竹葉黃酮降血脂活性研究

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(浙江工業(yè)大學 藥學院，浙江 杭州 310014)

高脂血癥是一種常見而多發(fā)的代謝性疾病，是引起心腦血管疾病的重要危險因素，常見于中老年人，但隨著飲食結(jié)構(gòu)的改變及飲酒量的上升，其患病率在青年人中也逐年增高.因而，高脂血癥的治療已成為醫(yī)學界高度關(guān)注的問題.目前市場上的降脂產(chǎn)品主要以西藥為主，大多數(shù)具有副作用，且復發(fā)率相對較高，不能做到標本兼治.因此，研發(fā)具有安全高效的降血脂藥物具有十分重要的意義.現(xiàn)代研究表明，黃酮類化合物在調(diào)節(jié)血脂、防治心血管疾病方面有顯著療效[1-4].

黃酮類物質(zhì)是竹葉的主要活性物質(zhì)，具有抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗輻射、抑菌、抗菌防腐、降血脂及保護心腦血管等功效[5-12]，且無毒副作用[13].由于它具有豐富的資源、優(yōu)良的品質(zhì)、顯著的功效及良好的安全性等特點，引起研究人員的廣泛關(guān)注，是目前研究的熱點.而我國位于世界竹子分布的中心地區(qū)，素有“竹子王國”之稱，竹類資源相當豐富，因此充分開發(fā)利用竹葉中的黃酮類成分具有十分重要的現(xiàn)實經(jīng)濟意義.本研究利用動物實驗進行竹葉黃酮的輔助降血脂研究，為降脂產(chǎn)品的研發(fā)提供理論依據(jù).

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

竹葉黃酮：安吉圣氏生物有限公司，黃酮質(zhì)量分數(shù)43%和24%.豬油市售，膽固醇、膽酸鈉由安徽天啟化工科技有限公司生產(chǎn)，蔗糖、酪蛋白由河南明瑞食品添加劑有限公司生產(chǎn)，磷酸氫鈣、石粉由西隴化工生產(chǎn).TC試劑盒、TG試劑盒、HDL-C試劑盒、LDL-C試劑盒購自南京建成生物工程研究所，其他試劑為國產(chǎn)分析純.

1.2 試驗動物及飼料

健康的SD雄性大鼠(醫(yī)學實驗動物合格證號SCXK(浙)2008—0033，醫(yī)學實驗動物設施環(huán)境合格證號SYXK(浙)2005—0074)，體重160～190 g，購自浙江省實驗動物中心；基礎(chǔ)飼料由浙江省實驗動物中心提供；混合型高脂動物模型飼料：在基礎(chǔ)飼料中添加20.0%蔗糖、15%豬油、1.2%膽固醇、0.2%膽酸鈉，6.6%酪蛋白、0.5%磷酸氫鈣、0.3%石粉.

1.3 實驗分組及給藥方式

實驗設正常對照組、模型對照組、43%竹葉黃酮劑量組(每天800 mg/kg)和24%竹葉黃酮三個劑量組：每天200 mg/kg(低劑量)、400 mg/kg(中劑量)、800 mg/kg(高劑量).竹葉黃酮用1%羧甲基纖維素溶融制成相應劑量的懸浮液，每天經(jīng)口灌胃一次.

1.4 高脂模型的建立

大鼠于屏障系統(tǒng)下喂養(yǎng)基礎(chǔ)飼料觀察5 d.按體重隨機分成2組，10只大鼠給予基礎(chǔ)飼料為正常對照組，50只給予混合型高脂動物模型飼料造模.每周稱重1次.2周后，大鼠不禁食眼球采血，測定血清TC，TG，LDL-C，HDL-C和血糖水平.根據(jù)TC水平將造模大鼠隨機分成5組(模型對照組、43%竹葉黃酮劑量組和24%竹葉黃酮三個劑量組)，5組大鼠TC，TG，LDL-C，HDL-C和血糖水平差異均無顯著性.

1.5 干預治療

大鼠分組后，43%竹葉黃酮劑量組和24%竹葉黃酮三個劑量組每天經(jīng)口給予相應劑量藥物，正常對照組和模型對照組同時給予同體積的相應溶劑(1%羧甲基纖維素)，正常對照組繼續(xù)給予基礎(chǔ)飼料，模型對照組及四個劑量組繼續(xù)給予高脂飼料，自由進食、飲水.每周稱重1次、記錄進食量并計算食物利用率，試驗持續(xù)30 天.于實驗中期不禁食眼球采血，測定血清TC，TG，LDL-C，HDL-C.實驗末期，大鼠不禁食眼球采血，測定血清TC，TG，LDL-C，HDL-C.解剖觀察，留取肝臟、脾臟、腎臟、睪丸、腎周脂和睪周脂稱重，計算相應指數(shù).

