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    蝙蝠葛堿對(duì)阿爾茨海默病小鼠海馬組織Aβ水平的影響

    2014-08-11 22:18:07費(fèi)洪新等
    科技創(chuàng)新與應(yīng)用 2014年25期
    關(guān)鍵詞:阿爾茨海默病小鼠

    費(fèi)洪新等

    摘 要:目的:研究中藥提純成分蝙蝠葛堿對(duì)阿爾茨海默病小鼠海馬組織Aβ水平的影響。方法:阿爾茨海默病小鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、模型組、治療組、蝙蝠葛堿組。給予蝙蝠葛堿灌胃,觀察小鼠Aβ的變化。結(jié)果:與模型組比較后,蝙蝠葛堿組Aβ水平明顯降低。結(jié)論:蝙蝠葛堿能降低Aβ水平,對(duì)阿爾茨海默病小鼠具有一定的海馬組織保護(hù)作用。

    關(guān)鍵詞:蝙蝠葛堿;阿爾茨海默?。恍∈?/p>

    蝙蝠葛堿(Dauricine,DAU)是祖國(guó)醫(yī)藥北豆根植物的提純有效成分單體,具有廣泛的藥理作用,包括抗氧化作用[1]、腦缺血保護(hù)作用[2-3]等?;诖藢?shí)驗(yàn)開展DAU對(duì)腦部疾病阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)海馬組織密切相關(guān)的因子、淀粉樣斑塊核心成分、即β-淀粉樣蛋白(Amyloid beda,Aβ)[4]的研究,研究DAU對(duì)AD小鼠Aβ的影響作用。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    3月齡標(biāo)準(zhǔn)體重APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠和同月齡、同背景C57小鼠,常溫、常濕、自由攝取食物,飼養(yǎng)在黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

    1.2 藥物

    西藥陽(yáng)性對(duì)照吡拉西坦購(gòu)于湖南迪諾制藥有限公司(批號(hào)130325);DAU購(gòu)于MUST公司,批號(hào)MUST-13010313,純度為98.66%;Aβ酶聯(lián)免疫試劑盒(批號(hào)20140401),南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

    2 方法

    2.1 分組

    AD小鼠共18只,隨機(jī)分為3組,其中模型組6只、治療組6只、DAU組6只;另設(shè)定對(duì)照組6只。

    2.2 給藥

    實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)照組小鼠6只給予生理鹽水灌胃;模型組6只給予生理鹽水灌胃;治療組6只給予吡拉西坦(0.62gokg-1·d-1)灌胃;DAU組6只給予DAU(20mgokg-1·d-1)灌胃,灌胃時(shí)間為2周。

    2.3 Aβ檢測(cè)

    小鼠斷頭、取海馬組織、勻漿、靜置、離心、分裝、-20℃低溫保存?zhèn)溆?。按Aβ酶聯(lián)免疫試劑盒說明書操作進(jìn)行,450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔OD值,記錄并且分析數(shù)據(jù)。

    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    實(shí)驗(yàn)采用SPSS19.0軟件分析處理,單因素方差分析實(shí)驗(yàn)的原始數(shù)據(jù)。

    3 結(jié)果

    3.1 動(dòng)物海馬組織Aβ的檢測(cè)

    DAU對(duì)AD小鼠海馬Aβ影響的結(jié)果采用x±s表示,單位pg/ml。實(shí)驗(yàn)中與對(duì)照組(260.6825±40.3829)比較的過程中,模型組小鼠海馬組織Aβ的含量(410.0873±36.4436)較高(P<0.05),說明模型建立成功,模型穩(wěn)定;經(jīng)過治療后與模型組比較,治療組(280.7222±44.0904)、DAU組(310.6429±29.8401)小鼠海馬組織Aβ的含量較低(P<0.05),說明DAU對(duì)AD小鼠的AD癥狀顯著改善,提示DAU對(duì)AD的治療效果較好;治療組(280.7222±44.0904)與DAU組(310.6429±29.8401)比較,小鼠海馬組織Aβ的含量相當(dāng)(P>0.05),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明西藥吡拉西坦與中藥的提純成分DAU二者比較無顯著差異。

    4 討論

    AD是一種進(jìn)行性腦組織功能減退的、腦組織迅速老化的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,表現(xiàn)為患者記憶力的下降,認(rèn)知能力的下降,在老年人的人群中高發(fā),其主要的病理改變?cè)谀X組織老年斑的沉積,在老年斑中的核心成分主要是Aβ的沉積、神經(jīng)元數(shù)量的減少、神經(jīng)原纖維纏結(jié)進(jìn)而形成老年斑[5]。人的年齡在不斷增長(zhǎng),老化大腦出現(xiàn)神經(jīng)元數(shù)目減少的區(qū)域主要集中在海馬、皮質(zhì)等區(qū)域[6]。

    實(shí)驗(yàn)主要對(duì)AD密切相關(guān)的因子、AD發(fā)病中心環(huán)節(jié)、老年斑的核心成分Aβ進(jìn)行了檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)中與對(duì)照組比較的過程中,模型組小鼠海馬組織Aβ的含量(410.0873±36.4436)較高(P<0.05),說明模型建立成功,模型穩(wěn)定;經(jīng)過治療后與模型組比較,治療組、DAU組小鼠海馬組織Aβ的含量較低(P<0.05),說明DAU對(duì)改善AD小鼠的AD癥狀顯著,提示DAU對(duì)AD治療效果較好;治療組與DAU組比較,小鼠海馬組織Aβ的含量相當(dāng)(P>0.05),說明西藥吡拉西坦與中藥的提純成分DAU二者比較無顯著差異。

    綜上所述,DAU可以降低Aβ的水平,減輕AD患者的臨床癥狀,從而保護(hù)AD小鼠的海馬組織結(jié)構(gòu),延緩機(jī)體的老化,延長(zhǎng)人們的壽命。

    參考文獻(xiàn)

    [1]何麗婭,李立中,吳基良.蝙蝠葛堿的抗氧化實(shí)驗(yàn)研究[J].中草藥,1997,28(8):479-481.

    [2]李艷紅,黃向江,盧浩浩.蝙蝠葛堿對(duì)大鼠局灶性腦缺血及線粒體氧化損傷的保護(hù)作用[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2005,34(3):270-273.

    [3]李艷紅,龔培力.蝙蝠葛堿對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠腦缺血的保護(hù)作用[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2004,20(5):564-567.

    [4]Wu Y L,Xin X J,Xin X L,et al.Research progress about the regulation of GXXXG structures in the Alzheimer-related protein[J].Chin Pharmacol Bull,2011,27(1):1-4.

    [5]Mohandas E,Rajmohan V,Raghunath B.Neurobiology of Alzheimer's disease[J].Indian Journal of Psychiatry.2009,51(1):55-61.

    [6]Rossi L,Mazzitelli S,Arciello M,et al.Benefits from dietary polyphenols for brain aging and Alzheimer's disease[J].Neurochem Res,2008,33(12):2390-2400.

    作者簡(jiǎn)介:費(fèi)洪新(1978-),男,黑龍江佳木斯人,在讀博士,講師,從事癡呆、痛風(fēng)、腫瘤研究。

    通訊作者:周忠光(1957-),男,黑龍江哈爾濱人,博士,教授,博導(dǎo),從事癡呆、痛風(fēng)、腫瘤研究。

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