• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    實(shí)蠅類害蟲分子鑒定研究進(jìn)展

    2014-08-15 01:03:10陳韶萍郭瓊霞劉長明
    生物安全學(xué)報 2014年3期
    關(guān)鍵詞:實(shí)蠅條形碼多態(tài)性

    陳韶萍, 黃 振, 郭瓊霞*, 劉長明

    1福建出入境檢驗(yàn)檢疫局,福建省檢驗(yàn)檢疫技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,福建 福州 350001 2福建農(nóng)林大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,福建 福州 350002

    實(shí)蠅類害蟲隸屬雙翅目Diptera實(shí)蠅科Tephritidae,約有500屬4500種,除了南極與北極這2個高緯度區(qū)域,實(shí)蠅在全世界的熱帶、亞熱帶以及溫帶地區(qū)均有分布(梁廣勤等,2008;王振華等,2009)。世界上具有重要經(jīng)濟(jì)意義的實(shí)蠅主要分為5個類群,即按實(shí)蠅屬Anastrepha、果實(shí)蠅屬Bactrocera、寡鬃實(shí)蠅屬Dacus、臘實(shí)蠅屬Ceratitis以及繞實(shí)蠅屬Rhagoletis(黃振和黃可輝,2012; 梁廣勤等,2008)。我國有實(shí)蠅400余種,絕大多數(shù)種類為水果、蔬菜和花卉作物的害蟲,約有15屬22亞屬150余種,其中70余種被認(rèn)為是具有危險性或潛在危險性的重要害蟲(黃振,2010);同時其危害的寄主范圍廣,在進(jìn)境口岸經(jīng)常被截獲(黃振等,2012、2014)。

    長期以來,實(shí)蠅類害蟲的口岸檢疫鑒定主要以完整的成蟲外部形態(tài)特征為依據(jù)。然而,在口岸中經(jīng)常截獲的大多是實(shí)蠅幼蟲,在這種情況下,通常是將幼蟲在室內(nèi)飼養(yǎng)為成蟲再進(jìn)行鑒定,因其需要花費(fèi)較長的時間,從而影響果蔬進(jìn)出口貿(mào)易的通關(guān)速度。近年來,隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展,越來越多的分子生物學(xué)技術(shù)被用于昆蟲分類鑒定,如同工酶技術(shù)、DNA條形碼技術(shù)、PCR技術(shù)、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)(RAPD)、限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)(RFLP)、擴(kuò)增片段長度多態(tài)性技術(shù)(AFLP)、基因芯片技術(shù)等。這給實(shí)蠅分類鑒定帶來了契機(jī),即在傳統(tǒng)分類的基礎(chǔ)上借助分子手段,可以更好地解決實(shí)蠅物種鑒定問題。本文主要對目前已經(jīng)被用于實(shí)蠅鑒定的分子生物學(xué)技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)及其國內(nèi)外研究進(jìn)展進(jìn)行綜述,以期為今后選用分子生物學(xué)技術(shù)鑒定實(shí)蠅種屬提供參考。

    1 DNA條形碼技術(shù)

    1. 1 原理及特點(diǎn)

    2003年,加拿大動物學(xué)家Paul Hebert博士提出了DNA條形碼(DNA barcoding)的概念。DNA條形碼技術(shù)的原理類似于商品條形碼,關(guān)鍵是對物種的某一段標(biāo)準(zhǔn)目的基因片段進(jìn)行大范圍比對分析,進(jìn)而識別、鑒定未知的物種或者發(fā)現(xiàn)新種及隱存種等(Hebertetal.,2003)。近年來,由于DNA條形碼技術(shù)操作快速簡便、結(jié)果準(zhǔn)確性高以及可進(jìn)行非專家物種鑒定等特點(diǎn),為生物分類學(xué)提供了信息化的分類標(biāo)準(zhǔn)和有效的分類手段,成為目前發(fā)展速度最快的前沿學(xué)科之一。

    目前,被選作標(biāo)記的分子基因很多,但僅COⅠ (cytochrome oxidase Ⅰ或coxⅠ) 基因被選為DNA條形碼的靶標(biāo)基因。COⅠ基因是位于線粒體呼吸鏈上的編碼細(xì)胞色素氧化酶亞基Ⅰ的基因,該基因具有幾個特點(diǎn)(Lin & Danforth,2004):(1)大部分為母系遺傳,相對保守且沒有內(nèi)含子,不包含重復(fù)序列;(2)與其他基因相比,進(jìn)化速率較快;(3)AT含量較高,且在細(xì)胞內(nèi)為多拷貝,比較容易被擴(kuò)增。此外,COⅠ基因有足夠的變異能夠?qū)⒉煌锓N區(qū)分開。

