枯草芽孢桿菌對(duì)花生鎘積累及生理性狀的影響

孟靜靜等

摘要：盆栽條件下，研究了輕度鎘脅迫下施用不同濃度枯草芽孢桿菌對(duì)花育31號(hào)花生生理性狀、植株性狀和籽粒鎘積累量的影響。結(jié)果表明，施用枯草芽孢桿菌能提高花生苗期、花針期和成熟期的葉片葉綠素含量和根系活力，降低葉片相對(duì)電導(dǎo)率；施用量為2 g/kg和4 g/kg時(shí)均能顯著提高不同生育期葉片的SOD活性和POD活性，顯著降低葉片MDA含量；1 g/kg和2 g/kg枯草芽孢桿菌均能較大幅度提高花生主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)、植株鮮重、單株果重和飽果率，均能顯著減少籽粒鎘的積累量。綜上，施用2 g/kg枯草芽孢桿菌對(duì)緩解花生輕度鎘脅迫的效果最好，能顯著提高葉綠素含量和根系活力，降低鎘脅迫對(duì)細(xì)胞膜的損壞程度，顯著增加單株果重和飽果率，籽粒鎘積累量降低25.37%。

關(guān)鍵詞：花生；枯草芽孢桿菌；鎘脅迫；生理特性；產(chǎn)量

中圖分類(lèi)號(hào)：S565.201 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2014）03-0017-05

AbstractThe pot experiment was carried out to study the effects of applying different concentrations of Bacillus subtilis on the physiological and plant characters， and cadmium content in seeds under mild cadmium stress. The results showed that applying Bacillus subtilis could improve the leaf chlorophyll content and root activity， reduce relative conductivity in leaves of peanut at seedling stage， flowering stage and mature stage.Applying 2 g/kg and 4 g/kg Bacillus subtilis could both significantly increase the SOD and POD activities，significantly reduce the MDA content in leaves at different growth periods. Applying 1 g/kg and 2 g/kg Bacillus subtilis could obviously improve stem height， lateral branch length， plant fresh weight， fruit weight per plant and plump rate， significantly reduce the cadmium accumulation in seeds. This study showed that applying 2 g/kg Bacillus subtilis had the best effects of relieving mild cadmium stress on peanut. The chlorophyll content and root activity were significantly increased， the damage of cadmium stress on cytomembrane was decreased， the fruit weight per plant and plump rate were significantly increased， and the cadmium accumulation in seeds was decreased by 25.37%.

Key wordsPeanut； Bacillus subtilis； Cd stress； Physiological characters； Yield

花生是一種對(duì)重金屬鎘吸收能力較強(qiáng)的食油兼用作物，我國(guó)是世界上重要的花生生產(chǎn)和出口國(guó)。近年來(lái)，籽粒鎘含量偏高已成為制約我國(guó)花生出口的重要因素[1]。鎘被作物大量吸收后會(huì)出現(xiàn)重金屬毒害癥狀，不同作物對(duì)Cd的反應(yīng)不一致，一般會(huì)導(dǎo)致葉片失綠、生長(zhǎng)遲緩、植株矮化、生物量降低等[2]?；ㄉ_(kāi)花期根和葉的細(xì)胞膜透性是對(duì)Cd脅迫響應(yīng)最敏感的生理參數(shù)[3]。另外，Cd脅迫還會(huì)導(dǎo)致花生株高降低，根長(zhǎng)和側(cè)根數(shù)減少，超氧化物歧化酶（SOD）和過(guò)氧化物酶（POD）活性降低等[4]。

枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）是土壤和植物微生態(tài)的優(yōu)勢(shì)種群，因其能忍受極端環(huán)境，并通過(guò)分泌抗生物質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)生長(zhǎng)，在防治作物病蟲(chóng)害方面發(fā)揮了重要作用，已作為生防微生物在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中進(jìn)行推廣應(yīng)用，但其對(duì)花生籽粒鎘積累和生理性狀的影響鮮有報(bào)道。本研究選擇花育31號(hào)為供試材料，研究了輕度鎘脅迫下枯草芽孢桿菌對(duì)花生生長(zhǎng)、籽粒鎘積累、葉綠素含量、根系活力、葉片相對(duì)電導(dǎo)率等的影響，探究利用枯草芽孢桿菌降低花生鎘積累、增強(qiáng)花生抗鎘脅迫的能力，為花生安全生產(chǎn)提供指導(dǎo)。

1材料與方法

1.1供試材料

供試花生品種為花育31號(hào)，由山東省花生研究所提供。枯草芽孢桿菌孢子干粉由山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究中心提供。試驗(yàn)采用泥陶盆（內(nèi)徑38 cm×高28 cm）。盆栽所用復(fù)合肥：N+P2O5+K2O≥42%，未檢測(cè)出鎘。盆栽土壤選用山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)地耕層土壤（0～20 cm），土壤有機(jī)質(zhì)17.8 g/kg，堿解氮75.8 mg/kg，有效磷10.2 mg/kg，有效鉀98.2 mg/kg，pH 7.10，陽(yáng)離子交換量16.54 cmol/kg，總Cd濃度 0.048 mg/kg。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

盆栽試驗(yàn)在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)場(chǎng)防雨棚進(jìn)行。先將土壤過(guò)1 cm孔篩，每盆裝土15 kg。氯化鎘溶解后，加入土壤并拌勻，土壤Cd濃度為1.0 mg/kg，平衡30 d。每盆施入復(fù)合肥30 g，充分混勻。將枯草芽孢桿菌粉末以0、1、2和4 g/kg的施入量摻入到土壤中，每處理20盆。精選大小一致的花生種子種植盆中，每盆3粒。

于苗期、花針期、成熟期，選擇受光方向一致的主莖倒3葉取樣，一部分樣品放入冰盒中用于葉綠素含量和細(xì)胞膜透性測(cè)定，另一部分迅速放入液氮罐中帶回室內(nèi)，于-40℃低溫冰箱中保存，用于保護(hù)酶活性測(cè)定。同時(shí)取根，放入冰盒中用于根系活力測(cè)定。于收獲期取植株和莢果。

1.3測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1葉綠素含量測(cè)定采用Arnon法[5]，紫外分光光度計(jì)測(cè)吸光度。

1.3.2葉片細(xì)胞膜透性測(cè)定取花生葉片0.1 g置于具塞試管中，加入15 ml 1%吐溫80，真空泵抽氣10 min，緩慢放氣。室溫振蕩60 min，用電導(dǎo)率儀測(cè)定其初電導(dǎo)率。再放入沸水浴20 min，冷卻后再次測(cè)定其終電導(dǎo)率。以相對(duì)電導(dǎo)率表示電解質(zhì)滲出率。

1.3.3根系活力測(cè)定TTC還原法[6]測(cè)定根系活力。

1.3.4SOD、POD活性和MDA含量測(cè)定參照王愛(ài)國(guó)[7]的方法測(cè)定SOD活性；參照愈創(chuàng)木酚法[8]測(cè)定POD活性；參照林植芳[9]的方法測(cè)定MDA。

1.3.5Cd含量測(cè)定采用原子吸收分光光度計(jì)法。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

用DPS7.05統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析、顯著性檢驗(yàn)，用Microsoft Excel軟件進(jìn)行圖表制作。

2結(jié)果與分析

2.1枯草芽孢桿菌對(duì)花生生長(zhǎng)、產(chǎn)量及Cd積累的影響

2.1.1對(duì)花生生長(zhǎng)的影響表1表明，適當(dāng)施用枯草芽孢桿菌可提高花生主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)和生物量。其中2 g/kg處理效果最顯著，其主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)、植株鮮重和植株干重分別比對(duì)照增加了13.54%、18.10%、10.80%和19.35%。

