樺褐孔菌多糖對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型血清IL-6、IL-10的調(diào)節(jié)作用

李 越，郝秀春，甘鳳麗，趙洪艷，王 利，單志芹

(1黑龍江雞西礦業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院 檢驗科，黑龍江雞西158100)

樺褐孔菌多糖對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型血清IL-6、IL-10的調(diào)節(jié)作用

李 越，郝秀春，甘鳳麗，趙洪艷，王 利，單志芹

(1黑龍江雞西礦業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院 檢驗科，黑龍江雞西158100)

目的：觀察樺褐孔菌多糖對2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型血清IL-6、IL-10的調(diào)節(jié)作用。方法：TNBS灌腸制備潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型，造模成功后用樺褐孔菌多糖灌胃治療，14天后測大鼠血清內(nèi)IL-6、IL-10的水平。結(jié)果：與模型組相比，IL-6含量明顯降低(P<0.05)；IL-10含量明顯升高(P<0.05)。結(jié)論：樺褐孔菌多糖可通過調(diào)節(jié)血清中細(xì)胞因子IL-6和IL-10在體內(nèi)的水平，通過提高潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型的免疫功能而達(dá)到治療的作用。

潰瘍性結(jié)腸炎；樺褐孔菌；IL-6；IL-10

潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis，UC)是一類病因未完全闡明的慢性非特異性炎癥，主要侵犯結(jié)腸粘膜的腸道炎性疾病，臨床上以粘液血便、腹痛、腹瀉、里急后重為主要癥狀。目前對于UC的病因主要認(rèn)為是感染、免疫學(xué)因素及遺傳等因素綜合作用的結(jié)果，其并發(fā)癥較多也比較兇險，預(yù)后視病情及年齡因素也各不相同。對于其抗感染治療的

效果不很理想，因此利用一些藥物直接針對炎癥因子提高免疫力達(dá)到治療目的也變得尤為重要。樺褐孔菌(Inonotus obliquus)是一種應(yīng)用廣泛的藥用真菌，主要寄生在白樺樹、銀樺、赤楊等的樹干或樹皮下。研究發(fā)現(xiàn)樺褐孔菌具有抗腫瘤活性、降血糖、調(diào)節(jié)免疫活性及降血脂、抗氧化等多種生物活性，因此具有廣闊的藥用前景。

1 材料與方法

1.1 動物來源及分組：

Wista大鼠60只，體重160-180g，雌雄各半，由佳木斯大學(xué)動物中心提供。隨機(jī)抽取40只制備模型，其余20只作為正常對照。

1.2 藥物與試劑：

1.2.1 藥物 2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)：Sigma公司；樺褐孔菌多糖： 由佳木斯大學(xué)藥學(xué)院提供；5-氨基水楊酸：安徽聯(lián)誼藥業(yè)股份有限公司。

1.2.2 試劑 IL-6、IL-10：上海滬洋生物。

1.3 方法：

1.3.1 潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型制備

40只大鼠麻醉后灌腸，灌腸深度約入直腸8cm處，灌入TNBS原液100mL/kg和50%乙醇0.25mL，另20只大鼠同體位，等量的生理鹽水灌腸做陰性對照。造模14d后，取10只模型和10只陰性對照大鼠猝死，取回盲部做病理驗證模型成功。造模成功后將剩余30只模型組大鼠隨機(jī)分成陰性對照組、陽性對照組(即5-氨基水楊酸治療組)、樺褐孔菌治療組，每組10只；另10只陰性對照大鼠做正常對照組。

1.3.2 樺褐孔菌治療及指標(biāo)檢測

陽性對照組5-氨基水楊酸2mL/次灌胃，2次/日；樺褐孔菌組樺褐孔菌2mL灌胃治療，2次/日；陰性對照組生理鹽水2mL/次灌胃，2次/日；正常對照組生理鹽水2mL灌胃治療，2次/日。治療14d后，大鼠內(nèi)眥靜脈采血，血清學(xué)檢測細(xì)胞因子IL-6、IL-10。

1.3.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

細(xì)胞因子IL-6 和 IL-10水平變化： 陰性對照組IL-6 含量明顯高于正常對照組、樺褐孔菌組、正常對照組(P<0.05)；陰性對照組IL-10含量明顯低于正常對照組、樺褐孔菌組、陽性對照組(P<0.05)。 見表1

表1 樺褐孔菌對大鼠血清IL-6及IL-10的影響(pg/mL )

注：*與正常對照組相比P<0.05，**與陰性對照組相比P<0.05

3 討論

IL-6是由單核巨細(xì)胞產(chǎn)生的具有多種免疫學(xué)活性的細(xì)胞因子，是參與UC的重要的炎癥介質(zhì)，UC患者血清中IL-6水平明顯，且其增高水平與病變范圍和嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。本實驗中，模型組大鼠血清IL-6的含量明顯升高，與報道一致。經(jīng)樺褐孔菌治療后，大鼠血清中IL-6的含量明顯降低，能夠證明樺褐孔菌能降低IL-6在血清中的含量，減輕IL-6對腸粘膜的損傷作用，使大鼠粘液血便的癥狀減輕。IL-10是具有抗炎性和提高免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子，IL-10可通過抑制嗜酸粒細(xì)胞表達(dá)而達(dá)到抗過敏作用，也可通過抑制某些集落因子的合成達(dá)到抗炎的作用。在UC大鼠的血清中，IL-10的含量明顯降低，其抗炎、免疫的保護(hù)作用減弱。經(jīng)樺褐孔菌治療后，其含量顯著升高，表明樺褐孔菌能有效的提高IL-10的含量，IL-10水平升高使其對腸粘膜保護(hù)作用增強(qiáng)，因而減輕了毒素等其他有害物質(zhì)對腸粘膜的損害，使得癥狀好轉(zhuǎn)。實驗說明樺褐孔菌能夠通過改變細(xì)胞因子的水平而調(diào)節(jié)其間的失衡狀態(tài)而達(dá)到治療作用。

[1]陳義勇，顧小紅，湯堅.樺褐孔菌多糖的抗腫瘤活性研究。食品與生物技術(shù)學(xué)報[J],2011，30(1):65-69.

[2] Jarosz A,Skorska M,Rzymow ska,etal. Effect of the extracts from fungus Inonotus obliquus on catalase level in Hela and Nocardia cells[J].Acta Biochem Polon,1990,37(1):149-152.

[3]Mizuno T,Zhuang C,Abe K,etal.Antiumor and hypo-glycemic activities of polysaccharides from the scleritia and mycelia of Inonotus obliquus[J]. Int J Med Mushrooms,1999,1(4):301-316.

[4] Babitskaia VG,Shcherba VV, Iknonikova NV, Melanin complex of the fungus Inontus [J]. PriklBiokhim Microbiol, 2000,36(4):439.

[5]王佐，吳正祥，楊九華，楊楓，吳強(qiáng).IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β1和Foxp3在實驗性結(jié)腸炎中的表達(dá)。胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志[J]，2010，19(2)：141-144.

[6]彭洪，林中超，王程 ，楊祖奎.IL-4和IL-6在潰瘍性直腸炎中的表達(dá)及其意義。西部醫(yī)學(xué)[J]，2012，22(12)：2271-2273.

2013-11-11

R574.1

B

1002-2376(2014)04-0038-02