    1. 2 國內(nèi)外研究進(jìn)展

    李志紅等(2011)利用DNA條形碼技術(shù)成功鑒定了采自泰國四色菊市番石榴爛果中的番石榴實(shí)蠅Bactroceracorrecta(Bezzi)幼蟲。Abd-El-Samie & El Fiky (2011)基于COⅠ序列,分析闡述了在埃及各地區(qū)建立種群的桃實(shí)蠅Bactrocerazonata(Saunders)的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。姜帆等(2011)利用DNA條形碼技術(shù)和BOLD系統(tǒng),對廣西南寧地區(qū)苦瓜中的實(shí)蠅幼蟲樣品進(jìn)行了序列測定、比對和分析。Liangetal.(2011)利用試驗(yàn)獲得的25種實(shí)蠅的155條COⅠ序列,通過構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹與遺傳距離分析,證實(shí)了COⅠ條形碼序列能準(zhǔn)確鑒定、識別除橘小實(shí)蠅Bactroceradorsails(Hendel)復(fù)合種外的中國果實(shí)蠅種屬。Liuetal.(2011)基于形態(tài)學(xué)及COⅠ條形碼序列,成功鑒定了來自布隆迪的入侵果實(shí)蠅BactrocerainvadensDrew。劉慎思等(2012)利用DNA條形碼技術(shù)構(gòu)建實(shí)蠅類害蟲快速鑒定技術(shù)體系,并證實(shí)該物種識別技術(shù)可用于口岸截獲的實(shí)蠅類害蟲幼體及殘體的準(zhǔn)確鑒定。Jiangetal.(2013)利用DNA條形碼技術(shù),基于SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)了能夠準(zhǔn)確鑒定、識別番石榴實(shí)蠅的特異性引物。

    1. 3 實(shí)蠅DNA條形碼的應(yīng)用情況

    根據(jù)BOLD Systems現(xiàn)有的數(shù)據(jù),總結(jié)了截至2014年10月22日實(shí)蠅DNA條形碼的種類、已公布的記錄數(shù)及其涉及的實(shí)蠅種類(表1)。由表1可以看出,實(shí)蠅DNA條形碼的種類主要有COⅠ-5P、COⅠ-3P、COⅡ、COⅢ、CYTB、atp6、28S等7種。其中以COⅠ標(biāo)記為主,已公布的記錄數(shù)為4540,是其他5種DNA標(biāo)記的113. 5倍,其中又以COⅠ-5P標(biāo)記為主,研究的實(shí)蠅種類達(dá)315種,COⅠ-3P標(biāo)記的有116種;果實(shí)蠅屬被研究公布的記錄數(shù)最多,其次為臘實(shí)蠅屬和寡鬃實(shí)蠅屬;BOLD Systems數(shù)據(jù)庫目前以COⅠ-5P標(biāo)記的果實(shí)蠅屬種類達(dá)61種,寡鬃實(shí)蠅屬達(dá)70種,臘實(shí)蠅屬55種,按實(shí)蠅屬11種,繞實(shí)蠅屬12種。

    2 以PCR(polymerase chain reaction)為基礎(chǔ)特異性擴(kuò)增快速鑒定技術(shù)

    2. 1 常規(guī)PCR技術(shù)

    2. 1. 1 原理及特點(diǎn) PCR,即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年建立,是一種選擇性體外擴(kuò)增DNA或RNA片段的技術(shù),其反應(yīng)體系主要包括DNA靶序列、引物、4種dNTP、DNA聚合酶以及適合的緩沖液體系,由高溫變性、低溫退火、適溫延伸3步為一個周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA序列得以擴(kuò)增(王廷華等,2005)。該技術(shù)操作快速簡便、特異性強(qiáng)及靈敏度高,但是具有易被污染、易出現(xiàn)假陽性和假陰性等缺點(diǎn)。

    2. 1. 2 國內(nèi)外研究進(jìn)展 余道堅(jiān)等(2004)利用mtDNA COⅠ部分序列,通過對大量的實(shí)蠅基因序列進(jìn)行分析比較,設(shè)計(jì)出2對特異性引物,應(yīng)用定性PCR技術(shù)成功檢測、鑒定了番石榴實(shí)蠅。崔俊霞等(2006)采用形態(tài)學(xué)觀察與PCR技術(shù)相結(jié)合的方法,成功鑒定了從臺灣水果中截獲的疑似橘小實(shí)蠅的幼蟲和蛹。王振華等(2008)采用PCR方法,利用ITS間斷序列分型引物,根據(jù)擴(kuò)增后片段的不同,區(qū)分橘大實(shí)蠅Bactroceraminax(Enderlein)與橘小實(shí)蠅??浊锷彽?2010)利用特異的嵌套式引物對橘小實(shí)蠅18S rDNA基因片段進(jìn)行擴(kuò)增和序列比對分析,成功鑒定了柑橘果實(shí)中橘小實(shí)蠅的卵。

    表1 實(shí)蠅DNA條形碼的應(yīng)用情況Table 1 The application of DNA barcoding for fruit fly identification

    2. 2 Real-time PCR技術(shù)

    2. 2. 1 原理及特點(diǎn) Real-time PCR,即實(shí)時熒光定量PCR技術(shù),于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,該技術(shù)實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍。所謂實(shí)時熒光定量PCR技術(shù),即指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法(歐陽松應(yīng)等,2004)。與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強(qiáng)、能有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn)。目前該技術(shù)已得到廣泛應(yīng)用。

    2. 2. 2 國內(nèi)外研究進(jìn)展 余道堅(jiān)等(2006)基于mtDNA COⅠ設(shè)計(jì)引物,建立了SYBR Green實(shí)時熒光PCR技術(shù)快速鑒定辣椒實(shí)蠅Bactroceralatifrons(Hendel)的方法。Fengetal.(2007)基于mtDNA COⅠ,應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)成功鑒定了三葉斑潛蠅Liriomyzatrifolii(Burgess)幼蟲。徐浪等(2010)基于mtDNA COⅠ設(shè)計(jì)6條特異性引物,應(yīng)用AllGlo實(shí)時熒光PCR方法成功鑒定了南美按實(shí)蠅Anastrephafraterculus(Wiedemann)、墨西哥按實(shí)蠅Anastrephaludens(Loew)、西印度按實(shí)蠅Anastrephaoblique(Macquart)、印加按實(shí)蠅AnastrephadistinctaGreene、中美按實(shí)蠅AnastrephastriataSchiner等6種重要的按實(shí)蠅。