1.6 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 竹葉黃酮對大鼠一般指標的影響

實驗期間正常大鼠生長狀況良好，攝食、飲水正常.其他各組大鼠隨時間延長，進食量減少，其中模型對照組進食量減少最明顯，而食物總利用率都有所增加.解剖稱重，各組的體重無明顯差異.肝臟、腎、脾、睪丸等臟器指數(shù)各試驗組大鼠與模型對照組比較無統(tǒng)計學差異，但各試驗組大鼠肝臟和睪丸的臟器指數(shù)與正常對照組相比有顯著差異.各試驗組的腎周脂、睪周脂、體周脂重量與正常對照組相比都有所增加，沒有模型對照組明顯.正常大鼠的肝臟顏色呈暗紅色，高脂大鼠的肝臟呈灰白色，各試驗組接近于正常對照組.

2.2 竹葉黃酮對大鼠血清低密度脂蛋白膽固醇濃度的影響

除正常對照組之外，其他各組的血清LDL-C濃度都有增高，其中以模型對照組最明顯.給藥前，三個劑量組和模型對照組比較血清LDL-C濃度無明顯變化，而與正常對照組相比有顯著性差異(P<0.01).實驗中期，三個劑量組和模型對照組比較血清LDL-C濃度變化不明顯.實驗末期，低劑量組和中劑量組與模型對照組比較有顯著性差異(P<0.01和P<0.05)，但高劑量組、43%竹葉黃酮劑量組與模型對照組比較變化不顯著(表1),說明低濃度的竹葉黃酮更有利于降低血清LDL-C的濃度.

表1 竹葉黃酮對大鼠血清LDL-C濃度的影響1)

2.3 竹葉黃酮對大鼠血清高密度脂蛋白膽固醇濃度的影響

模型對照組血清中HDL-C濃度與給藥前相比明顯下降，其他各組變化不明顯.實驗開始時,各組血清中HDL-C濃度無明顯差異.在給藥2周后中、高劑量和43%竹葉黃酮都能明顯提高血清HDL-C濃度,與模型對照組比較有顯著性差異(P<0.05和P<0.01).低劑量的竹葉黃酮提高血清HDL-C濃度不明顯(表2),研究表明竹葉黃酮具有升高血清HDL-C濃度的作用.

表2 竹葉黃酮對大鼠血清HDL-C濃度的影響1)

2.4 竹葉黃酮對大鼠血清總膽固醇濃度的影響

在實驗末期，模型對照組血清中TC濃度與給藥前相比明顯增加，43%竹葉黃酮劑量組也有所增加，24%竹葉黃酮三個劑量組變化不明顯.給藥前,三個劑量組和模型對照組比較血清TC濃度無明顯變化，而與正常對照組相比有顯著性差異(P<0.01).給藥后2周，中劑量的竹葉黃酮能明顯降低血清TC濃度,與模型對照組有顯著性差異(P<0.05).給藥后4周，24%竹葉黃酮三個試驗組血清TC濃度均明顯低于模型對照組，顯著性差異明顯(P<0.05)，43%竹葉黃酮劑量組降低血清TC濃度不顯著(表3).說明竹葉黃酮具有降低血清中TC濃度的作用，且與竹葉黃酮的濃度有關(guān)系，低濃度的竹葉黃酮對TC濃度影響更大.

表3 竹葉黃酮對大鼠血清TC濃度的影響1)

2.5 竹葉黃酮對大鼠血清甘油三酯濃度的影響

實驗開始時,三個劑量組和模型對照組比較血清TG濃度無明顯差異，而與正常對照組相比有顯著性差異(P<0.01)；在實驗中期和實驗結(jié)束時,中、高劑量的24%竹葉黃酮和43%竹葉黃酮劑量組都能明顯降低血清TG濃度,與模型對照組比較有顯著性差異(P<0.05和P<0.01),低劑量的竹葉黃酮也能降低血清TG濃度，但與模型對照組比較顯著性差異不明顯(表4),研究表明竹葉黃酮具有降低血清中TG濃度的作用.

表4 竹葉黃酮對大鼠血清TG濃度的影響1)

3 結(jié) 論

總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇水平、低密度脂蛋白膽固醇水平都是血脂的主要指標.研究表明：藥物干預后4 周，與高脂模型組比，低劑量的24%竹葉黃酮可明顯降低高脂血癥大鼠血清的LDL-C和TC濃度，中劑量的24%竹葉黃酮可明顯降低大鼠血清的TC，TG，LDL-C濃度和提高血清的HDL-C濃度，高劑量的24%竹葉黃酮可明顯降低大鼠血清的TC，TG濃度和提高血清的HDL-C濃度，43%竹葉黃酮可明顯提高試驗大鼠血清HDL-C濃度和降低血清的TC濃度，表明竹葉黃酮具有輔助降血脂的功能.研究中還首次發(fā)現(xiàn)竹葉黃酮的濃度并不與降血脂的活性呈正相關(guān)，低濃度的竹葉黃酮有利于降低高脂大鼠血清的TC和LDL-C水平，而高濃度的竹葉黃酮對高脂大鼠血清的HDL-C和TG水平影響更大，具體原因有待于進一步研究，實驗結(jié)果對竹葉降脂產(chǎn)品研發(fā)具有一定的指導意義.

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