酵母細胞壁多糖對異育銀鯽生長、免疫和抗應激能力的影響

楊 凡， 聶 琴， 陳昌福， 李 彪

（1.安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌 443003；2.華中農(nóng)業(yè)大學水產(chǎn)學院，湖北武漢 430070）

應激反應是魚體對各種環(huán)境因子的超常刺激所產(chǎn)生的一種非特異性生理反應。過度的應激不僅影響魚類的生產(chǎn)性能，還會誘發(fā)多種疾病，甚至造成死亡。酵母菌細胞壁多糖作為一種良好的非特異性免疫增強劑，其主要功能性成分是β-葡聚糖、甘露寡糖等（朱紅梅，2013）。研究表明，酵母細胞壁多糖應用于水產(chǎn)動物養(yǎng)殖，具有促進機體免疫功能、增強機體抗病能力與應激能力等（丁卓瑩和洪徐鵬，2013；曹俊明等，2013）。本試驗以酵母細胞壁多糖為試驗材料，以異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）為試驗對象，旨在研究酵母細胞壁多糖對養(yǎng)殖異育銀鯽免疫能力和抗應激能力的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗用魚及飼養(yǎng)條件 異育銀鯽由武漢九州神農(nóng)賽科公司提供，選擇體色、體況、體長基本一致，平均體重為（214.0±21.0）g的異育銀鯽作為試驗對象，隨機分為4組，分別在面積約為1.33萬m2養(yǎng)殖池塘進行飼養(yǎng)。

1.2 試驗飼料的制作與投喂 對照組投喂基礎飼料，試驗組分別投喂添加0.5‰、1‰、2‰酵母細胞壁多糖 （由安琪酵母股份有限公司提供）的飼料，所有飼料均制成顆粒料，每日投餌量均為體重的2%（隨魚的進食情況作適當變化），每天早、晚各投喂1次，連續(xù)投喂55 d。試驗結束后進行后續(xù)測定分析。

1.3 生長性能的測定 試驗開始前和結束后，分別對各組魚進行抽樣（20尾）稱重。試驗期間，記錄每日投喂飼料量。生長性能用增重量和增重率來衡量。

增重率/%=（試驗末期均重－試驗初期均重）/試驗初期均重×100。

1.4 免疫指標的檢測 分別在試驗的第 10、25、40、55天，每組取魚10尾，尾靜脈采血，將全血樣本分為2份，一份自然凝固，以制備血清，另一份用肝素抗凝，用于白細胞吞噬活性的檢測。溶菌酶活性的檢測采用劉洪梅等（2010）的方法，白細胞吞噬活性的檢測采用陳昌福等（1995）的方法。

1.5 抗應激效果測定 抗應激能力的比較，根據(jù)聶琴等（2014）的方法操作，比較試驗組和對照組魚的耐低氧、運輸和抗干旱能力差異。

1.6 數(shù)據(jù)分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析，先用ANOVA進行單因素方差分析，顯著差異（P ＜ 0.05），進行 Duncan’s多重比較分析。數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準誤表示。

2 結果

2.1 酵母細胞壁多糖對異育銀鯽生長性能的影響 從表1可知，在基礎飼料中添加不同比例酵母細胞壁多糖均能有效改善異育銀鯽的生長效果，其中添加0.5‰、1‰、2‰多糖組增重率分別較對照組提高 51.14%（P ＜ 0.01）、9.69%（P ＞0.05）、15.77%（P ＞ 0.05）。

表1 酵母細胞壁多糖對異育銀鯽生長性能的影響

2.2 酵母細胞壁多糖對血清中溶菌酶活性的影響 由表2可知，添加酵母細胞壁多糖可提高血清中溶菌酶活性，但各組間無顯著差異 （P>0.05）。第55天時酵母細胞壁多糖對血清中溶菌酶活性影響較小，可能是受到水溫下降的影響。對比酵母細胞壁多糖不同添加比例下溶菌酶活性的變化情況，可以看出，添加0.5‰的酵母細胞壁多糖組提升溶菌酶活性效果相對較好。

表2 酵母細胞壁多糖對血清中溶菌酶活性的影響mg/mL

2.3 酵母細胞壁多糖對白細胞吞噬活性的影響從表3可知，在試驗的第10天，試驗組與對照組相比白細胞吞噬活性均無明顯變化，第 25、40、55天，各試驗組白細胞的吞噬百分比（PP）和吞噬指數(shù)（PI）均高于對照組，但均無顯著差異（P＞0.05）；對比不同添加比例下吞噬活性的變化情況，可知，添加1‰的酵母細胞壁多糖組提升效果相對較好。

表3 酵母細胞壁多糖對白細胞吞噬活性的影響

2.4 酵母細胞壁多糖對異育銀鯽抗應激能力的影響 由表4、5、6所示結果可知，與對照組相比，添加酵母細胞壁多糖各組異育銀鯽在3種應激狀態(tài)下的死亡率均略低于對照組，無顯著差異（P＞0.05），但呈現(xiàn)出隨多糖添加量的增加死亡率下降的趨勢。