    2. 3 RFLP(restriction fragment length polymorphism)技術(shù)

    2. 3. 1 原理及特點(diǎn) RFLP,即限制性片段長度多態(tài)性技術(shù),于1980年由Bostein建立并發(fā)展起來。它是指利用限制性內(nèi)切酶酶解樣品DNA從而產(chǎn)生不同長度的DNA片,進(jìn)而通過電泳將不同長度的DNA片段分離出來(周延清,2005)。該技術(shù)具有多態(tài)性豐富、對基因組的覆蓋范圍比較廣等優(yōu)點(diǎn),但存在成本昂貴、操作繁瑣、檢測周期長等缺點(diǎn)。

    2. 3. 2 國內(nèi)外研究進(jìn)展 Muraji & Nakahara (2002)應(yīng)用RFLP技術(shù)研究了亞太地區(qū)18種實(shí)蠅的快速鑒定方法,結(jié)果表明,除了楊桃實(shí)蠅BactroceracarambolaeDrew & Hancock和木瓜實(shí)蠅BactrocerapapayaeDrew & Hancock,該方法可準(zhǔn)確鑒別其他16種實(shí)蠅害蟲。吳佳教等(2004)研究表明,RFLP技術(shù)適用于橘小實(shí)蠅、銹實(shí)蠅Bactrocerarubigina(Wang & Zhao)、瓜實(shí)蠅Bactroceracucurbitae(Coquillett)、南瓜實(shí)蠅Bactroceratau(Walker)、具條實(shí)蠅Bactrocerascutellata(Hendel)及木姜子實(shí)蠅BactrocerahyalineShiraki等6種實(shí)蠅的快速鑒定。吳佳教等(2005)應(yīng)用RFLP技術(shù),對我國口岸截獲頻率較高的9種檢疫性實(shí)蠅進(jìn)行了快速鑒定。林麗莉等(2007)應(yīng)用RFLP技術(shù),對我國部分地區(qū)發(fā)生分布的蜜柑大實(shí)蠅Bactroceratsuneonis(Miyake)和橘大實(shí)蠅開展了分子生物學(xué)鑒定方法的研究并取得成功。Chuaetal.(2010)采用RFLP技術(shù)成功區(qū)分了楊桃實(shí)蠅和木瓜實(shí)蠅,進(jìn)而使橘小實(shí)蠅復(fù)合種的有效識別得以實(shí)現(xiàn)。

    2. 4 RAPD(randomly amplified polymorphic DNA)技術(shù)

    2. 4. 1 原理及特點(diǎn) RAPD,即隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù),由美國杜邦公司和加利福尼亞生物研究所在1900年提出(Welsh & McClelland,1990;Williamsetal.,1990)。它以一種或多種隨機(jī)引物對模板DNA進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增,是建立在PCR基礎(chǔ)上研究模板DNA多態(tài)性的遺傳標(biāo)記技術(shù)。其基本原理是利用人工合成的短核苷酸(大約10個堿基)對DNA靶序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增,將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離及溴化乙錠染色就可檢測出DNA靶序列的多態(tài)性(溫孚江,2002)。該技術(shù)具有操作簡便易行、分析快捷方便、不用專門設(shè)計(jì)引物及引物數(shù)量不限等優(yōu)點(diǎn),但是存在穩(wěn)定性差、重復(fù)性差、易出現(xiàn)假帶等缺點(diǎn)。

    2. 4. 2 國內(nèi)外研究進(jìn)展 Haymer & McInnis (1994)應(yīng)用RAPD技術(shù)鑒定了地中海實(shí)蠅Ceratitiscapitata(Wiedemann),認(rèn)為RAPD技術(shù)可用于證明害蟲同一種群和不同種群間的遺傳變異。張紅梅等(2004)利用RAPD技術(shù)對陜西省常見4種實(shí)蠅基因組DNA的多態(tài)性進(jìn)行了初步研究。張亮和張智英(2007)采用RAPD技術(shù)鑒定了南瓜實(shí)蠅、黑漆實(shí)蠅Bactrocerascutellaris(Bezzi)、具條實(shí)蠅、瓜實(shí)蠅、橘小實(shí)蠅和番石榴實(shí)蠅等6種實(shí)蠅。

    2. 5 AFLP(amplified fragment length polymorphism)技術(shù)

    2. 5. 1 原理及特點(diǎn) AFLP,即擴(kuò)增片段長度多態(tài)性技術(shù),是一種基于PCR技術(shù)的選擇性擴(kuò)增限制性片段的方法,基因組DNA先用限制性內(nèi)切酶切割,然后在限制性片段兩端連接人工接頭作為擴(kuò)增的模板,接頭序列和相鄰的限制性位點(diǎn)序列作為引物結(jié)合位點(diǎn)(鞠秀芝等,2005)。該技術(shù)具有快速高效、多態(tài)性豐富、可靠性好等優(yōu)點(diǎn),但同時存在分析成本高、對樣本DNA質(zhì)量要求較高等缺點(diǎn)。

