活血補(bǔ)髓湯治療激素性股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究*

★ 劉國(guó)巖 徐琬梨 張世華

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨科 濟(jì)南 250014；2.山東中醫(yī)藥大學(xué) 濟(jì)南 250355)

激素性股骨頭缺血性壞死是指因大劑量應(yīng)用激素而造成股骨頭骨的活成分死亡所引起的病理過程，其發(fā)病率呈逐年增加趨勢(shì)，已占非創(chuàng)傷性股骨頭壞死的首位[1]。目前對(duì)其治療尚無(wú)滿意的方法。中藥活血補(bǔ)髓湯是在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，結(jié)合多年的臨床實(shí)踐篩選出來的治療股骨頭缺血性壞死的有效方藥。為進(jìn)一步揭示其作用機(jī)理,從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證研究。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)用藥

1.1.1 中藥活血補(bǔ)髓湯

主要成分為丹參、黃芪、當(dāng)歸、水蛭、全蝎、鹿茸、仙靈脾、仙茅、骨碎補(bǔ)、牛膝、肉桂、白芍、白術(shù)、茯苓、甘草。

1.1.2 仙靈骨葆膠囊 由貴州同濟(jì)堂制藥有限公司生產(chǎn)(國(guó)藥準(zhǔn)字Z20025337)。

1.1.3 地塞米松注射液 由山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司提供(國(guó)藥準(zhǔn)字H37021969)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 36只新西蘭大白兔(許可證號(hào)：SCXK魯20090001)，雌雄各半，體重2.5-3.0kg，隨機(jī)分為3組，模型組、對(duì)照組、治療組，每組各12只。

1.2.2 參照賀式造模法[2]給模型組、對(duì)照組、治療組家兔臀部肌肉注射地塞米松注射液的方法,每次10mg/kg/只,每周2次,共4周,正常組皮下注射生理鹽水2mL/kg/只,所有動(dòng)物肌注青霉素8萬(wàn)U/只,每周1次,以預(yù)防感染。

1.2.3 造模成功后，一周后起對(duì)照組給予10mL/日仙靈骨葆膠囊水溶液灌胃，治療組給予10mL/日活血補(bǔ)髓湯灌胃，正常組、模型組給以生理鹽水5mL/kg/日體重灌胃飼養(yǎng)，連續(xù)給藥8周后取材。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 組織形態(tài)學(xué)檢查 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死后，立即解剖髖關(guān)節(jié)，取其股骨頭，從冠狀面剖開，固定、脫鈣、切片、HE染色,光學(xué)顯微鏡觀察骨組織和骨髓組織的骨小梁，骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞的病理改變?？展窍莞C計(jì)數(shù):對(duì)每一標(biāo)本在高倍視野下隨機(jī)計(jì)數(shù)50個(gè)骨陷窩,計(jì)算其中空骨陷窩所占的百分比

1.3.2 血清學(xué)檢查 分別測(cè)定血清骨鈣素(BGP)含量、血清白介素-6(IL-6)含量、血管內(nèi)皮四項(xiàng)含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組間比較采用χ2檢驗(yàn),α=0.05,所有統(tǒng)計(jì)過程用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 組織形態(tài)學(xué)變化

模型組：股骨頭軟骨下均有區(qū)骨小梁變細(xì)、稀疏。骨髓細(xì)胞大面積減少，部分骨陷窩內(nèi)骨細(xì)胞消失，空骨陷窩數(shù)明顯增多。對(duì)照組：部分空骨陷窩，骨髓造血細(xì)胞較多，骨小梁表面有少許新骨形成。治療組：骨小梁結(jié)構(gòu)基本完整，排列規(guī)則。少許空骨陷窩，骨小梁表面有新骨形成。空骨陷窩計(jì)數(shù)治療組與模型組、對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),模型組與對(duì)照組組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。

表1 各組空骨陷窩率比較(n=12)

2.2 血清骨鈣素(BGP)及白介素-6(IL-6)含量測(cè)定結(jié)果(表2)

表2 血清骨鈣素(BGP)及白介素-6(IL-6)含量測(cè)定結(jié)果

2.3 血管內(nèi)皮四項(xiàng)含量測(cè)定結(jié)果(表3)

