七菊蘆薈飲對(duì)黃褐斑模型小鼠SOD活性和MDA含量影響的實(shí)驗(yàn)研究

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007

七菊蘆薈飲對(duì)黃褐斑模型小鼠SOD活性和MDA含量影響的實(shí)驗(yàn)研究

韓瑩張巖李英姿趙晶李懷軍

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007

目的探討七菊蘆薈飲內(nèi)服對(duì)黃褐斑小鼠皮膚及血液中SOD， MDA含量的影響。方法實(shí)驗(yàn)采用紫外線照射法構(gòu)建黃褐斑小鼠模型，檢測(cè)皮膚及血清中的SOD及MDA含量。結(jié)果七菊蘆薈飲給藥組小鼠皮膚中SOD活性較模型組明顯升高，MDA含量降低。結(jié)論七菊蘆薈飲對(duì)紫外線照射所致黃褐斑有明顯的改善作用。

七菊蘆薈飲；黃褐斑；超氧化岐化酶；丙二醛

黃褐斑是臨床上常見(jiàn)而又難以治愈的皮膚病之一, 是多發(fā)性損容性慢性皮膚病，嚴(yán)重影響患者的身心健康，且其發(fā)病率有逐年增加的趨勢(shì)，多見(jiàn)于成年女性，臨床表現(xiàn)常見(jiàn)發(fā)生在面部的對(duì)稱(chēng)性蝴蝶狀或局限性褐色或淡褐色斑。本研究基于中醫(yī)對(duì)黃褐斑的研究和黃褐斑臨床療程較長(zhǎng)的特點(diǎn),采用七菊蘆薈飲治療黃褐斑。旨在從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的角度研究七菊蘆薈飲祛斑的作用機(jī)理，為中醫(yī)美容找到現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的理論依據(jù)，為進(jìn)一步研制中藥美容制劑奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物 七菊蘆薈飲由蘆薈葉，白菊花，三七根組成，購(gòu)于佳院中藥制劑室，取三七根50g，白菊花50g煎藥取汁，將新鮮蘆薈20g榨汁加入，備用；維生素C泡騰片，由廈門(mén)美好醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 試劑 硫化鈉，由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號(hào)20001204-2；SOD和MDA活性測(cè)定試劑盒，均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，批號(hào)20041221。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠，雌性，體重18～20g，由佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：黑動(dòng)第99102001號(hào)。

1.1.4 儀器設(shè)備 SS—03型紫外線光療儀，由上海Sigma高技術(shù)有限公司生產(chǎn)；奧林巴斯BX41型研究用熒光顯微鏡，由日本奧林巴斯公司生產(chǎn)；半自動(dòng)生化分析SBA-710，由長(zhǎng)春塞諾邁得公司生產(chǎn)；電子分析天平FA2004N，由塞多利斯公司生產(chǎn)；722N型分光光度計(jì)，由上海精密儀器有限公司分析儀器廠生產(chǎn)；組織粉碎機(jī)FW135，由天津泰斯特公司生產(chǎn)；PL602S型電子天平，由梅特勒-托利多儀器有限公司生產(chǎn)；組織勻漿機(jī)JJ-2，由金壇市榮華儀器廠生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組 選取昆明種普通級(jí)雌性小白鼠60只，體重18～20g，隨機(jī)分為6組,每組10只，即空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、七菊蘆薈飲低劑量組、七菊蘆薈飲中劑量組和七菊蘆薈飲高劑量組。

1.2.2 動(dòng)物模型的制備[1]先將小鼠背部右側(cè)器械脫毛,面積4cm×3cm，后用10%的硫化鈉水溶液每周去毛一次,除空白對(duì)照組不進(jìn)行紫外線照射外,其余各組均選取波長(zhǎng)為275nm～320nm 的中波紫外線每日照射小鼠1次，每次照射60min，連續(xù)照射8周，奧林巴斯熒光顯微鏡觀察造模是否成功。

1.2.3 給藥 動(dòng)物成模后，各組均灌胃給藥，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組分別灌服蒸餾水10ml/kg/d，陽(yáng)性對(duì)照組灌服維生素C溶液(按維生素C的劑量折算), 七菊蘆薈飲低、中、高劑量組分別灌服七菊蘆薈飲溶液10ml/kg/d、20ml/kg/d、30ml/kg/d，連續(xù)給藥8周。

