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    電針五臟俞配合益髓通經(jīng)方對EAN家兔神經(jīng)電生理功能的影響

    2014-08-25 02:39:00李樂文王洪峰陳新華
    關(guān)鍵詞:針?biāo)?/a>家兔五臟

    李樂文,王洪峰,于 磊,陳新華

    (1.雙遼市中醫(yī)院,吉林 雙遼136400;2.長春中醫(yī)藥大學(xué),吉林 長春130117)

    實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎(EAN)是急性格林-巴利綜合征(GBS)的經(jīng)典動(dòng)物模型,兩者在發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)、神經(jīng)電生理等方面極為相似。GBS屬于中醫(yī)學(xué)“痿證”范疇,中藥和針灸療法對GBS的具有良好的臨床療效[1-3]。本實(shí)驗(yàn)通過觀察電針五臟俞配合益髓通經(jīng)方對EAN家兔神經(jīng)電生理功能的影響。

    1 材料和方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    健康大耳白兔64只,雌雄不限,體重在2.0-2.5 kg之間,皮毛光滑潤澤,呼吸道通暢,足部皮膚紅潤,由長春生物制品研究所提供[許可證號SCXK-(吉)2003-0002]。自由給水和家兔飼料,實(shí)驗(yàn)室溫度保持在17-24℃之間。

    1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑和儀器

    益髓通經(jīng)方(主要藥物為馬錢子和龜板膠,由長春中醫(yī)藥大學(xué)制劑實(shí)驗(yàn)室提供);完全弗氏佐劑(北京鼎國生物技術(shù)有限責(zé)任公司);兔免疫球蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(北京鼎國生物技術(shù)有限責(zé)任公司);牛坐骨神經(jīng)髓鞘堿性蛋白(MBP,由吉林大學(xué)酶工程實(shí)驗(yàn)室提取);五通道肌電圖誘發(fā)電位儀(英國Medelec Synergy)。

    1.3 EAN動(dòng)物模型建立方法

    參照郭向東[4]方法建立國際公認(rèn)的髓鞘堿性蛋白II(P2)免疫動(dòng)物模型。取3 ml提取的牛坐骨神經(jīng)髓鞘堿性蛋白(MBP)加上3 ml完全弗氏佐劑,經(jīng)試管振蕩器搖勻,將兩者充分混合后多點(diǎn)注入兔背部皮下。第21 d加強(qiáng)免疫,以出現(xiàn)下述癥狀表現(xiàn)為造模成功:精神萎靡,活動(dòng)減少,食欲減退,體重下降,尾部及足爪皮毛不潔,四肢無力,軟癱,以后肢為重,反射和應(yīng)激機(jī)能減低。加強(qiáng)免疫后第2天開始實(shí)驗(yàn)治療。

    1.4 動(dòng)物分組與給藥

    64只家兔隨機(jī)分為空白組、模型組、免疫球蛋白組和針?biāo)幗Y(jié)合組,每組16只。除空白組外,其余三組均按造模方法制備EAN動(dòng)物模型??瞻捉M和模型組,不予任何治療,僅作同期對照觀察。免疫球蛋白組予以腹腔注射丙種球蛋白(IVIG)治療,每只家兔治療劑量為400 mg/kg/d,連續(xù)治療5 d。針?biāo)幗Y(jié)合組采用電針膀胱經(jīng)五臟俞治療,其中心俞、肝俞、脾俞、肺俞四穴向內(nèi)下方斜刺0.5-1 cm,腎俞向下斜刺0.5-1 cm,然后接電針疏密波,電壓2v,頻率2-30 Hz,15 min/次,1次/d,連續(xù)治療14 d;同時(shí)配合益髓通經(jīng)方灌胃治療,10 ml/次,2次/d。各組分別于第7 d、14 d各半數(shù)動(dòng)物評價(jià)1次。

