劉敏潔,魏玉平,駱志成,張曉暉
(蘭州大學第二醫(yī)院皮膚科,蘭州 730030)
關于陰道內念珠菌(Candidaspp)的分布情況,各地的報導不完全一致。本文分別對蘭州地區(qū)漢族婦女和甘南地區(qū)藏族婦女進行調查,對其陰道內念珠菌的分布概況及地區(qū)差異性進行了解,旨在建立兩地區(qū)的婦女陰道微生態(tài)狀況資料和為今后研究外陰陰道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)的治療提供理論依據。
1.1 對象來源 蘭州地區(qū)漢族資料來自蘭州大學第一醫(yī)院、第二醫(yī)院、甘肅省人民醫(yī)院、蘭州軍區(qū)總醫(yī)院健康體檢中心、婦產科及皮膚性病科門診患者及健康體檢門診漢族婦女13 016人接受檢查,年齡為25~68歲;甘南地區(qū)藏族資料分別來自甘南藏區(qū)夏河縣馬當鄉(xiāng)、尕里昂鄉(xiāng)及瑪曲縣、卓尼縣、臨談縣的23 612人藏族婦女接受檢查,年齡在24~78歲之間。采集陰道分泌物,經過毛懸滴實驗、查找線索細胞、支原體培養(yǎng)、Clearview Chlamydia衣原體快速檢測法將可能提示為或合并細菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎、支原體或衣原體性陰道炎者剔除。
1.2 各標準菌株來源 ATCC 11006(白念珠菌)、ATCC 22019(近平滑念珠菌)、ATCC 6258(克柔念珠菌)由北京大學醫(yī)學部真菌保藏中心李若瑜教授饋贈。
1.3 方法 采用一次性無菌陰道棉拭子取陰道后穹處的分泌物,直接鏡檢陽性者接種于沙氏葡萄糖瓊脂斜面試管2管(以提高培養(yǎng)的陽性率),置27℃-35℃恒溫培養(yǎng)箱內培養(yǎng)72 h,經分離培養(yǎng)后菌落呈白色或乳白色,隆起柔軟,表面光滑有特殊的發(fā)酵臭味者為陽性菌落。再分別采用芽管試驗、厚壁孢子實驗、API 20 CAUX試驗條將陽性菌落的念珠菌鑒定到種。
1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS統(tǒng)計軟件13.0對所得數據進行分析,兩組間念珠菌檢出率的比較采用χ2檢驗。P<0.05或P<0.01為差異有統(tǒng)計學意義。
2.1 蘭州地區(qū)漢族婦女陰道內念珠菌的分布狀況 13 016受檢者中共檢出1 006株念珠菌陽性標本(7.72%),其分布見表1。
表1 蘭州地區(qū)漢族婦女陰道內念珠菌的分布
2.2 甘南地區(qū)藏族婦女陰道內念珠菌的分布情況 23 612受檢者中共檢出1 080株念珠菌陽性標本(4.57%),其分布見表2。甘南地區(qū)藏族婦女陰道內念珠菌的檢出率與蘭州地區(qū)漢族婦女的檢出率比較,差異有統(tǒng)計學意義(t=5.322,P<0.001)。
表2 甘南藏族婦女陰道內念珠菌的分布狀況
念珠菌廣泛分布于自然界,致病菌種有內源性和外源性兩種。正常人體的皮膚、口腔、陰道、黏膜、消化道或其它臟器中存在但不致病,是人類的正常菌群之一。近年來,隨著抗真菌藥物的廣泛使用,引起VVC的菌種和菌株均發(fā)生了變化。盡管在VVC患者中由念珠菌屬中的白念珠菌引起的感染仍占絕大多數,但是非白念珠菌如光滑念珠菌(C.glabrata)、克柔念珠菌(C.krusei)、熱帶念珠菌(C.tropicalis)、近平滑念珠菌(C.parapsilosis)等在VVC中也占相當的比例,尤其是在復發(fā)性外陰陰道念珠菌病(RVVC)患者中發(fā)生率可高達20%~30%[1]。