3討論與結(jié)論

Cd污染土壤對(duì)植物的影響是多方面的，通過(guò)根系的吸收，Cd能改變?nèi)~綠體、線(xiàn)粒體等細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)與功能，從而影響植物的生理代謝活動(dòng)，給生長(zhǎng)發(fā)育帶來(lái)不利影響[11]。此外，Cd可通過(guò)食物鏈等途徑直接或間接危害動(dòng)物和人類(lèi)的健康[12]。植物葉綠體是較易積累鎘的細(xì)胞器之一，鎘能抑制葉綠素的生物合成[13]。劉文龍等[3]認(rèn)為不同品種花生葉綠素含量隨鎘濃度增加而降低的幅度和速度存在明顯的差異。高芳等[14]研究顯示豫花15葉綠素含量對(duì)鎘敏感，輕度鎘脅迫即可降低其含量。本研究結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌可以明顯緩解輕度Cd脅迫對(duì)花生葉綠素含量的影響，施用量越大效果越明顯。

Cd濃度在不高于60 mg/L范圍內(nèi)，隨著營(yíng)養(yǎng)液Cd濃度的增大，花生葉綠素含量和根氧化活力極顯著降低，根、葉細(xì)胞膜透性和丙二醛含量極顯著增加[3]。本研究結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌能明顯緩解Cd脅迫對(duì)花生葉片相對(duì)電導(dǎo)率和根系活力的影響，在花針期效果較明顯?；ㄉ~片SOD活性隨枯草芽孢桿菌用量增加呈先升高后降低趨勢(shì)，POD活性呈先降低再升高趨勢(shì)，MDA含量隨枯草芽孢桿菌用量增加而降低。說(shuō)明適量的枯草芽孢桿菌不僅可以增強(qiáng)抗氧化酶的活性，而且還能減輕膜脂過(guò)氧化作用，緩解了Cd對(duì)花生的脅迫作用。

鎘脅迫降低花生的產(chǎn)量，主要是降低了出仁率和單株莢果數(shù)[14]。施用枯草芽孢桿菌可促進(jìn)花生生長(zhǎng)，有效增加花生的主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)、植株生物量，提高花生產(chǎn)量，2 g/kg處理明顯增加了花生的單株果重和飽果率?？莶菅挎邨U菌抑制花生籽粒中的Cd積累，其中2 g/kg處理效果最好。我國(guó)土壤中鎘的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)為1.0 mg/kg（也是本研究設(shè)定的依據(jù)），即使未達(dá)到污染水平，但是生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)依然存在，在此含量水平下，花生籽粒鎘含量為2.0 mg/kg，盡管施用枯草芽孢桿菌使花生籽粒鎘積累量降低約25%，但仍超過(guò)0.5 mg/kg國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB15201-1994）的2倍還多，可見(jiàn)鎘污染極具隱蔽性，由此帶來(lái)的花生食品安全風(fēng)險(xiǎn)不容忽視，未來(lái)應(yīng)加強(qiáng)花生鎘污染控制技術(shù)研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]萬(wàn)書(shū)波， 單世華，李春娟，等. 我國(guó)花生安全生產(chǎn)現(xiàn)狀與策略[J]. 花生學(xué)報(bào)， 2005， 34（1）：1-4.

[2]張欣， 范仲學(xué)， 郭篤發(fā)， 等. 外源物質(zhì)對(duì)農(nóng)作物鎘毒害的緩解效應(yīng)[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011（1）：68-72.

[3]劉文龍， 王凱榮， 王銘倫. 花生對(duì)鎘脅迫的生理響應(yīng)及品種間差異 [J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)， 2009， 20（2）： 451-459.

[4]高芳. 鎘對(duì)花生生理特性、產(chǎn)量品質(zhì)的影響及其鈣素調(diào)控 [D]. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2011.