表3 血管內(nèi)皮四項(xiàng)含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

在實(shí)驗(yàn)研究中，兔血清中BGP、IL-6和血管內(nèi)皮四項(xiàng)測(cè)定結(jié)果表明活血補(bǔ)髓湯可以明顯的升高血清BGP、降低IL-6，降低血漿內(nèi)皮素、升高血清NO水平、降低血漿血栓素及升高前列環(huán)素水平，與對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)；通過測(cè)定以上血液中的各項(xiàng)指標(biāo)含量變化，及光鏡觀察到的骨小梁變細(xì)，萎縮，骨髓細(xì)胞減少被脂肪細(xì)胞填充，并且脂肪細(xì)胞肥大，骨小梁內(nèi)正常骨細(xì)胞數(shù)量減少。提示激素性股骨頭壞死的發(fā)生、發(fā)展與激素導(dǎo)致的上述變化有密切關(guān)系。

活血補(bǔ)髓湯是在中醫(yī)學(xué)的理論指導(dǎo)下，采用活血祛瘀、補(bǔ)腎健骨藥物而組方。標(biāo)本同治，活血化瘀、補(bǔ)肝益腎健壯筋骨治其本，柔肝緩急止痛治其標(biāo)。且方中活血化瘀兼補(bǔ)血養(yǎng)血、行氣而不傷正。正本清源，使筋骨得充，肝腎得養(yǎng)，血液周流順暢。根據(jù)現(xiàn)代藥理研究，丹參抑制血小板凝聚，促進(jìn)纖維蛋白原溶解，改善微循環(huán)，促進(jìn)側(cè)支循環(huán)的建立[3]，可促進(jìn)蛋白多糖合成促進(jìn)骨細(xì)胞分裂增殖，促進(jìn)骨的重建，實(shí)驗(yàn)證明丹參還具有抗損傷作用的鈣拮抗作用[4]；鹿茸具有促進(jìn)創(chuàng)傷愈合及抗炎作用；黃芪能促進(jìn)抗體形成,對(duì)抗強(qiáng)的松龍等免疫抑制劑的影響,對(duì)體液免疫有促進(jìn)作用；牛膝通過提高機(jī)體免疫機(jī)能、激活巨噬細(xì)胞系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞的吞噬作用，以及擴(kuò)張血管、改善循環(huán)促進(jìn)炎性病變吸收；骨碎補(bǔ)有部分抑制激素引起的骨丟失的作用，還能明顯促進(jìn)蛋白多糖的合成一蛋白多糖可以結(jié)合大量的鈣，即為鈣化儲(chǔ)存更多的鈣[5]。

本實(shí)驗(yàn)研究表明，活血補(bǔ)髓湯能夠提高成骨能力促進(jìn)骨修復(fù)和骨重建，提高骨質(zhì)量，阻斷激素性股骨頭壞死的病理改變。其作用機(jī)理可能是通過以下方面實(shí)現(xiàn)的:(1)調(diào)節(jié)骨細(xì)胞代謝，促進(jìn)血清BGP分泌，減少骨質(zhì)丟失，提高骨密度。(2)降低血清IL-6的分泌，抑制破骨細(xì)胞的功能，減少骨吸收。(3)降低血漿內(nèi)皮素、升高血清NO水平、降低血漿血栓素及升高前列環(huán)素水平，減少血管內(nèi)皮細(xì)胞損害，抑制血管痙攣及血小板聚集，減少微血栓形成及血管淤滯引起的缺血性骨壞死。

[1]李子榮，張念非，岳德波，等.激素性股骨頭壞死動(dòng)物模型誘導(dǎo)和觀察[J].中華外科雜志，1995,33(8):485.

[2]賀西京,毛履真,王坤正,等.腎上腺糖皮質(zhì)激素引起股骨頭缺血性壞死的機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究[J].中華骨科雜志,1992,12(6):440.

[3]劉青云．中藥藥理學(xué)[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997,12:165.

[4]袁慶之,盛茂鑫,熊吉信．鈣離子在肝缺血再灌注損傷中的作用及丹參的抗損傷作用[J].江西醫(yī)藥,1997,32(3):73.

[5]馬克昌,朱太詠,劉鮮茄，等．骨碎補(bǔ)注射液對(duì)培養(yǎng)基中雞胚骨原基鈣化的促進(jìn)作用[J].中國(guó)中藥雜志,1995,20(3):178-180.