    2. 5. 2 國內(nèi)外研究進(jìn)展 Kakouli-Duarteetal.(2001)采用AFLP技術(shù)準(zhǔn)確區(qū)分了地中海實(shí)蠅和納塔爾小條實(shí)蠅CeratitisrosaKarsch。我國暫無相關(guān)報道。

    2. 6 基因芯片技術(shù)

    2. 6. 1 原理及特點(diǎn) 基因芯片是生物芯片的一種,又被稱作DNA芯片。其工作原理:經(jīng)過標(biāo)記的待測樣本DNA與位于芯片上特定位置的探針雜交,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對的原則確定靶DNA序列,最后經(jīng)激光共聚集顯微鏡掃描,利用計(jì)算機(jī)系統(tǒng)對熒光信號進(jìn)行比較和檢測進(jìn)而迅速得出所需信息(馮永強(qiáng)和閻小君,2000)。該技術(shù)具有快速高效、高通量、微型化以及自動化等優(yōu)點(diǎn),但同時存在技術(shù)復(fù)雜、成本昂貴、檢測靈敏度低、重復(fù)性差及分析范圍較窄等缺點(diǎn)。

    2. 6. 2 國內(nèi)外研究進(jìn)展 李文芬等(2008)選擇mtDNA COⅠ作為分子標(biāo)記基因,建立了地中海實(shí)蠅、芒果小條實(shí)蠅Ceratitiscosyra(Walker)以及納塔爾小條實(shí)蠅等實(shí)蠅科重要害蟲的生物芯片檢測方法。國外暫未發(fā)現(xiàn)相關(guān)文獻(xiàn)。

    3 問題與展望

    近年來,分子生物學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展,其在昆蟲分類中的應(yīng)用也越來越廣,這些技術(shù)不僅驗(yàn)證了傳統(tǒng)分類所得出的結(jié)論,而且解決了傳統(tǒng)分類所無法解決的疑難問題,均顯示出分子生物學(xué)技術(shù)的優(yōu)勢及廣闊的發(fā)展前景。

    雖然分子生物學(xué)技術(shù)具有準(zhǔn)確、客觀等特點(diǎn),即分子序列的信息代表遺傳的本質(zhì),它不受物種個體發(fā)育階段及環(huán)境條件等的影響,但同時存在許多問題。首先,從龐大的DNA文庫中選擇最佳、最能反映物種間進(jìn)化關(guān)系的基因片段仍存在較大難度;其次,選擇不同的目的基因研究同一物種,可能會得到不同的結(jié)果;再次,使用不同的分子生物學(xué)分析軟件有可能得出不同的結(jié)果。這些問題是今后昆蟲分類研究的重要課題。

    崔俊霞, 徐瑛, 聞偉剛, 陳先鋒, 張同心. 2006. 橘小實(shí)蠅快速檢疫鑒定方法. 昆蟲知識, 43(5): 731-733.

    馮永強(qiáng), 閻小君. 2000. 基因芯片技術(shù). 國外醫(yī)學(xué): 分子生物學(xué)分冊, 22(1): 1-5.

    黃振. 2010. 果實(shí)蠅屬重要種的鑒定、人工飼料篩選、適生性預(yù)測和風(fēng)險分析. ??冢?海南大學(xué).

    黃振, 郭瓊霞, 吳淇銘, 黃可輝. 2014. 番石榴果實(shí)蠅形態(tài)、危害與入侵中國的風(fēng)險. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報, 26(4): 61-63.

    黃振, 黃可輝. 2012. 果蔬重要實(shí)蠅屬的分布、危害與形態(tài)特征比較研究. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報, 24(3): 73-75.

    黃振, 梁軍, 張旺珍. 2012. 我國首次截獲檢疫性有害生物——腿端黑實(shí)蠅. 植物檢疫, 26(6): 94-99.

    姜帆, 劉佳琪, 李志紅, 吳佳教, 趙朔. 2011. 基于DNA條形碼的廣西苦瓜中實(shí)蠅幼蟲分子鑒定研究. 植物保護(hù), 37(4): 150-153.

    鞠秀芝, 杜勝利, 宗兆鋒, 張桂華, 韓毅科, 王鳴. 2004. AFLP技術(shù)及其常見問題與解決方案. 天津農(nóng)業(yè)科學(xué), 10(4): 6-9.

    孔秋蓮, 葉軍, 岳玲, 陳志軍, 包英姿, 徐赟, 郭卡, 袁忠誼, 戚文元. 2010. 快速檢測水果中桔小實(shí)蠅卵的分子診斷方法研究. 華北農(nóng)學(xué)報, 25(1): 226-230.

    李文芬, 余道堅(jiān), 顏亨梅, 李建光, 徐浪, 任魯風(fēng). 2008. 地中海實(shí)蠅及其近緣種基因芯片檢測研究. 昆蟲學(xué)報, 51(1): 61-67.

    李志紅, 吳佳教, 劉佳琪. 2011. 基于DNA條形碼技術(shù)的泰國番石榴中實(shí)蠅幼蟲分子鑒定研究. 植物檢疫, 25(1): 49-52.

    梁廣勤, 梁帆, 趙菊鵬, 胡學(xué)難, 吳佳教. 2008. 中國實(shí)蠅檢疫研究概況. 環(huán)境昆蟲學(xué)報, 30(4): 361-369.

    林麗莉, 吳佳教, 曾玲, 梁廣文, 胡學(xué)難, 莫仁浩. 2007. 二種大實(shí)蠅的PCR-RFLP快速鑒定方法. 昆蟲知識, 44(16): 588-592.

