒理學(xué)基礎(chǔ)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:5-6.

      [10]畢聰明,周鐵忠,王坤,等.氟苯尼考長效制劑對雞大腸桿菌病的療效試驗[J].中國獸藥雜志,2004,38(7):56-58.

      (責(zé)編:張宏民)endprint

      2.3 中毒癥狀觀察 觀察肉仔雞接觸氟苯尼考的中毒癥狀是了解該化合物及本次實驗毒性的十分重要的一環(huán),是補充LD50這個參數(shù)不足的重要方面。本次實驗前隨機抽樣的50只健康狀況良好雞,經(jīng)灌胃服用氟苯尼考后6h觀察癥狀,劑量小的組別沒明顯癥狀,劑量大的組出現(xiàn)癥狀如表5所示。

      2.4 病理學(xué)檢查 取本次試驗中毒死亡的肉仔雞及時解剖做病理學(xué)檢查:剖檢見心腔淤血,心肌柔軟,心臟擴大,血液呈暗紅色,肝臟稍腫大,皮膚可視粘膜發(fā)紺。嗦囔積液,酸臭氣味,腸膨氣,嚴(yán)重幾只胃腸內(nèi)容物呈褐色。腎臟近曲小管、上皮細(xì)胞顆粒變性,腎小囊內(nèi)皮腫脹有出血,間質(zhì)充血,腸道粘膜上皮壞死,間質(zhì)血管出血,心肌纖維間有出血,脾臟及大腦均未見明顯病變。

      3 結(jié)論與討論

      (1)毒性是一種物質(zhì)對機體造成損害的能力。毒性較高的物質(zhì),只要相對較小的數(shù)量,即可對機體造成一定的損害,而毒性較低的物質(zhì),需要較多的劑量才呈現(xiàn)毒性[9],物質(zhì)毒性的高低,僅具有相對意義。本次試驗氟苯尼考對肉仔雞的急性中毒試驗中,氟苯尼考是屬于基本無毒性獸藥。在一定意義上,需達(dá)到比較大的數(shù)量,氟苯尼考對機體才具有毒性。

      (2)實驗動物染毒方法通常使用3種:即經(jīng)口,經(jīng)呼吸道及經(jīng)皮膚接觸方法。本實驗肉仔雞采用經(jīng)口灌服法,經(jīng)口比摻入飼料的優(yōu)點是劑量準(zhǔn)確、誤差小,其缺點是有傷及食道以及誤入氣管的可能。毒性試驗要求精確,所以采用經(jīng)口法。

      (3)本次試驗用改進寇氏法計算出氟苯尼考對肉仔雞的半數(shù)致死量LD50為10 392.020 6mg/kg,在工業(yè)毒物急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中屬于微毒(LD50>10 000mg/kg);化合物經(jīng)口急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中屬于2級—實際無毒

      (5 001mg/kg>LD50>15 000mg/kg)。說明氟苯尼考對肉仔雞的毒性非常小,可以在臨床上安全應(yīng)用,例如氟苯尼考長效制劑對雞大腸桿菌病的治療有很好的療效,并有較好的應(yīng)用前景[10]。

      (4)氟苯尼考屬于微毒性獸藥,在劑量6 250mg/kg體重之內(nèi)對機體無毒害作用。但在超過此劑量會造成中毒,如叫聲異常,呆立少動,肌顫,鼻孔溢液,皮膚充血、紫紺,眼球突出、充血、角膜混濁,瞳孔擴大的明顯中毒癥狀。

      (5)氟苯尼考的毒性非常小,一般在飼養(yǎng)過程中不會發(fā)生畜禽食用氟苯尼考中毒現(xiàn)象,所以廣大養(yǎng)殖戶可以放心使用。

      參考文獻

      [1]楊桂香,鄧國東,鄒明,等.氟砜霉素的急性毒性和亞慢性毒性試驗[J].中國獸醫(yī)學(xué)報,2000,20(3):275-278.

      [2]蕭志梅.氟苯尼考的臨床運用及市場狀況[J].中國獸醫(yī)藥雜志,2000,34(2):53-54.

      [3]杜向黨,閻若潛,沈建忠.氯霉菌類藥物耐藥機制的研究進展[J].動物醫(yī)學(xué)進展,2004,25(2):27-28.

      [4]Alm ajano J,Calvo J E,Madelenat A,et al.Efficacy of florfenicol compared to a penicillinstrep tomycin dexam ethasone form ulation in the rteatm ent of bovine respiatory syndrome[J].Medvet,1998,15(3):148-157.

      [5]Wilson D J,Sears P M,Gonzalez R N,et al.Efficacy of florfenicol for treatment of clinical and subclinical bovine mastitis[J].Am J Vet Res,1996,5(4):526-528.

      [6]邱銀生,吳佳.獸用廣譜抗菌藥物氟甲砜霉素[J].中國獸藥雜志,1996,30(2):47-48.

      [7]朱蓓蕾.動物毒理學(xué)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1989:49-50.

      [8]于船,王萬欽.中國獸醫(yī)知識大全[M].成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,1997:36-38.

      [9]劉毓谷.衛(wèi)生毒理學(xué)基礎(chǔ)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:5-6.

      [10]畢聰明,周鐵忠,王坤,等.氟苯尼考長效制劑對雞大腸桿菌病的療效試驗[J].中國獸藥雜志,2004,38(7):56-58.

      (責(zé)編:張宏民)endprint

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