標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的干擾和影響及對(duì)策研究

羅祖軍，鄒德學(xué)，王 強(qiáng)，蔡仲仁，薛燕芬，林棋榮

（1.深圳市龍崗區(qū)橫崗人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東深圳518115；2.北京大學(xué)深圳醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東深圳518036）

血液標(biāo)本是比較難以保存不變質(zhì)的液體標(biāo)本，在采集、運(yùn)送以及儲(chǔ)藏的過程中常常會(huì)造成血紅細(xì)胞破裂，細(xì)胞中的血紅蛋白（Hb）釋放到血清或者血漿中，導(dǎo)致血液標(biāo)本的溶血現(xiàn)象，對(duì)血液檢驗(yàn)結(jié)果造成一定的影響。一般血液標(biāo)本在生化檢驗(yàn)之前先要檢查檢驗(yàn)標(biāo)本是否發(fā)生溶血，方法是檢測(cè)血清或者血漿中蛋白是否超過300mg／L［1］。血液標(biāo)本中組分的改變會(huì)直接影響到臨床診斷，診斷出現(xiàn)誤差就會(huì)對(duì)患者的疾病治療造成不良影響，耽誤治療最佳時(shí)機(jī)，嚴(yán)重時(shí)可能危及患者的生命［2］。作者針對(duì)溶血前、后的生化檢驗(yàn)進(jìn)行臨床試驗(yàn)研究，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年6～8月來橫崗人民醫(yī)院體檢者58例作為研究對(duì)象。其中，男30例，女28例，年齡28～42歲，平均（35.78±6.23）歲。排除患有嚴(yán)重的血液類疾病、心腦血管疾病以及免疫類疾病患者。

1.2 方法 溶血制備：患者空腹情況下靜脈抽血5mL左右，分別注入2支肝素抗凝真空采血管，一支試管按照常規(guī)負(fù)壓將血液慢慢加入，另外一支試管去除試管帽后用力擠壓注入試管，多次操作，循環(huán)10次導(dǎo)致溶血。2種溶液在4 000r／min離心8～10min，后作為溶血管和正常管。選用BECKMANDXC－800全自動(dòng)生化分析儀、貝克曼專用試劑、定標(biāo)液以及德國(guó)朗道RAN－DOX測(cè)定K＋、Na＋、總蛋白質(zhì)（TP）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK－MB）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）、α－羥基丁酸脫氫酶（HBDH）、清蛋白（ALB）、高密度脂蛋白（HDL）以及三酰甘油（TG）等生化指標(biāo)。采用速率法測(cè)定AST和LDH；用雙縮脲法測(cè)定TP；用溴鉀酚綠法測(cè)定ALB；用離子選擇電極法測(cè)定K＋和Na＋，用終點(diǎn)法測(cè)定TG；CK、CK－MB以及HBDH采用重氮鹽法測(cè)定。然后根據(jù)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行回歸分析，采用血清Hb濃度校對(duì)分析。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察溶血前、后測(cè)定的K＋、Na＋、TP、CK、CK－MB、AST、LDH、HBDH、ALB、HDL 以及 TG 等生化指標(biāo)，分析哪些指標(biāo)與溶血相關(guān)，并統(tǒng)計(jì)分析血清Hb濃度校對(duì)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用t檢驗(yàn)，血清Hb濃度變化值（X）與配對(duì)資料差異有意義的項(xiàng)目溶血變化值（Y）采用多元回歸分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 溶血前、后血液標(biāo)本生化指標(biāo)的檢驗(yàn)情況 溶血前、后測(cè)定的各項(xiàng)生化指標(biāo)中 K＋、Na＋、TP、CK、CK－MB、AST、LDH以及HBDH等比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；溶血前、后測(cè)定的各項(xiàng)生化指標(biāo)中ALB、HDL以及TG等比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 溶血前、后血液標(biāo)本生化指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果±s，n＝58）

表1 溶血前、后血液標(biāo)本生化指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果±s，n＝58）

0.05 AST（g／L） 72.5±3.8 79.3±4.6 7.371 ＜0.05 CK（IU／mL） 127.6±68.5 168.9±78.6 6.002 ＜0.05 CK－MB（IU／mL） 6.5±1.2 84.6±16.5 87.109 ＜0.05 HBDH（IU／mL） 144.2±62.2 356.5±140.4 102.764 ＜0.05 LDH（IU／mL） 172.2±54.5 401.9±82.4 130.112 ＜0.05 K＋（mmol／L） 3.9±1.1 6.3±2.1 8.421 ＜0.05 Na＋（mmol／L） 142.2±5.6 123.1±6.7 5.388 ＜0.05 ALB（g／L） 41.6±1.8 41.6±1.7 0.123 ＞0.05 TG（mmol／L） 1.5±0.5 1.5±0.8 0.209 ＞0.05 HDL（mmol／L） 1.4±0.4 1.4±0.6 0.178 ＞0.05 t P TP（IU／mL） 37.1±23.2 60.8±19.5 20.398 ＜生化指標(biāo) 溶血前 溶血后