    劉慎思, 張桂芬, 武強(qiáng), 張愛兵, 王進(jìn)軍, 萬方浩. 2012. 桔小實(shí)蠅幼體及成蟲殘體DNA條形碼識別技術(shù)的建立與應(yīng)用. 昆蟲學(xué)報, 55(3): 336-343.

    歐陽松應(yīng), 楊冬, 歐陽紅生, 馬鶴雯. 2004. 實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用. 生命的化學(xué), 24(1): 74-76.

    王廷華, 景強(qiáng), Dubus P. 2005. PCR理論與技術(shù). 北京: 科學(xué)出版社.

    王振華, 馮漢利, 呂志藻, 趙暉, 郭明星, 朱堂明, 曾憲東, 陳建軍. 2009. 實(shí)蠅類昆蟲檢測技術(shù)研究進(jìn)展. 湖北植保, 112(2): 28-30.

    王振華, 朱堂明, 呂志藻, 郭明星, 陳建軍, 趙暉. 2008. 用PCR方法鑒定區(qū)分柑橘大實(shí)蠅與橘小實(shí)蠅. 植物檢疫, 22(3): 155-157.

    溫孚江. 2002. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù). 北京: 中國科學(xué)技術(shù)出版社.

    吳佳教, 胡學(xué)難, 趙菊鵬, 梁帆, 梁廣勤. 2005. 9種檢疫性實(shí)蠅PCR-RFLP快速鑒定研究. 植物檢疫, 19(1): 2-6.

    吳佳教, 梁帆, 胡學(xué)難, 趙菊鵬, 梁廣勤. 2004. 我國南方常見的6種寡毛實(shí)蠅PCR-RFLP快速鑒定研究. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 26(5): 770-773.

    徐浪, 余道堅(jiān), 李建光, 王銀竹, 陳志粦. 2010. AllGlo實(shí)時熒光PCR快速檢測6種按實(shí)蠅. 植物檢疫, 24(5): 18-21.

    余道堅(jiān), 鄧中平, 陳志粦, 焦懿, 章桂明, 康林, 楊偉東, 金顯忠. 2004. PCR法檢疫鑒定番石榴實(shí)蠅. 植物檢疫, 18(2): 73-76.

    余道堅(jiān), 章桂明, 陳志粦, 康林, 楊偉東. 2006. SYBR Green實(shí)時熒光PCR快速鑒定辣椒實(shí)蠅. 植物檢疫, 20(1): 10-14.

    張紅梅, 潘亞勤, 魏迪功, 仵均祥. 2004. 陜西省常見四種實(shí)蠅的 RAPD 研究初報(雙翅目: 實(shí)蠅科). 昆蟲分類學(xué)報, 26(1): 59-63.

    張亮, 張智英. 2007. 云南六種實(shí)蠅的RAPD快速鑒定. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報, 18(5): 1163-1166.

    周延清. 2005. DNA分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中的應(yīng)用. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社.

    Abd-El-Samie E M and El Fiky Z A. 2011. Molecular phylogeny and identification of the peach fruit fly,Bactrocerazonata, established in Egypt.JournalofInsectScience, 11: 117.

    Chua T H, Chong Y V and Lim S H. 2010. Species determination of MalaysianBactrocerapests using PCR-RFLP analyses (Diptera: Tephritidae).PestManagementScience, 66: 379-384.

    Feng X, Chen N Z, Ma J, Zhu S F and Hu X N. 2007. Molecular identification ofLiriomyzatrifolii(Burgess) (Dipt., Agromyzidae) based on real-time PCR.JournalofAppliedEntomology, 131: 548-552.

    Haymer D S and McInnis D O. 1994. Resolution of populations of the Mediterranean fruit fly at the DNA level using random primers for the polymerase chain reaction.Genome, 37: 244-248.

    Hebert P D, Cywinska A and Ball S L. 2003. Biological identifications through DNA barcodes.ProceedingsoftheRoyalSocietyofLondon.SeriesB:BiologicalSciences, 270: 313-321.

    Jiang F, Li Z H, Deng Y L, Wu J J, Liu R S and Buahom N. 2013. Rapid diagnosis of the economically important fruit fly,Bactroceracorrecta(Diptera: Tephritidae) based on a species-specific barcoding cytochrome oxidase Ⅰ marker.BulletinofEntomologicalResearch, 103: 363-371.

    Kakouli-Duarte T, Casey D and Burnell A. 2001. Development of a diagnostic DNA probe for the fruit fliesCeratitiscapitataandCeratitisrosa(Diptera: Tephritidae) using amplified fragment-length polymorphism.JournalofEconomicEntomology, 94: 989-997.

    Liang L, Jiang W and Yu H. 2011. Identification of ChineseBactroceraspecies through DNA barcoding (Diptera, Tephritidae).ActaZootaxonomicaSinica, 36: 925-932.

    Lin C P and Danforth B N. 2004. How do insect nuclear and mitochondrial gene substitution patterns differ? Insights from Bayesian analyses of combined datasets.MolecularPhylogeneticsandEvolution, 30: 686-702.

    Liu L, Liu J, Wang Q, Ndayiragije P, Ntahimpera A, Nkubaye E, Yang Q and Li Z. 2011. Identification ofBactrocerainvadens(Diptera: Tephritidae) from Burundi, based on morphological characteristics and DNA barcode.AfricanJournalofBiotechnology, 10: 13623-13630.

