HMGB1在心肌炎中的致病因素及臨床調(diào)控效果

崔建　劉偉等

【摘要】病毒性心肌炎，主要是由于心肌出現(xiàn)病毒感染狀況而產(chǎn)生的，其發(fā)病率呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，尤其是青壯年與兒童。心肌炎具有復(fù)發(fā)率高、進(jìn)展快等一系列特點(diǎn)，能夠造成心源性休克、心律失常等不良狀況，是青少年發(fā)生猝死的重要原因之一。本文主要針對(duì)HMGB1在心肌炎中的致病因素進(jìn)行深入分析，探究HMGB1在臨床治療心肌炎中的效果。

【關(guān)鍵詞】HMGB1；心肌炎；致病因素；臨床調(diào)控；效果

【中圖分類號(hào)】 R542.2+1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

高遷移率族蛋白B1，英文簡(jiǎn)稱為HMGB1，它是高遷移率族蛋白中的一個(gè)重要組成部分，主要作用就是將多種組織細(xì)胞表達(dá)出來(lái)，具有穩(wěn)固胞核結(jié)構(gòu)、調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄功能[1]。HMGB1結(jié)構(gòu)處于一個(gè)高度保守的狀態(tài)，組成部分主要為215個(gè)氨基酸，主要包括與A-box、B-box相近的受體晚期糖基化終末產(chǎn)物結(jié)合區(qū)、DNA綁定區(qū)域。本文主要分析HMGB1在心肌炎中的致病因素，探討HMGB1對(duì)于心肌炎的臨床調(diào)控效果。

1HMGB1在心肌炎中的致病因素分析

HMGB1，實(shí)質(zhì)上就是一個(gè)晚期致炎因子，它與很多全身性炎癥、病原性微生物感染以及自身免疫性疾病的產(chǎn)生、發(fā)展呈現(xiàn)十分密切的聯(lián)系。細(xì)胞壞死與機(jī)械損傷等一系列狀況均能夠?qū)MGB1進(jìn)行釋放，壞死部位或者損傷部位會(huì)聚集大量的介導(dǎo)單核-巨噬細(xì)胞，而且還會(huì)將大量的炎癥因子釋放出來(lái)。HMGB1具備的生物學(xué)作用呈現(xiàn)兩面性，不僅取決于是否為主動(dòng)分泌的分析結(jié)構(gòu)，還是被動(dòng)釋放的分析結(jié)構(gòu)之間存在的差異，還與機(jī)體自身處于一個(gè)怎樣的局部微環(huán)境與狀態(tài)呈現(xiàn)一定的相關(guān)性。例如：出現(xiàn)機(jī)械損傷或者表皮擦傷狀況的時(shí)候，發(fā)生損傷的細(xì)胞會(huì)將HMGB1釋放出來(lái)，而釋放的HMGB1能夠?qū)⑵洚?dāng)作危險(xiǎn)信號(hào)，將機(jī)體的吞噬細(xì)胞轉(zhuǎn)移到出現(xiàn)皮損狀況的部位，避免病原微生物侵入損傷部位，防止感染現(xiàn)象的發(fā)生。HMGB1在滋生免疫性損傷中，具有炎癥介導(dǎo)作用，與持久性免疫損傷具有一個(gè)非常密切的聯(lián)系，所以人們開(kāi)始嘗試拮抗HMGB1具備的作用，以此對(duì)免疫炎癥進(jìn)行有效的控制，由此可知，可以將HMGB1當(dāng)作干預(yù)免疫損傷性炎癥的一個(gè)重點(diǎn)。相關(guān)研究資料中顯示，B-box具有的作用與HMGB1相類似，因此表達(dá)B-box蛋白，并且對(duì)B-box單克隆抗體進(jìn)行制備，有利于更好的分析與研究HMGB1在炎癥、免疫調(diào)節(jié)中具備的作用。

