劉美玲 曾穎
廣州醫(yī)學(xué)院荔灣醫(yī)院,廣東廣州 510170
現(xiàn)階段,隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展完善,同時(shí)也促進(jìn)了醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)的進(jìn)步,對(duì)臨床上諸多疾病的診斷提供了準(zhǔn)確的借鑒[1]。血小板由于其特殊性,檢測(cè)結(jié)果容易受到血小板聚集、紅細(xì)胞等因素的影響,然而應(yīng)用全自動(dòng)血液分析儀對(duì)血小板進(jìn)行檢測(cè)有較高的準(zhǔn)確性,具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。本文選擇在我院進(jìn)行血常規(guī)檢查的患者120例作為研究對(duì)象,旨在探討血小板采用XT-4000i血液分析儀兩種測(cè)定方法與血涂片復(fù)檢對(duì)比,具體信息如下。
本組共選擇研究對(duì)象120例,男72例,女48例,年齡6~80歲,平均(63.5±2.7)歲。均為門(mén)診和住院行血常規(guī)檢測(cè)的病例。
準(zhǔn)備EDTA-K2抗凝管,Sysmcx XT 4000i全自動(dòng)血液分析儀,雙目光學(xué)顯微鏡。應(yīng)用原裝配套試劑,嚴(yán)格參照儀器說(shuō)明書(shū)操作,定期校準(zhǔn)、質(zhì)控。儀器在檢測(cè)前狀態(tài)良好,應(yīng)用瑞氏染色法染色血涂片。
遵循不重復(fù)原則,從Sysemx XT-4000i檢測(cè)血常規(guī)標(biāo)本中選擇研究對(duì)象,其中無(wú)提示有血小板直方圖異常,電阻抗法(PLTI)計(jì)數(shù)正常者40例(觀察組A),提示有血小板直方圖異常,PLT-I計(jì)數(shù)>100×109/L40例 (觀察組B),提示有血小板直方圖異常,PLT-I計(jì)劃數(shù)<100×109/L 40例(觀察組C),涂片鏡檢對(duì)血小板形態(tài)分布和數(shù)量進(jìn)行觀察,間接計(jì)數(shù)血小板,并用光學(xué)(PLT-0)行血小板計(jì)數(shù)。依據(jù)《臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)》相關(guān)要求制作血涂片,需達(dá)邊緣整齊,頭體尾分明,厚薄適宜。待血液片干燥后,選擇瑞氏染色液進(jìn)行染色鏡檢,從50%紅細(xì)胞互相重疊區(qū)域觀察,逐漸至紅細(xì)胞完全散開(kāi)區(qū)域,使用油鏡觀察血小板形態(tài)與數(shù)量。通常情況下,有10~15個(gè)血小板分布于油鏡視野之下。<8個(gè),可對(duì)血小板減少初步證實(shí),>30個(gè)為血小板增加。細(xì)胞形態(tài)異常在油鏡下標(biāo)準(zhǔn)為:紅細(xì)胞碎片:有不完整的各種形狀的細(xì)胞碎片存在;小紅細(xì)胞:<6um直徑;血小板聚集:>5個(gè)血小板成堆;大、巨大血小板:直徑4~6μm或直徑>6μm。血小板顯微鏡下計(jì)數(shù):應(yīng)用城垛式計(jì)數(shù)方法,在血片體尾交界處區(qū),對(duì)N目測(cè)血小板數(shù)即100個(gè)血小板無(wú)重復(fù)計(jì)數(shù),并記錄N目測(cè)白細(xì)胞數(shù)即所有涉及視野的白細(xì)胞總數(shù),患者血小板嚴(yán)重減少,計(jì)數(shù)血小板不少于50個(gè);參考儀器計(jì)數(shù)的白細(xì)胞數(shù),對(duì)血小板總數(shù)進(jìn)行計(jì)算,N儀器×(N目測(cè)血小板數(shù)/N目測(cè)白細(xì)胞數(shù))×109/L=血小板數(shù)量N。
統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件采用SPSS 13.0版,組間計(jì)量數(shù)據(jù)采用(x±s)表示,計(jì)量資料行t檢驗(yàn),P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
采用電阻抗法、光學(xué)法、鏡檢法測(cè)得的血小板計(jì)數(shù)見(jiàn)表1。
表 1 不同方法血小權(quán)計(jì)數(shù)結(jié)果[(s)×109/L]
表 1 不同方法血小權(quán)計(jì)數(shù)結(jié)果[(s)×109/L]
組別 例數(shù) 電阻抗法 光學(xué)法 鏡檢法觀察組A觀察組B觀察組C 40 40 40 192±48.3 249±82.7 66.7±13.5 195±48.2 200±82.1 92.4±15.8 197±49.7 203±85.6 94.8±16.2
觀察組A中無(wú)干預(yù)因素存在,觀察組B小紅細(xì)胞干擾12例,紅細(xì)胞碎片干擾28例,觀察組C中大血小板干預(yù)24例,血小板聚集16例。以鏡檢為參考,在觀察組A中與電阻抗法、光學(xué)法比較,P>0.05,故大部分儀器應(yīng)用電阻抗法。
在大血小板、紅細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞組中,鏡檢和電阻抗法計(jì)數(shù)有差異(P<0.05),鏡檢和光學(xué)法無(wú)差異(P>0.05),就準(zhǔn)確性而方,光學(xué)法優(yōu)于電阻抗法。但在血小板聚集組織中,鏡檢法和電阻抗法有差異(P<0.05),鏡檢法和光學(xué)法計(jì)數(shù)結(jié)果有差異(P<0.05)。光學(xué)法有一定局限性存在。見(jiàn)表2。