[5]Arnon D I. Copper enzymes in isolated chloroplast， polyphenoloxidase in Beta vulgari [J]. Plant Physiol.， 1949（24）：1-5.

[6]李合生. 植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù) [M]. 北京： 高等教育出版社， 2000：119-120.

[7]王愛(ài)國(guó)， 羅廣華， 邵從本， 等. 大豆種子超氧化物歧化酶的研究 [J]. 植物生理學(xué)， 1983， 9（1）： 77-83.

[8]華東師范大學(xué). 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) [M]. 北京：人民教育出版社， 1980.

[9]林植芳， 李雙順， 林桂珠， 等. 水稻葉片的衰老與超氧化物歧化酶活性及脂質(zhì)過(guò)氧化作用的關(guān)系 [J]. 植物學(xué)報(bào)， 1984， 26（6）： 605-615.

[10]王凱榮， 張磊. 花生鎘污染研究進(jìn)展[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)， 2008， 19（12）： 2757-2762.

[11]Clemens S. Toxic metal accumulation， responses to exposure and mechanisms of tolerance in plants [J]. Biochimie， 2006， 88（11）： 1707-1719.

[12]Deckert J. Cadmium toxicity in plants：Is there any analogy to its carcinogenic effect in mammalian cells？ [J]. Biometals， 2005， 18（5）： 475-481.

[13]Lagriffoul A， Mocquot B， Mench M， et al. Cadmium toxicity effects on growth， mineral and activities of stress related enzymes in young maize plants [J]. Plant Soil， 1998，200（2）：241-250.

[14]高芳， 林英杰， 張佳蕾， 等. 鎘脅迫對(duì)花生生理特性、產(chǎn)量和品質(zhì)的影響 [J]. 作物學(xué)報(bào)， 2011， 37（12）： 1-8.

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

盆栽試驗(yàn)在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)場(chǎng)防雨棚進(jìn)行。先將土壤過(guò)1 cm孔篩，每盆裝土15 kg。氯化鎘溶解后，加入土壤并拌勻，土壤Cd濃度為1.0 mg/kg，平衡30 d。每盆施入復(fù)合肥30 g，充分混勻。將枯草芽孢桿菌粉末以0、1、2和4 g/kg的施入量摻入到土壤中，每處理20盆。精選大小一致的花生種子種植盆中，每盆3粒。

于苗期、花針期、成熟期，選擇受光方向一致的主莖倒3葉取樣，一部分樣品放入冰盒中用于葉綠素含量和細(xì)胞膜透性測(cè)定，另一部分迅速放入液氮罐中帶回室內(nèi)，于-40℃低溫冰箱中保存，用于保護(hù)酶活性測(cè)定。同時(shí)取根，放入冰盒中用于根系活力測(cè)定。于收獲期取植株和莢果。

1.3測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1葉綠素含量測(cè)定采用Arnon法[5]，紫外分光光度計(jì)測(cè)吸光度。

1.3.2葉片細(xì)胞膜透性測(cè)定取花生葉片0.1 g置于具塞試管中，加入15 ml 1%吐溫80，真空泵抽氣10 min，緩慢放氣。室溫振蕩60 min，用電導(dǎo)率儀測(cè)定其初電導(dǎo)率。再放入沸水浴20 min，冷卻后再次測(cè)定其終電導(dǎo)率。以相對(duì)電導(dǎo)率表示電解質(zhì)滲出率。

1.3.3根系活力測(cè)定TTC還原法[6]測(cè)定根系活力。

1.3.4SOD、POD活性和MDA含量測(cè)定參照王愛(ài)國(guó)[7]的方法測(cè)定SOD活性；參照愈創(chuàng)木酚法[8]測(cè)定POD活性；參照林植芳[9]的方法測(cè)定MDA。

1.3.5Cd含量測(cè)定采用原子吸收分光光度計(jì)法。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

用DPS7.05統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析、顯著性檢驗(yàn)，用Microsoft Excel軟件進(jìn)行圖表制作。