在國外,外陰陰道念珠菌病的致病菌種有許多報道。Corsello等[2]對909例培養(yǎng)陽性的VVC進行研究,白念珠菌病占77.1%,非白念珠菌占22.9%,其中光滑念珠菌占14.6%,克柔念珠菌占4.0%,熱帶念珠菌占2.3%,近平滑念珠菌占0.6%,偽熱帶念珠菌占0.2%,其它占1.2%。在這項多中心、大樣本的研究中白念珠菌的分離率比以往的分離率有所下降,非白念珠菌病呈逐年上升的趨勢。Spinillo等[3]回顧1988-1995年VVC患者的病原菌,結果顯示,非白念珠菌所占比例由1988年的9.9%上升到1995年的17.2%,在非白念珠菌中以光滑念珠菌所占比例最高。另外,Holland等[4]對VVC患者的129株非白念珠菌進行研究,發(fā)現非白念珠菌引起的VVC比白念珠菌引起的VVC更易發(fā)展為RVVC,也更易對抗真菌藥物產生耐藥。Trama等[5]對美國六大州地區(qū)的3 987例婦女的陰道分泌物進行檢測,1 316例為念珠菌陽性,其中白念珠菌占80.2%,光滑念珠菌占14.3%,近平滑念珠菌占5.9%,熱帶念珠菌占8.0%。同時研究表明光滑念珠菌的檢出率在不同地區(qū)存在一定的差異。Paulitsch等[6]在2000-2004年期間對奧地利格拉茨地區(qū)的10 463例VVC患者進行調查,共分離出3 184株念珠菌,其中優(yōu)勢菌為白念珠菌占87.9%,非白念珠菌占12.1%,主要為光滑念珠菌和乳酒念珠菌。Richter等[7]對84例RVVC患者陰道分泌物的培養(yǎng)結果顯示,非白念珠菌高達42%,而同期收集的VVC患者中該比率為20%。由于非白念珠菌對常用的唑類抗真菌藥物敏感性較差,從而為治療增加了難度[8]。另外對光滑念珠菌的研究表明它與RVVC的發(fā)生密切相關,主要表現在由它引起的VVC比白念珠菌引起的更易發(fā)展為RVVC,也更易對抗真菌藥耐藥。在國內報道中,支和平等[9]從419份陰道分泌物標本中共分離出192株念珠菌,其中白念珠菌134株(70%),光滑念珠菌36株(19%),近平滑念珠菌10株(5%),克柔念珠菌8株(4%),熱帶念珠菌4株(2%)。應當注意的是光滑念珠菌的臨床檢出率較高。
我們的研究發(fā)現,藏族婦女的各念珠菌檢出率均顯著低于漢族婦女,而且其非白念珠菌菌株亦明顯低于漢族婦女,在蘭州地區(qū)漢族及甘南藏區(qū)藏族婦女陰道內的念珠菌檢查中發(fā)現,兩民族造成外陰陰道念珠菌病的主要致病性念珠菌主要為白念珠菌,這與國內外的報道一致。在非白念珠菌中,也以光滑念珠菌、熱帶念珠菌及近平滑念珠菌為主,但是兩民族的非白念珠菌的比例有所不同。這些數據與國內外的報道不盡相同,這也許與地區(qū)差異有一定的關系。蘭州地區(qū)與甘南藏區(qū)均為我國甘肅省境內,氣候環(huán)境相差不大,因而在這兩地區(qū)婦女陰道內的優(yōu)勢乳酸桿菌具有一定的相同性。但是它們的檢出率卻有顯著性差異,究其原因,或許與兩地區(qū)的人口生活習慣有關。在我們的研究中,對每一位接受檢查的婦女均仔細詢問她們的生活習慣,結果發(fā)現,在甘南藏區(qū),按照藏族的傳統(tǒng)習俗,極少進行沐浴,這就是說,她們很少進行陰道盥洗,這對于念珠菌的檢出率是一個至關重要的因素[10]。經常性的盥洗會破壞陰道黏膜,從而使得念珠菌容易黏附于陰道黏膜;再者,在詢問病史的過程中發(fā)現藏族婦女極少使用抗生素,這也是一個很重要的因素。陰道黏膜具有一定的屏障功能,經常性地使用抗生素也會導致陰道內的菌群失衡,從而為念珠菌的感染創(chuàng)造了條件。
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