    Muraji M and Nakahara S. 2002. Discrimination among pest species ofBactrocera(Diptera: Tephritidae) based on PCR-RFLP of the mitochondrial DNA.AppliedEntomologyandZoology, 37: 437-446.

    Welsh J and McClelland M. 1990. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers.NucleicAcidsResearch, 18: 7213-7218.

    Williams J G, Kubelik A R, Livak K J, Rafalski J A and Tingey S V. 1990. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers.NucleicAcidsResearch, 18: 6531-6535.

    猜你喜歡
    實(shí)蠅條形碼多態(tài)性
    單核苷酸多態(tài)性與中醫(yī)證候相關(guān)性研究進(jìn)展
    創(chuàng)意條形碼
    從條形碼到二維碼
    從條形碼到二維碼
    條形碼大變身
    瓜實(shí)蠅的發(fā)生與綜合防治
    蔬菜(2016年8期)2016-10-10 06:49:12
    實(shí)蠅蟲果悶殺袋
    柑橘大實(shí)蠅綜合治理
    馬鈴薯cpDNA/mtDNA多態(tài)性的多重PCR檢測
    GlobalFiler~? PCR擴(kuò)增試劑盒驗(yàn)證及其STR遺傳多態(tài)性
    国产黄片视频在线免费观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲av二区三区四区| 在线天堂最新版资源| 欧美最新免费一区二区三区| 久久久久国产网址| 亚洲中文av在线| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久女婷五月综合色啪小说| 欧美区成人在线视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 黄色日韩在线| 免费av不卡在线播放| 三级国产精品片| 99久久精品国产国产毛片| av不卡在线播放| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久久精品免费免费高清| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产av码专区亚洲av| 高清午夜精品一区二区三区| 少妇人妻一区二区三区视频| 一级毛片 在线播放| av一本久久久久| 天堂8中文在线网| 久久午夜福利片| 校园人妻丝袜中文字幕| 中文字幕人妻丝袜制服| 日韩av免费高清视频| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲av日韩在线播放| 欧美精品高潮呻吟av久久| 欧美xxxx性猛交bbbb| 性色avwww在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产男女内射视频| 精品久久久久久久久亚洲| 午夜日本视频在线| 国产精品久久久久久久电影| 伦精品一区二区三区| 亚洲av成人精品一区久久| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 特大巨黑吊av在线直播| 免费少妇av软件| 中文资源天堂在线| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲av.av天堂| 精品一区在线观看国产| 大香蕉97超碰在线| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产成人精品婷婷| 久久99热这里只频精品6学生| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲精品国产色婷婷电影| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 国产成人精品婷婷| 精品一区在线观看国产| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产精品国产三级国产专区5o| av在线老鸭窝| 国产欧美亚洲国产| 亚洲精品亚洲一区二区| 精品国产一区二区久久| 欧美性感艳星| 亚洲高清免费不卡视频| 嫩草影院新地址| 久久久久人妻精品一区果冻| 成人黄色视频免费在线看| 成人毛片a级毛片在线播放| 九草在线视频观看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 黄色欧美视频在线观看| 国产精品蜜桃在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 另类精品久久| 国产在线男女| 欧美日韩综合久久久久久| 中文欧美无线码| 各种免费的搞黄视频| 人人澡人人妻人| 成年人午夜在线观看视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲av二区三区四区| 国产亚洲5aaaaa淫片| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产极品天堂在线| 婷婷色综合大香蕉| 一区二区三区精品91| 亚洲精品日韩av片在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 最近中文字幕2019免费版| 国产成人精品久久久久久| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 日韩av在线免费看完整版不卡| 免费看光身美女| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 蜜桃在线观看..| 亚洲精华国产精华液的使用体验| av黄色大香蕉| 91精品国产九色| 久热久热在线精品观看| av卡一久久| av在线观看视频网站免费| h日本视频在线播放| 久久久久国产网址| 少妇熟女欧美另类| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 国产成人a∨麻豆精品| 夫妻午夜视频| 亚洲欧洲日产国产| 少妇人妻久久综合中文| 国产有黄有色有爽视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 国产欧美亚洲国产| 国产乱来视频区| 曰老女人黄片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲经典国产精华液单| 日本黄色日本黄色录像| 女人久久www免费人成看片| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久久久国产网址| 国产欧美亚洲国产| h日本视频在线播放| .国产精品久久| 人体艺术视频欧美日本| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久久久精品性色| 曰老女人黄片| 久久精品国产亚洲网站| 在线免费观看不下载黄p国产| 黄色视频在线播放观看不卡| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产精品99久久久久久久久| 日本黄大片高清| 草草在线视频免费看| 美女视频免费永久观看网站| 亚洲精品成人av观看孕妇| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产av一区二区精品久久| 国产av码专区亚洲av| 成人免费观看视频高清| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产高清有码在线观看视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 哪个播放器可以免费观看大片| 一级片'在线观看视频| 亚洲成人手机| 国产精品伦人一区二区| 人人妻人人看人人澡| 美女主播在线视频| 曰老女人黄片| 伦理电影大哥的女人| 亚洲自偷自拍三级| 丝袜脚勾引网站| 99re6热这里在线精品视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲综合精品二区| 亚洲精品一二三| av福利片在线| 国产美女午夜福利| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产亚洲最大av| 免费看av在线观看网站| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 国产精品三级大全| 免费黄网站久久成人精品| av.