2.2 血清Hb濃度變化值與相應(yīng)溶血項(xiàng)目變化值比較 血清Hb濃度變化值與相應(yīng)溶血項(xiàng)目變化值存在一定相關(guān)性。見表2。

表2 血清Hb濃度變化值與相應(yīng)溶血項(xiàng)目變化值統(tǒng)計(jì)結(jié)果

續(xù)表2 血清Hb濃度變化值與相應(yīng)溶血項(xiàng)目變化值統(tǒng)計(jì)結(jié)果

2.3 生化指標(biāo)的回歸分析 K＋、Na＋、TP、CK、CK－MB、AST、LDH以及HBDH等指標(biāo)與溶血相關(guān)性較大，相關(guān)系數(shù)（r）分別是0.998、－0.990、0.960、0.985、0.977、0.989、0.991以及0.992。回歸方程分別為YTP＝0.266 X－1.822、YAST＝0.747 X－0.628、YCK＝0.109 X－0.019、YCK－MB＝0.081 X－1.837、YHBDH＝0.001 X－0.121、YLDH＝0.018 X－0.257、YK＋＝1.860 X－0.186以及YNa＋＝－0.228 X－0.257。

3 討 論

臨床生化指標(biāo)檢驗(yàn)中溶血是比較常見的干擾因素，溶血前、后生化指標(biāo)出現(xiàn)偏差的原因包括溶血對(duì)檢測(cè)試驗(yàn)本身的影響以及紅細(xì)胞中的物質(zhì)進(jìn)入血清或者血漿中［3－4］。LDH和AST在紅細(xì)胞內(nèi)的濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于在血清中的濃度，當(dāng)血液標(biāo)本發(fā)生溶血后，紅細(xì)胞中的LDH和AST就會(huì)轉(zhuǎn)移到血清中，使得生化指標(biāo)中的AST和LDH血清中的指標(biāo)偏高，影響臨床診斷治療。CK在正常的紅細(xì)胞中的含量為0，血液標(biāo)本發(fā)生溶血后會(huì)有腺苷酸激酶（AK）釋放到血清中，AK會(huì)轉(zhuǎn)化為肌酸和ATP，使得CK的含量測(cè)定值偏高［5］。CK－MB的含量隨著CK的升高而升高，在血液標(biāo)本溶血后同樣受到AK的影響而偏高。而HBDH的含量與AST的變化原理基本相似，溶血后會(huì)釋放到血清中使得檢驗(yàn)結(jié)果偏高。TP含量溶血后升高的原因在于大量血紅蛋白中的珠蛋白釋放到血清中。韋小榮［6］曾對(duì)標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響進(jìn)行研究，研究結(jié)論與以上理論基本相似。劉亞普［7］和楊洪芬等［8］對(duì)溶血后的生化指標(biāo)偏差進(jìn)行校對(duì)，效果比較理想，本院依照其采取的方法進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，K＋、Na＋、TP、CK、CK－MB、AST、LDH 以及HBDH等指標(biāo)與溶血的相關(guān)系數(shù)分別是0.998、－0.990、0.960、0.985、0.977、0.989、0.991以及0.992?；貧w方程分別為YTP＝0.266 X－1.822、YAST＝0.747 X－0.628、YCK＝0.109 X－0.019、YCK－MB＝0.081 X－1.837、YHBDH＝0.001 X－0.121、YLDH＝0.018 X－0.257、YK＋ ＝1.860X－0.186以及YNa＋＝－0.228X－0.257。Frank曾研究報(bào)道的Hb濃度為208 g／L時(shí)溶血標(biāo)本中的△LDH為268IU／L，本文的研究結(jié)論與其相似。各項(xiàng)指標(biāo)可以根據(jù)其回歸方程進(jìn)行校正，對(duì)輕、中度的溶血效果較好，嚴(yán)重溶血的最好重新采集，不能重新采集的Hb濃度校正對(duì)于受Hb濃度影響的指標(biāo)同樣具有一定的臨床價(jià)值。

總之，雖然Hb濃度校正具有一定的作用，但是，在血液標(biāo)本的檢驗(yàn)中要十分注意保證血液標(biāo)本最好不發(fā)生溶血情況，減少檢驗(yàn)診斷中的誤差［9－12］。采血器具要保持清潔和干凈，不可以用乙醇消毒，因?yàn)橐掖紩?huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞發(fā)生溶血［13－15］。采血過程中胳膊不宜扎太緊，抽血的速度不宜過快，以免造成紅細(xì)胞破裂發(fā)生溶血。防止其他物質(zhì)以及消毒液進(jìn)入血液標(biāo)本中，以免影響標(biāo)本的檢驗(yàn)結(jié)果。

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