    1.5 評價(jià)指標(biāo)及檢測方法

    1.5.1 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度測定 每只家兔取雙側(cè)坐骨神經(jīng)進(jìn)行測定,沿家兔坐骨神經(jīng)走行路線備皮,在其臀橫紋處放置刺激電極,遠(yuǎn)端肌腹與肌腱處放置記錄電極,給予電刺激,記錄時(shí)間。再向下移動(dòng)刺激電極的位置,給予電刺激,記錄時(shí)間。用皮軟尺測量出兩次刺激電極的距離及潛伏期時(shí)間差,計(jì)算出家兔坐骨神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度。刺激電脈沖頻率為20 Hz,強(qiáng)度為10-20 V,波寬0.2 ms,掃描速度定為2 ms/cm。

    1.5.2 坐骨神經(jīng)F波檢測 將刺激電極置于坐骨神經(jīng)近端某一端點(diǎn),陰極置于遠(yuǎn)端,以表面電極在相應(yīng)支配肌肉處記錄。用刺激電極對坐骨神經(jīng)施以超強(qiáng)刺激,引起一個(gè)大的順行傳導(dǎo)的復(fù)合肌肉動(dòng)作電位為M波,在肌肉動(dòng)作電位(M波)后又出現(xiàn)一個(gè)小的肌肉反應(yīng)電位稱為F波,不隨刺激強(qiáng)度的增加而減小。本實(shí)驗(yàn)通過檢測F波的出現(xiàn)頻率作為確認(rèn)F波異常的指標(biāo),實(shí)驗(yàn)中對各組家兔雙側(cè)坐骨神經(jīng)分別施以20次超強(qiáng)刺激,檢測其F波出現(xiàn)頻率,以F波出現(xiàn)頻率低于刺激數(shù)的80%作為F波異常的判定標(biāo)準(zhǔn)[5]。

    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度及F波異常率檢測數(shù)據(jù)采用雙樣本t檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

    2 結(jié)果

    2.1 一般情況

    實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在免疫后第14天左右開始出現(xiàn)不同程度的EAN臨床癥狀,發(fā)病率達(dá)78%。其表現(xiàn)為精神萎靡,活動(dòng)減少,食欲減退,體重下降,尾部及足爪部皮毛不潔,四肢無力,反射和應(yīng)激機(jī)能減低,先出現(xiàn)雙后肢癱,繼而發(fā)展到四肢癱,約在免疫后第21天達(dá)到高峰。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)治療后,至第1次評價(jià)(第7天)時(shí),模型組死亡2只;至第2次評價(jià)(第14天)時(shí)模型組死亡4只。

    2.2 坐骨神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度的測定結(jié)果

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在第7天時(shí),模型組、免疫球蛋白組、針?biāo)幗Y(jié)合組與空白組比較,坐骨神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度明顯降低,具有極顯著性差異(P<0.01);但免疫球蛋白組、針?biāo)幗Y(jié)合組與模型組比較,坐骨神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度顯著加快,具有極顯著性差異(P<0.01)。在第14天時(shí),免疫球蛋白組、針?biāo)幗Y(jié)合組與模型組比較,具有極顯著性差異(P<0.01);與第7天時(shí)比較,兩組家兔坐骨神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度均明顯加快,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但兩組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),詳見表1。

    表1 各組家兔坐骨神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度測定結(jié)果(m/s)

    注:◇表示與空白組比較P<0.01;△表示與模型組比較P<0.01;□表示與第7 d比較P<0.05;▽表示與免疫球蛋白組比較P>0.05。

    2.3 坐骨神經(jīng)F波異常出現(xiàn)率的測定結(jié)果

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在第7天時(shí),免疫球蛋白組、針?biāo)幗Y(jié)合組與模型組比較,坐骨神經(jīng)F波異常出現(xiàn)率明顯降低,具有極顯著性差異(P<0.01)。在第14天時(shí),免疫球蛋白組、針?biāo)幗Y(jié)合組與模型組比較,同樣具有極顯著性差異(P<0.01);與第7天時(shí)比較,兩組家兔坐骨神經(jīng)F波異常出現(xiàn)率明顯改善,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但兩組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見表2。

    表2 各組家兔坐骨神經(jīng)F波異常出現(xiàn)率測定結(jié)果(m/s)