表4 酵母細胞壁多糖對異育銀鯽抗低氧能力的影響

表5 酵母細胞壁多糖對異育銀鯽抗運輸能力的影響

表6 酵母細胞壁多糖對異育銀鯽抗干旱能力的影響

3 討論

本試驗結果顯示，添加酵母細胞壁多糖能夠在一定程度上提高溶菌酶活性和白細胞吞噬活性，說明添加酵母細胞壁多糖可提高異育銀鯽的非特異性免疫力。汪成竹等（2008）在飼料中添加酵母細胞壁多糖時，斑點叉尾鮰白細胞吞噬活性和溶菌酶的活性均顯著高于空白對照組。劉勇等（2007）在飼料中添加酵母細胞壁多糖后，試驗結果顯示河鯽魚血液中白細胞吞噬活性、血清和體表黏液的溶菌酶活性都有明顯提高。嚴晶等（2009）在日糧添加酵母細胞壁多糖，結果顯示添加酵母細胞壁多糖可促進斑點叉尾鮰免疫器官的發(fā)育，并通過提高白細胞吞噬活性來增強機體的非特異性免疫力。

本試驗結果表明，在試驗第10天，試驗組和對照組的非特異性免疫機能無顯著差異，第25天和第40天時試驗組溶菌酶活性和白細胞吞噬活性有所提高。說明通過口服途徑使用酵母細胞壁多糖需經(jīng)過一段時間才能起到免疫刺激作用。這一試驗結果與李桂峰等（2003）的研究結果一致。

試驗中添加0.5‰的酵母細胞壁多糖能夠顯著促進異育銀鯽的生長，同時隨著添加量的增加，異育銀鯽在低氧、長途運輸和干旱條件下的死亡率也有所降低。酵母細胞壁多糖通過提高魚類的免疫保護力，而增強機體抗應激能力，減少魚類死亡率，繼而提高魚類存活率、生長速度及飼料效率。前人的研究報告中，劉倩等（2012）在凡納濱對蝦飼料中添加不同濃度的β-葡聚糖，結果顯示各試驗組特定生長率（SGR）均顯著高于對照組。屈亮等（2012）在草魚飼料中適當添加酵母細胞壁多糖，結果顯示，試驗組的餌料系數(shù)顯著低于對照組，生長性能得到明顯提高。李海燕等（2004）研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加酵母細胞壁多糖對提高豐產(chǎn)鯽的體長和體重有比較顯著的效果。

4 結論

酵母細胞壁多糖具有提高機體非特異性免疫力、抗應激能力和促進生長的作用，作為免疫增強劑，能夠很好的改善水產(chǎn)品的健康養(yǎng)殖現(xiàn)狀，在疾病高發(fā)、應激源多樣化的現(xiàn)代水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中具有十分廣闊的應用前景。

[1]曹俊明，趙紅霞，黃燕華，等.β-葡聚糖及其在水生動物中的應用研究[J].飼料工業(yè)，2013，18：1 ～ 6.

[2]陳昌福，史維舟，李靜，等.翹嘴鱖對柱狀嗜纖維菌免疫反應的初步研究[J].華中農(nóng)業(yè)大學學報，1995，14（4）：377 ～ 380.

[3]丁卓瑩，洪徐鵬.免疫多糖在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應用[J].江西水產(chǎn)科技，2013，3：40～42.

[4]李桂峰，康裕財，孫際佳，等.酵母多糖對赤眼鱒非特異性免疫機能的影響[J].中山大學學報（自然科學版），2003，4：55 ～ 58.

[5]李海燕，李桂峰，劉俊.飼料中添加酵母多糖對豐產(chǎn)鯽的影響研究[J].廣州大學學報（自然科學版），2004，2：122 ～ 125.

[6]劉洪梅，馬志紅，晉晶，等.酵母多糖對鯉魚生長和免疫功能的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2010，4：1874 ～ 1875.

[7]劉倩.復合免疫增強劑對凡納濱對蝦生長、存活及非特異性免疫力的影響：[碩士學位論文][D].中國海洋大學，2010.

[8]劉勇，楊季芳，陳昌福.免疫增強劑對河鯽魚白細胞吞噬和溶菌酶活性的影響[J].河北漁業(yè)，2007，2：11 ～ 15.

[9]聶琴，楊凡，陳昌福，等.酵母細胞壁多糖對草魚抗應激能力的影響[J].飼料研究，2014，1：27 ～ 31.

[10]屈亮，劉立鶴，譚斌，等.酵母免疫多糖對草魚幼魚生長性能的影響[J].飼料研究，2012，9：34 ～ 37.

[11]汪成竹，姚鵑，陳昌福.酵母復合物對斑點叉尾的免疫調節(jié)作用[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2008，11：262 ～ 264.

[12]嚴晶，劉輝宇，朱惠玲，等.酵母多糖對斑點叉尾鮰免疫功能的影響[J].糧食與飼料工業(yè)，2009，11：42 ～ 44.

[13]朱紅梅.酵母細胞壁在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應用研究進展[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2013，10：26 ～ 29.