2結(jié)果與分析

2.1枯草芽孢桿菌對(duì)花生生長(zhǎng)、產(chǎn)量及Cd積累的影響

2.1.1對(duì)花生生長(zhǎng)的影響表1表明，適當(dāng)施用枯草芽孢桿菌可提高花生主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)和生物量。其中2 g/kg處理效果最顯著，其主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)、植株鮮重和植株干重分別比對(duì)照增加了13.54%、18.10%、10.80%和19.35%。

3討論與結(jié)論

Cd污染土壤對(duì)植物的影響是多方面的，通過(guò)根系的吸收，Cd能改變?nèi)~綠體、線(xiàn)粒體等細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)與功能，從而影響植物的生理代謝活動(dòng)，給生長(zhǎng)發(fā)育帶來(lái)不利影響[11]。此外，Cd可通過(guò)食物鏈等途徑直接或間接危害動(dòng)物和人類(lèi)的健康[12]。植物葉綠體是較易積累鎘的細(xì)胞器之一，鎘能抑制葉綠素的生物合成[13]。劉文龍等[3]認(rèn)為不同品種花生葉綠素含量隨鎘濃度增加而降低的幅度和速度存在明顯的差異。高芳等[14]研究顯示豫花15葉綠素含量對(duì)鎘敏感，輕度鎘脅迫即可降低其含量。本研究結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌可以明顯緩解輕度Cd脅迫對(duì)花生葉綠素含量的影響，施用量越大效果越明顯。

Cd濃度在不高于60 mg/L范圍內(nèi)，隨著營(yíng)養(yǎng)液Cd濃度的增大，花生葉綠素含量和根氧化活力極顯著降低，根、葉細(xì)胞膜透性和丙二醛含量極顯著增加[3]。本研究結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌能明顯緩解Cd脅迫對(duì)花生葉片相對(duì)電導(dǎo)率和根系活力的影響，在花針期效果較明顯?；ㄉ~片SOD活性隨枯草芽孢桿菌用量增加呈先升高后降低趨勢(shì)，POD活性呈先降低再升高趨勢(shì)，MDA含量隨枯草芽孢桿菌用量增加而降低。說(shuō)明適量的枯草芽孢桿菌不僅可以增強(qiáng)抗氧化酶的活性，而且還能減輕膜脂過(guò)氧化作用，緩解了Cd對(duì)花生的脅迫作用。

鎘脅迫降低花生的產(chǎn)量，主要是降低了出仁率和單株莢果數(shù)[14]。施用枯草芽孢桿菌可促進(jìn)花生生長(zhǎng)，有效增加花生的主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)、植株生物量，提高花生產(chǎn)量，2 g/kg處理明顯增加了花生的單株果重和飽果率。枯草芽孢桿菌抑制花生籽粒中的Cd積累，其中2 g/kg處理效果最好。我國(guó)土壤中鎘的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)為1.0 mg/kg（也是本研究設(shè)定的依據(jù)），即使未達(dá)到污染水平，但是生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)依然存在，在此含量水平下，花生籽粒鎘含量為2.0 mg/kg，盡管施用枯草芽孢桿菌使花生籽粒鎘積累量降低約25%，但仍超過(guò)0.5 mg/kg國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB15201-1994）的2倍還多，可見(jiàn)鎘污染極具隱蔽性，由此帶來(lái)的花生食品安全風(fēng)險(xiǎn)不容忽視，未來(lái)應(yīng)加強(qiáng)花生鎘污染控制技術(shù)研究。

參考文獻(xiàn)：

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[2]張欣， 范仲學(xué)， 郭篤發(fā)， 等. 外源物質(zhì)對(duì)農(nóng)作物鎘毒害的緩解效應(yīng)[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011（1）：68-72.

[3]劉文龍， 王凱榮， 王銘倫. 花生對(duì)鎘脅迫的生理響應(yīng)及品種間差異 [J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)， 2009， 20（2）： 451-459.