    注:△表示與模型組比較P<0.01;□表示與第7 d比較P<0.05;▽表示與免疫球蛋白組比較P>0.05

    3 討論

    GBS作為一種免疫介導(dǎo)的炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)根疾病,神經(jīng)電生理檢查在GBS診斷中有重要價(jià)值,GBS的神經(jīng)肌電圖主要表現(xiàn)為神經(jīng)傳導(dǎo)阻滯,神經(jīng)傳導(dǎo)速度明顯減慢,不同程度的失神經(jīng)改變等異常。江文等[6]對100例GBS病人神經(jīng)電生理資料進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)原發(fā)性脫髓鞘型51例,原發(fā)性軸索型25例,神經(jīng)失電位型8例,不明確型12例,正常型4例,表明GBS主要發(fā)病形式是原發(fā)性脫髓鞘型。李淮玉等[7]對GBS神經(jīng)電生理改變特點(diǎn)進(jìn)行了分析,約96%患者的神經(jīng)電生理改變符合脫髓鞘損害,4%患者神經(jīng)電生理改變?yōu)檩S索損害型。

    中醫(yī)學(xué)認(rèn)為GBS的發(fā)病,因髓虛導(dǎo)致邪毒易襲,邪毒侵襲后又能導(dǎo)致氣滯血瘀,致使五臟陰陽失衡、腎精虧虛,加重髓虛,成為一個(gè)惡性循環(huán)。因此,五臟失衡、髓虛不足的表現(xiàn)存在于該病的全過程。在治療上,不僅要注意疏通經(jīng)絡(luò)、導(dǎo)邪外出,更要注意調(diào)和五臟,益髓養(yǎng)精。五臟俞是五臟之氣輸注于背部的腧穴,具有反應(yīng)五臟功能狀態(tài)、調(diào)節(jié)五臟氣血精微、治療五臟相關(guān)疾病的作用,電針膀胱經(jīng)五臟俞可通調(diào)五臟氣機(jī),恢復(fù)五臟正常功能。益髓通經(jīng)方由龜板和馬錢子組成,兩者配伍,補(bǔ)中有通,相得益彰。其中,龜板為血肉有情之品,善滋腎損,腎為先天之本,腎中精氣是機(jī)體生命活動(dòng)的根本,對機(jī)體各方面的生理活動(dòng)起著重要的作用,既能發(fā)揮對臟腑組織的滋養(yǎng)、濡潤作用,又能對組織器官起到推動(dòng)、溫煦作用,腎精得以充養(yǎng),則氣血流暢,經(jīng)絡(luò)暢通;馬錢子疏通經(jīng)絡(luò),促進(jìn)氣血運(yùn)行,既可促進(jìn)毒邪的排出,又可使五臟功能和調(diào),則腎精充盈,脊髓得養(yǎng),兩藥共同針對痿病的發(fā)病機(jī)制而發(fā)揮治療作用。本研究表明,電針膀胱經(jīng)五臟俞配合益髓通經(jīng)方可以明顯提高EAN家兔坐骨神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度,降低F波異常出現(xiàn)率,充分證明該治療方法能有效恢復(fù)EAN家兔的神經(jīng)傳導(dǎo)功能,對GBS等痿證具有良好的治療作用,在臨床中可采用該療法以提高GBS等痿證的治療水平。

    參考文獻(xiàn):

    [1]劉寶芳.針刺為主治療格林-巴利綜合征20例[J].上海針灸雜志,2007,26(1):30.

    [2]陳學(xué)農(nóng),周清毅,趙開祝,等.電針治療格林-巴利綜合征88例[J].上海針灸雜志,2003,22(6):30.

    [3]劉世瓊,駱文郁.針灸治療格林-巴利綜合征恢復(fù)期4例觀察[J].中醫(yī)函授通訊,1993,3:22.

    [4]郭向東,許賢豪,林嘉友,等.P2蛋白及其合成肽與實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性神經(jīng)炎的研究[J].中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志,2003,10(1):25.

    [5]湯曉芙.神經(jīng)系統(tǒng)臨床電生理學(xué)(下)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2002.

    [6]江 文,徐 燕,吳保仁,等.吉蘭-巴雷綜合征病人100例電生理學(xué)分型分析[J].中華神經(jīng)科雜志.2000,33(4):234.

    [7]李淮玉.格林-巴利綜合征的臨床、電生理、病理對照研究[J].中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志,2002,19(4):230.

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