聶廷芬
(天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院皮膚科 天津?qū)氎?301800)
淺部真菌感染是皮膚科的常見病和多發(fā)病,隨著抗生素和免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用,器官移植和導(dǎo)管技術(shù)的廣泛開展,真菌感染問題日益受到臨床和實驗室的關(guān)注和重視。為了了解本地區(qū)淺部致病真菌感染狀況,筆者對來我院皮膚科就診之321例真菌感染病例培養(yǎng)標本做了鑒定和分析,報告如下。
1.1 一般資料
1.1.1 標本來源。選取我院2008年9月~2011年12月皮膚科門診及住院患者患頭癬、手足癬、體癬、股癬等321例,其中男212例,女109例;年齡6~65歲,平均47歲;病史數(shù)月或數(shù)年不等。收集患者皮膚屑、毛發(fā),甲屑培養(yǎng)標本共計321份。
1.1.2 質(zhì)控菌株。ATCC90029念珠菌由衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供。
1.1.3 培養(yǎng)基。沙保弱培養(yǎng)基糖發(fā)酵管由杭州生物試劑有限公司提供,科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基由武漢合力醫(yī)療檢驗用品有限責任公司提供,均在有效期內(nèi)使用,10%及20%KOH由實驗室配制,小培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基由實驗室配制(KOH能溶解皮膚角蛋白,清除標本中的膿細胞及其他成分,而不破壞菌絲及孢子)[1]。
1.2 方法
1.2.1 培養(yǎng)基制作。嚴格按試劑盒操作說明書進行,并做無菌試驗及陰陽對照(沙保弱培養(yǎng)基加入200mg氯霉素,抑制雜菌生長)。
1.2.2 標本采集及涂片。采集患者皮膚刮屑、毛發(fā)、甲屑,并用10%或20%KOH溶液(甲屑不易溶解時可用20%KOH)加蓋玻片制成薄片,直接鏡檢,陽性者做真菌培養(yǎng)。
1.2.3 方法。取鏡檢陽性標本以無菌方法接種兩管沙保弱培養(yǎng)基內(nèi)同,28℃恒溫箱培養(yǎng)2~3周(1個月不長菌落者報告陰性)。
1.2.4 菌種鑒定。觀察培養(yǎng)基菌落生長形態(tài),對酵母樣菌落轉(zhuǎn)種科瑪嘉念珠菌顯示培養(yǎng)基,做小培養(yǎng)及糖發(fā)酵試驗同時以標準菌株對照陽性結(jié)果。毛癬菌依菌落生長形態(tài),色素的產(chǎn)生及顯微鏡特性觀察不同菌種的菌絲形態(tài) ,孢子的發(fā)生與形態(tài)鑒定菌種(用表型特征來進行分類鑒定是過去和現(xiàn)在都普遍應(yīng)用的方法)[1]。
培養(yǎng)結(jié)果顯示,淺部真菌感染以紅色毛癬菌占首位,是引起體癬、股癬等淺表皮膚真菌病的主要致病菌,菌種分布,見表1。
表1 321例真菌培養(yǎng)標本及菌種分布表(例)
近年來真菌,特別是白色念珠菌的增多及抗生素耐藥問題已引起全球關(guān)注,故真菌培養(yǎng)極為重要。直接鏡檢涂片雖快速及時,也可提供有價值的臨床信息[1],但不能確定致病菌種類及菌屬,培養(yǎng)的目的是為了進一步提高對病原體檢出的陽性率,同時確定致病菌的種類,為臨床用藥提供指導(dǎo)。
實驗結(jié)果表明,地區(qū)淺部致病真菌以紅色毛癬菌為主,占68%,是體癬、股癬、手足癬、甲癬的主要致病菌。該菌可累及全身,但更常發(fā)生在暴露部位[1],且易復(fù)發(fā),尤其是甲真菌感染患者,認為不危及生命的安全,僅僅影響美觀,加之甲癬的感染治療時間較長,口服藥物雖療效好,但對肝臟有一定損傷的副作用,患者往往對治療持有戒備的心理而放棄治療。念珠菌引起的淺部真菌感染占22%,仍是最常見的致病性真菌。由于它在機體免疫功能受損情況下感染,又歸為機會致病性真菌,引起致病的念珠菌一直以白色念珠菌居首位[2],還有一些其他念珠菌屬,也可引起淺部真菌感染,但致病力較低,糖尿病患者存在白細胞功能的多種缺陷,對念珠菌感染的防御功能下降[3],極易引起感染。頭癬近年來有增多趨勢,本地區(qū)以紫色毛癬占多數(shù),占7.2%,但在頭癬陽性標本中所占比例大,占84%;石膏樣癬菌占1.1%,占頭癬陽性標本13%;黃癬少見,僅1例。在頭癬患者中大部分是兒童,農(nóng)村與城市患兒無較大區(qū)別,20世紀50年代本地區(qū)以黃癬、白癬多見,且大部分以農(nóng)村患者居多,80年代本地區(qū)以膿癬、白癬多見,近年來黑點癬持續(xù)增多(黑點癬是由紫色毛癬菌引起),且極不典型,頭癬累及部位更為局限,有些雖皮損廣泛,但不典型,多外用過皮質(zhì)類固醇激素軟膏及治癬藥。
[1] 王瑞禮.醫(yī)學(xué)真菌學(xué)[J].實驗室檢驗指南,2005,24:113
[2] 康克非.免疫活性細胞對白色念珠菌的反應(yīng)[J].中華皮膚科雜志,2006,39:486
[3] 李春陽,李 穎.復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病的病因與控制對策[J].中華皮膚科雜志,2006,39:489