表 2 干擾因素對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果影響分析[(±s),×109/L]
表 2 干擾因素對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果影響分析[(±s),×109/L]
注:與鏡檢法比較,*P<0.05。
組別 小紅細(xì)胞 紅細(xì)胞碎片 大血小板 血小板聚集電阻抗法光學(xué)法鏡檢法229±99.1*203±97.4 200±99.5 257±102*237±102 240±105 75.3±8.2*94.5±7.8 96.1±8.4 53.8±8.0*58.3±8.3*102±8.5
在臨床止血凝血的檢查中,血小板計(jì)數(shù)是較為重要的觀察指標(biāo)之一。電阻抗檢測(cè)屬于傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù),然而其檢測(cè)參數(shù)僅為細(xì)胞體積,無(wú)法將干擾物質(zhì)進(jìn)行完全的區(qū)分,例如病理樣本中的細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞、大血小板,因此不能提供準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。所以為確保血小板計(jì)數(shù)結(jié)果的可靠性,通過(guò)應(yīng)用全自動(dòng)血液分析儀能夠很大程度彌補(bǔ)上述的不足[2-3]。
本次研究顯示,光學(xué)法可使大血小板、紅細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞對(duì)計(jì)數(shù)血小板的影響較好消除,但血小板計(jì)數(shù)受血小板聚集的影響無(wú)法消除。相較儀器自動(dòng)血小板,血小板采用血涂片觀察優(yōu)點(diǎn)較明顯[4-5]。通常肉眼在顯微鏡下,可對(duì)細(xì)胞碎片、紅細(xì)胞、血小板區(qū)分,在對(duì)血小板聚集情況進(jìn)行觀察時(shí),可將血小板凝集、大血小板、細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞對(duì)血小板的干預(yù)排除,并對(duì)各種細(xì)胞比例直接計(jì)數(shù),為顯微鏡檢對(duì)血小板間接計(jì)數(shù)運(yùn)用基礎(chǔ)[6]??捎肞LT-I法作臨床實(shí)際工作的常規(guī)標(biāo)本檢測(cè),若標(biāo)本特殊時(shí),需行PLT-0法再檢,以獲取可靠的血小板結(jié)果,降低復(fù)查例數(shù),節(jié)約成本,特殊病例可用顯微鏡法復(fù)查,為臨床診斷提供準(zhǔn)確參考依據(jù)。
綜上,血小板檢測(cè)中,應(yīng)用光學(xué)法可較好消除大血小板、小紅細(xì)胞等對(duì)計(jì)數(shù)的影響,但血小板聚集時(shí)產(chǎn)生的計(jì)數(shù)干擾無(wú)法消除,需結(jié)合鏡檢,以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。
[1]呂紅艷,劉雪蓮.機(jī)采血小板適宜人群的探討[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2011,17(31):80-81.
[2]Va1erie L.Va1uation of the performance of the sysmex XT-2000ihemato1-ogy ana1yzer with who1e b1oods stored at room temperature[J].Vet C1in Patho1,2009(38):230-241.
[3]羅麗貞,葉金鋒,劉偉陽(yáng).XE-5000血細(xì)胞分析儀血小板計(jì)數(shù)性能評(píng)價(jià)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(4):400-402.
[4]劉善鳳,干利民,曾筱倩,等.涂片鏡檢對(duì)初步糾正血小板假性降低的意義[J].臨床血液學(xué)雜志,2010,23(4):193-195.
[5]Anton H Sutor,M D.Astrid Croh Mann.ct a1.Prnh1cmswith p1ate1et counting in thromhocytopenis A rapid manna1method tomeusur e 1ow p1ate1et coun1s.Seminar a in thrombosisand bemosiasis,2001,27(3):237-243.
[6]劉發(fā)新,孫東明.毛細(xì)血管血放置時(shí)間對(duì)紅細(xì)胞和血小板測(cè)定結(jié)果的影響[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師:醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè),2012,17(14):250.