[4]高芳. 鎘對(duì)花生生理特性、產(chǎn)量品質(zhì)的影響及其鈣素調(diào)控 [D]. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2011.

[5]Arnon D I. Copper enzymes in isolated chloroplast， polyphenoloxidase in Beta vulgari [J]. Plant Physiol.， 1949（24）：1-5.

[6]李合生. 植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù) [M]. 北京： 高等教育出版社， 2000：119-120.

[7]王愛(ài)國(guó)， 羅廣華， 邵從本， 等. 大豆種子超氧化物歧化酶的研究 [J]. 植物生理學(xué)， 1983， 9（1）： 77-83.

[8]華東師范大學(xué). 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) [M]. 北京：人民教育出版社， 1980.

[9]林植芳， 李雙順， 林桂珠， 等. 水稻葉片的衰老與超氧化物歧化酶活性及脂質(zhì)過(guò)氧化作用的關(guān)系 [J]. 植物學(xué)報(bào)， 1984， 26（6）： 605-615.

[10]王凱榮， 張磊. 花生鎘污染研究進(jìn)展[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)， 2008， 19（12）： 2757-2762.

[11]Clemens S. Toxic metal accumulation， responses to exposure and mechanisms of tolerance in plants [J]. Biochimie， 2006， 88（11）： 1707-1719.

[12]Deckert J. Cadmium toxicity in plants：Is there any analogy to its carcinogenic effect in mammalian cells？ [J]. Biometals， 2005， 18（5）： 475-481.

[13]Lagriffoul A， Mocquot B， Mench M， et al. Cadmium toxicity effects on growth， mineral and activities of stress related enzymes in young maize plants [J]. Plant Soil， 1998，200（2）：241-250.

[14]高芳， 林英杰， 張佳蕾， 等. 鎘脅迫對(duì)花生生理特性、產(chǎn)量和品質(zhì)的影響 [J]. 作物學(xué)報(bào)， 2011， 37（12）： 1-8.

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

盆栽試驗(yàn)在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)場(chǎng)防雨棚進(jìn)行。先將土壤過(guò)1 cm孔篩，每盆裝土15 kg。氯化鎘溶解后，加入土壤并拌勻，土壤Cd濃度為1.0 mg/kg，平衡30 d。每盆施入復(fù)合肥30 g，充分混勻。將枯草芽孢桿菌粉末以0、1、2和4 g/kg的施入量摻入到土壤中，每處理20盆。精選大小一致的花生種子種植盆中，每盆3粒。

于苗期、花針期、成熟期，選擇受光方向一致的主莖倒3葉取樣，一部分樣品放入冰盒中用于葉綠素含量和細(xì)胞膜透性測(cè)定，另一部分迅速放入液氮罐中帶回室內(nèi)，于-40℃低溫冰箱中保存，用于保護(hù)酶活性測(cè)定。同時(shí)取根，放入冰盒中用于根系活力測(cè)定。于收獲期取植株和莢果。

1.3測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1葉綠素含量測(cè)定采用Arnon法[5]，紫外分光光度計(jì)測(cè)吸光度。

1.3.2葉片細(xì)胞膜透性測(cè)定取花生葉片0.1 g置于具塞試管中，加入15 ml 1%吐溫80，真空泵抽氣10 min，緩慢放氣。室溫振蕩60 min，用電導(dǎo)率儀測(cè)定其初電導(dǎo)率。再放入沸水浴20 min，冷卻后再次測(cè)定其終電導(dǎo)率。以相對(duì)電導(dǎo)率表示電解質(zhì)滲出率。

1.3.3根系活力測(cè)定TTC還原法[6]測(cè)定根系活力。

1.3.4SOD、POD活性和MDA含量測(cè)定參照王愛(ài)國(guó)[7]的方法測(cè)定SOD活性；參照愈創(chuàng)木酚法[8]測(cè)定POD活性；參照林植芳[9]的方法測(cè)定MDA。