在线天堂| 精品一区在线观看国产| 国产在线一区二区三区精| 我的老师免费观看完整版| 99九九线精品视频在线观看视频| 一个人免费看片子| 婷婷色综合大香蕉| 成年人午夜在线观看视频| 十八禁网站网址无遮挡 | a级一级毛片免费在线观看| 69精品国产乱码久久久| 男人爽女人下面视频在线观看| 色5月婷婷丁香| 少妇人妻久久综合中文| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 一级二级三级毛片免费看| av黄色大香蕉| 亚洲精品日韩av片在线观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 插逼视频在线观看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 日本91视频免费播放| 午夜日本视频在线| 在现免费观看毛片| 女性生殖器流出的白浆| 成人影院久久| 在线观看一区二区三区激情| 国产精品无大码| 插阴视频在线观看视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 伦理电影免费视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 99久久精品一区二区三区| 精品久久久久久久久亚洲| 在线 av 中文字幕| 波野结衣二区三区在线| 偷拍熟女少妇极品色| 免费黄频网站在线观看国产| 国内揄拍国产精品人妻在线| 秋霞在线观看毛片| 边亲边吃奶的免费视频| videossex国产| 国产精品国产av在线观看| 亚洲国产精品专区欧美| 免费看日本二区| 免费观看在线日韩| 视频中文字幕在线观看| 观看免费一级毛片| 26uuu在线亚洲综合色| 国产淫片久久久久久久久| 免费看光身美女| 日韩av免费高清视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 天天操日日干夜夜撸| 久久6这里有精品| 午夜视频国产福利| 亚洲怡红院男人天堂| 欧美xxxx性猛交bbbb| 老司机影院毛片| 国产视频首页在线观看| 男女无遮挡免费网站观看| 最黄视频免费看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 久久人妻熟女aⅴ| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲欧美成人精品一区二区| 在线观看三级黄色| 亚洲国产精品国产精品| 国产 一区精品| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 久久人妻熟女aⅴ| 在线观看美女被高潮喷水网站| av线在线观看网站| 99视频精品全部免费 在线| 久久久久久久久大av| av在线播放精品| 青春草国产在线视频| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 亚洲国产最新在线播放| www.av在线官网国产| 午夜久久久在线观看| 又爽又黄a免费视频| 久久国产乱子免费精品| 日本黄色片子视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 久久久久精品性色| 亚洲av日韩在线播放| 嫩草影院入口| 女人久久www免费人成看片| 我要看日韩黄色一级片| 91成人精品电影| 亚洲一区二区三区欧美精品| 成人漫画全彩无遮挡| 天堂俺去俺来也www色官网| 伊人久久精品亚洲午夜| 最新中文字幕久久久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 18禁动态无遮挡网站| 免费大片黄手机在线观看| 美女主播在线视频| 国产成人a∨麻豆精品| 精品亚洲成a人片在线观看| 永久网站在线| 精品久久久久久久久av| 午夜激情福利司机影院| 国产精品不卡视频一区二区| 91aial.com中文字幕在线观看| 一级毛片电影观看| 成人二区视频| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲内射少妇av| 啦啦啦啦在线视频资源| 五月开心婷婷网| 日本欧美国产在线视频| 免费看光身美女| av天堂久久9| av在线老鸭窝| 国产成人91sexporn| 亚洲国产欧美日韩在线播放 | 免费黄色在线免费观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 51国产日韩欧美| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 久久鲁丝午夜福利片| 久久久久人妻精品一区果冻| 97超碰精品成人国产| av免费在线看不卡| 精品亚洲成a人片在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美精品一区二区免费开放| 欧美3d第一页| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲欧美精品自产自拍| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产高清不卡午夜福利| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 五月开心婷婷网| 最近中文字幕高清免费大全6| 中国美白少妇内射xxxbb| 97在线视频观看| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲av福利一区| 日日啪夜夜爽| www.色视频.com| 免费在线观看成人毛片| 十八禁网站网址无遮挡 | 亚洲图色成人| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产男人的电影天堂91| 国产美女午夜福利| 亚洲在久久综合| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 午夜激情福利司机影院| 少妇高潮的动态图| 日日撸夜夜添| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产在线免费精品| 各种免费的搞黄视频| 韩国高清视频一区二区三区| 欧美区成人在线视频| 国产精品一区二区在线不卡| 18禁动态无遮挡网站| 日本黄大片高清| 9色porny在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 美女大奶头黄色视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 欧美高清成人免费视频www| 丰满乱子伦码专区| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲国产精品成人久久小说| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 欧美精品亚洲一区二区| 精品人妻偷拍中文字幕| 日韩一区二区三区影片| 午夜av观看不卡| 一级av片app| 亚洲一区二区三区欧美精品| 丰满饥渴人妻一区二区三| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲国产色片| av网站免费在线观看视频| 热99国产精品久久久久久7| 欧美xxⅹ黑人| 一区二区三区四区激情视频| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 夫妻午夜视频| 男女无遮挡免费网站观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 夜夜爽夜夜爽视频| 久久久久视频综合| 亚洲av成人精品一区久久| xxx大片免费视频| 国产高清三级在线| 亚洲国产欧美在线一区| 精品视频人人做人人爽| 2018国产大陆天天弄谢| 99久久精品一区二区三区| 2018国产大陆天天弄谢| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲精品国产成人久久av| av黄色大香蕉| 亚洲精品色激情综合| 一个人免费看片子| 