2HMGB1在心肌炎中的臨床調(diào)控效果分析

HMGB1對(duì)于多種組織細(xì)胞具有良好的表達(dá)作用，它是一種損傷相關(guān)的分析或者危險(xiǎn)警報(bào)分析識(shí)別模式。HMGB1在進(jìn)化過(guò)程中處于一個(gè)高度保守的狀態(tài)，小鼠與大鼠之前的同源性為100%，人類與嚙齒動(dòng)物之間在酸性尾端處存在氨基酸差異。細(xì)胞壞死與機(jī)械損傷對(duì)于HMGB1的釋放處于一個(gè)被動(dòng)狀態(tài)，活化的樹(shù)突狀細(xì)胞與巨噬細(xì)胞對(duì)于HMGB1的分泌處于一個(gè)主動(dòng)狀態(tài)，HMGB1的分泌或者釋放與其受體RAGE、TLR2、TLR4、TLR4以及TLR7等結(jié)合在一起，有利于促進(jìn)趨化因子、粘附分析以及前炎癥因子的表達(dá)，參與心血管系統(tǒng)疾病、組織損傷與再修復(fù)、缺血再灌注損傷、癌癥、自身免疫性疾病、敗血癥以及CD4+T的發(fā)生與發(fā)展。針對(duì)自身免疫性心肌炎的發(fā)生與發(fā)展是否有HMGB1參與其中，HMGB1的對(duì)于Th17細(xì)胞的臨床調(diào)控效果進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析。

2.1實(shí)驗(yàn)材料、方法

實(shí)驗(yàn)材料：小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒、莫能霉素、PEanti-mouse/human RORγt、FITC/PE anti-mouse CD4、FITC/PE anti-mouse IgG、FITC anti-mouse IL-17A、anti-CD28mAb、以及anti-CD3mAb（均由Bender MedSystems公司生產(chǎn)制造）；小鼠CD4T細(xì)胞免疫磁珠（由Miltenyi公司生產(chǎn)制造）；乙酸肉豆蔻佛波醇、離子霉素（由Sigma公司生產(chǎn)制造）；小牛血清、RPMI-1640培養(yǎng)基（由Gibco公司生產(chǎn)制造）；細(xì)胞因子IL-6、TGF-β（由PeproTech公司生產(chǎn)制造）；iQ SYBR Green Supermix（由Bio-Rad公司生產(chǎn)制造）；BALB/c小鼠（10只，體重17-20g，6-9周齡）。

實(shí)驗(yàn)方法：將10只小鼠劃分為研究組與對(duì)照組，兩組各5只。按照1：1比例緩和弗氏完全佐劑與100μg小鼠心肌球蛋白，在第0天與第7天，免疫小鼠，采用PBS與CFA對(duì)小鼠進(jìn)行免疫處理，然后在小鼠的眼球處收集血液樣本，并將小鼠處死，將血液樣本存放于-80℃處；將小鼠的心臟去除，然后采用10%福爾馬林進(jìn)行固定。免疫處理一周之后，將小鼠分為研究組與對(duì)照組，研究組行HMGB1 B-box單克隆抗體皮下注射，對(duì)照組給予PBS，2周之后將小鼠處死，收集血液樣本，心臟組織的固定采用福爾馬林。

2.2統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS17.0軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，（±s）表示計(jì)量資料，P<0.05時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3結(jié)果

10只小鼠心肌炎誘導(dǎo)成功。研究組小鼠HMGB1 mRNA表達(dá)水平在第14天與21天時(shí)分別為3717.49±210.92pg/ml、5030.18±1102.07pg/ml，明顯高于對(duì)照組2000±1193.38pg/ml，兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3結(jié)論

因?yàn)樾募∏虻鞍揍尫拧⑿募〖?xì)胞破壞以及病毒感染等多個(gè)因素，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)自身免疫性心肌炎，這也是造成心衰、擴(kuò)張型心肌病的重要因素[2]。相關(guān)研究報(bào)道中明確提出，導(dǎo)致自身免疫性心肌炎的重要原因就是Th17細(xì)胞介導(dǎo)出現(xiàn)的進(jìn)行性心肌損傷。

本研究中，研究組HMGB1的表達(dá)水平明顯優(yōu)于對(duì)照組，兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與蘇兆亮[3]的相關(guān)研究結(jié)果基本一致。

綜上所述，HMGB1是一個(gè)非常重要的炎癥介質(zhì)，參與敗血癥、自身免疫性疾病、再灌注損傷以及腫瘤等一系列炎癥病癥的發(fā)展，抑制或者中和HMGB1能夠在很大程度上緩解炎癥性疾病，在心肌炎的臨床調(diào)控中具有顯著效果。

參考文獻(xiàn)

[1]王茂偉.HMGB1對(duì)病毒性心肌炎DNA粘膜疫苗的免疫增強(qiáng)作用及其機(jī)制[D].蘇州大學(xué)，2012.

[2]胡辰晨，劉嫣方，蘇兆亮.HMGB1在心血管疾病中作用的研究進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011（21）：2475-2479.

[3]蘇兆亮.HMGB1在心肌炎中的致病機(jī)制及調(diào)控作用研究[D].江蘇大學(xué)，2011.