1.3.5Cd含量測(cè)定采用原子吸收分光光度計(jì)法。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

用DPS7.05統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析、顯著性檢驗(yàn)，用Microsoft Excel軟件進(jìn)行圖表制作。

2結(jié)果與分析

2.1枯草芽孢桿菌對(duì)花生生長(zhǎng)、產(chǎn)量及Cd積累的影響

2.1.1對(duì)花生生長(zhǎng)的影響表1表明，適當(dāng)施用枯草芽孢桿菌可提高花生主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)和生物量。其中2 g/kg處理效果最顯著，其主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)、植株鮮重和植株干重分別比對(duì)照增加了13.54%、18.10%、10.80%和19.35%。

3討論與結(jié)論

Cd污染土壤對(duì)植物的影響是多方面的，通過(guò)根系的吸收，Cd能改變?nèi)~綠體、線(xiàn)粒體等細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)與功能，從而影響植物的生理代謝活動(dòng)，給生長(zhǎng)發(fā)育帶來(lái)不利影響[11]。此外，Cd可通過(guò)食物鏈等途徑直接或間接危害動(dòng)物和人類(lèi)的健康[12]。植物葉綠體是較易積累鎘的細(xì)胞器之一，鎘能抑制葉綠素的生物合成[13]。劉文龍等[3]認(rèn)為不同品種花生葉綠素含量隨鎘濃度增加而降低的幅度和速度存在明顯的差異。高芳等[14]研究顯示豫花15葉綠素含量對(duì)鎘敏感，輕度鎘脅迫即可降低其含量。本研究結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌可以明顯緩解輕度Cd脅迫對(duì)花生葉綠素含量的影響，施用量越大效果越明顯。

Cd濃度在不高于60 mg/L范圍內(nèi)，隨著營(yíng)養(yǎng)液Cd濃度的增大，花生葉綠素含量和根氧化活力極顯著降低，根、葉細(xì)胞膜透性和丙二醛含量極顯著增加[3]。本研究結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌能明顯緩解Cd脅迫對(duì)花生葉片相對(duì)電導(dǎo)率和根系活力的影響，在花針期效果較明顯?；ㄉ~片SOD活性隨枯草芽孢桿菌用量增加呈先升高后降低趨勢(shì)，POD活性呈先降低再升高趨勢(shì)，MDA含量隨枯草芽孢桿菌用量增加而降低。說(shuō)明適量的枯草芽孢桿菌不僅可以增強(qiáng)抗氧化酶的活性，而且還能減輕膜脂過(guò)氧化作用，緩解了Cd對(duì)花生的脅迫作用。

鎘脅迫降低花生的產(chǎn)量，主要是降低了出仁率和單株莢果數(shù)[14]。施用枯草芽孢桿菌可促進(jìn)花生生長(zhǎng)，有效增加花生的主莖高、側(cè)枝長(zhǎng)、植株生物量，提高花生產(chǎn)量，2 g/kg處理明顯增加了花生的單株果重和飽果率?？莶菅挎邨U菌抑制花生籽粒中的Cd積累，其中2 g/kg處理效果最好。我國(guó)土壤中鎘的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)為1.0 mg/kg（也是本研究設(shè)定的依據(jù)），即使未達(dá)到污染水平，但是生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)依然存在，在此含量水平下，花生籽粒鎘含量為2.0 mg/kg，盡管施用枯草芽孢桿菌使花生籽粒鎘積累量降低約25%，但仍超過(guò)0.5 mg/kg國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB15201-1994）的2倍還多，可見(jiàn)鎘污染極具隱蔽性，由此帶來(lái)的花生食品安全風(fēng)險(xiǎn)不容忽視，未來(lái)應(yīng)加強(qiáng)花生鎘污染控制技術(shù)研究。

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