1.2.4 指標(biāo)測(cè)定[2]采用眼球摘除法取血3～5ml, 3000～4000r/min離心, 取血清，檢測(cè)血清中SOD和MDA含量；實(shí)驗(yàn)小鼠全部斷頸處死，取適量背部脫毛處的皮膚，組織勻漿后測(cè)定SOD和MDA含量。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，小鼠經(jīng)紫外線照射后,模型對(duì)照組皮膚組織及血液中SOD活性下降，MDA含量增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與模型對(duì)照組比較，各給藥組皮膚組織及血液中SOD活性顯著升高，MDA含量顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與陽(yáng)性對(duì)照組比較，中藥低、中、高劑量組均無(wú)顯著性差異(P>0.05)七菊蘆薈低、中、高劑量組之間無(wú)差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

表1 七菊蘆薈飲對(duì)黃褐斑小鼠皮膚組織中SOD活性及MDA含量的影響

注：與模型對(duì)照組相比：*P<0.05，**P<0.01。

表2 七菊蘆薈飲對(duì)黃褐斑小鼠血液中SOD活性及MDA含量的影響

注：與模型組對(duì)照組相比,*P<0.05，**P<0.01。

3 討論

黃褐斑是常見(jiàn)于顏面部位的色素代謝障礙性皮膚病,它不但影響美觀,而且與機(jī)體的整個(gè)功能狀態(tài)密切相關(guān)。黃褐斑的發(fā)病機(jī)理復(fù)雜,一般認(rèn)為是由多種因素導(dǎo)致黑素細(xì)胞中黑色素過(guò)量表達(dá)及代謝障礙所致[3]。黑色素的形成與脂質(zhì)過(guò)氧化和酪氨酸酶密切相關(guān)。人體在應(yīng)激狀態(tài)下或免疫功能體下時(shí)，可使體內(nèi)氧自由基增多，SOD相對(duì)不足，導(dǎo)致過(guò)多的氧自由基與真皮層細(xì)胞產(chǎn)生氧化反應(yīng)，形成大量的脂褐素(過(guò)氧化脂質(zhì))，形成黃褐斑或妊娠斑[4]。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，黃褐斑多與肝失條達(dá)、憂思無(wú)度、飲食失調(diào)等導(dǎo)致氣機(jī)郁滯，氣滯而血行不暢，血瘀氣滯，面部肌膚失營(yíng)養(yǎng)、脈絡(luò)瘀阻，而發(fā)為黃褐斑[5]。肝氣郁結(jié)化火，瘀血郁積化熱。故而對(duì)于氣滯血瘀兼熱型黃褐斑，應(yīng)從疏肝理氣，活血化瘀兼清熱進(jìn)行論治。

本研究自擬方藥七菊蘆薈飲，由三七、菊花和蘆薈三味藥組成，三七自古以來(lái)就被稱(chēng)為活血化淤，消腫定痛、清熱平肝之佳品，白菊花具有平肝清熱之功，蘆薈有美白、袪斑、潤(rùn)膚的功效。全方共奏活血化瘀、清肝解毒之效。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：七菊蘆薈飲能顯著提高紫外線照射模型動(dòng)物皮膚組織及血液中SOD的活性, 降低皮膚組織及血液中MDA的含量，抑制機(jī)體內(nèi)過(guò)氧化程度，從而使黑色素細(xì)胞的生成減少，減少皮膚的色素沉著。本研究為內(nèi)服中藥治療黃褐斑的臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

[1] 汪南玥,陳家旭,吳曉丹.肝郁型黃褐斑小鼠模型的建立與現(xiàn)有模型的比較研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,2007,22(5):325-327

[2] 鄭慕雄，郭義龍，陳玉興．柴紅丸治療黃褐斑小鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究[J]．世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011,6(2):112-114.

[3] 劉冬梅,高進(jìn),朱林學(xué),等.400例黃褐斑患者發(fā)病因素分析[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜病,2006,22(4):303-304.

[4] 苑光軍,姜醒,劉斌,等.當(dāng)歸芍藥散對(duì)黃褐斑模型SOD、MDA及病理形態(tài)學(xué)影響的研究[J].中醫(yī)藥信息,2008,25(6):81-82.

[5] 葉世龍.論黃褐斑的病因病機(jī)[J].中華中醫(yī)藥雜志,2007,22(9): 636-638.

黑龍江省中醫(yī)藥管理局科研項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：ZHY12-W020。

韓瑩，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院，講師，Tel: 15846998960。

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