国产精品免费大片| a级片在线免费高清观看视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 免费看光身美女| 亚洲色图综合在线观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 在线看a的网站| 国产精品一区www在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 久久人人爽人人片av| 久久久亚洲精品成人影院| 少妇熟女欧美另类| 观看av在线不卡| 亚洲av不卡在线观看| 少妇人妻 视频| 久久精品国产亚洲av天美| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产深夜福利视频在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产毛片在线视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久久国产精品麻豆| 好男人视频免费观看在线| 全区人妻精品视频| 水蜜桃什么品种好| 欧美日韩在线观看h| 三上悠亚av全集在线观看 | 国产色婷婷99| 欧美国产精品一级二级三级 | 国模一区二区三区四区视频| 高清黄色对白视频在线免费看 | 精华霜和精华液先用哪个| 18禁动态无遮挡网站| 精品久久久久久电影网| 中文字幕久久专区| 18禁在线播放成人免费| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| a级毛片在线看网站| 青春草国产在线视频| 观看av在线不卡| 97在线人人人人妻| 国产成人精品婷婷| 亚洲国产精品999| 嫩草影院新地址| 久久女婷五月综合色啪小说| 国产亚洲精品久久久com| 美女大奶头黄色视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲精品国产av蜜桃| 我的女老师完整版在线观看| 日韩电影二区| 久久午夜综合久久蜜桃| 看十八女毛片水多多多| 女性被躁到高潮视频| 2022亚洲国产成人精品| 99热这里只有精品一区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲三级黄色毛片| 在线观看美女被高潮喷水网站| 三级经典国产精品| 国内精品宾馆在线| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲不卡免费看| 国产黄片视频在线免费观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久97久久精品| 国产av码专区亚洲av| a 毛片基地| 午夜av观看不卡| 久久久久久久久久久丰满| 日本vs欧美在线观看视频 | 黄色怎么调成土黄色| 成人毛片a级毛片在线播放| a级毛色黄片| 少妇人妻 视频| 夜夜爽夜夜爽视频| 在线观看美女被高潮喷水网站| 岛国毛片在线播放| 女性被躁到高潮视频| av在线观看视频网站免费| 熟妇人妻不卡中文字幕| 2018国产大陆天天弄谢| 免费看光身美女| 插阴视频在线观看视频| 婷婷色麻豆天堂久久| 午夜精品国产一区二区电影| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久国产欧美日韩av| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲国产日韩一区二区| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲精品视频女| 欧美成人精品欧美一级黄| 一本色道久久久久久精品综合| 另类亚洲欧美激情| 热re99久久国产66热| 交换朋友夫妻互换小说| 久久久久久久大尺度免费视频| 久久久久久久久大av| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久97久久精品| 国产免费福利视频在线观看| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲怡红院男人天堂| 秋霞伦理黄片| 国产免费视频播放在线视频| 91久久精品电影网| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲,欧美,日韩| 国产免费一区二区三区四区乱码| 最近中文字幕2019免费版| 一本大道久久a久久精品| 精品熟女少妇av免费看| 热99国产精品久久久久久7| 男女免费视频国产| 亚洲av免费高清在线观看| 全区人妻精品视频| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 免费黄色在线免费观看| 这个男人来自地球电影免费观看 | 午夜激情久久久久久久| 一级爰片在线观看| 99热网站在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久精品国产自在天天线| 久久精品国产亚洲网站| 国产精品偷伦视频观看了| 韩国高清视频一区二区三区| 高清午夜精品一区二区三区| 女性被躁到高潮视频| 亚洲av国产av综合av卡| 高清在线视频一区二区三区| 精品久久久久久久久av| 久久鲁丝午夜福利片| 久久国产亚洲av麻豆专区| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 久久精品久久久久久久性| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久av网站| 日韩免费高清中文字幕av| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 观看免费一级毛片| 视频中文字幕在线观看| av.在线天堂| 婷婷色av中文字幕| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 欧美人与善性xxx| 亚洲四区av| 欧美精品一区二区免费开放| 免费少妇av软件| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 亚洲av不卡在线观看| 日韩av免费高清视频| 性高湖久久久久久久久免费观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产一区二区在线观看av| 日韩在线高清观看一区二区三区| videossex国产| 免费人妻精品一区二区三区视频| tube8黄色片| 人人澡人人妻人| 大话2 男鬼变身卡| 久久久久久久国产电影| 有码 亚洲区| 亚洲成色77777| 秋霞在线观看毛片| 中国三级夫妇交换| 亚洲欧美日韩东京热| 五月天丁香电影| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 一级毛片我不卡| 一区二区三区精品91| 在线观看人妻少妇| 日本爱情动作片www.在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| av线在线观看网站| 偷拍熟女少妇极品色| 三级国产精品欧美在线观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 我要看日韩黄色一级片| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲国产成人一精品久久久| 激情五月婷婷亚洲| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 嘟嘟电影网在线观看| 国产精品三级大全| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 另类精品久久| 精品久久久久久久久av| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲成人一二三区av| 精品久久久久久久久av| 久久久国产精品麻豆| 国产视频内射| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 九草在线视频观看| 国产 精品1| 亚洲天堂av无毛| 又爽又黄a免费视频| 日韩av免费高清视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 日本黄大片高清| 国产黄色视频一区二区在线观看| 日本av免费视频播放| 少妇精品久久久久久久| 丰满乱子伦码专区| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 最新中文字幕久久久久| 亚洲av综合色区一区| 中文天堂在线官网| 18禁动态无遮挡网站|