金櫻子通過增加Bcl-2/Bax表達(dá)比抑制大鼠糖尿病性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞的凋亡△

周俊 何湘珍 肖啟國

金櫻子通過增加Bcl-2/Bax表達(dá)比抑制大鼠糖尿病性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞的凋亡△

周俊 何湘珍 肖啟國

金櫻子；糖尿病性白內(nèi)障；凋亡；Bcl-2蛋白；Bax蛋白

目的探討金櫻子對糖尿病性白內(nèi)障大鼠晶狀體上皮細(xì)胞(lens epithelial cells,LEC)凋亡的影響及機(jī)制。方法將60只SD大鼠隨機(jī)分為對照組、模型組和治療組，每組各20只。對照組常規(guī)飼料喂養(yǎng)，采用鏈脲佐菌素(60 mg·kg-1)誘發(fā)建立糖尿病性白內(nèi)障模型，治療組在糖尿病性白內(nèi)障建立的同時(shí)按400 mg·kg-1體質(zhì)量給予金櫻子灌胃。STZ注射后4周、8周、12周時(shí)觀察晶狀體混濁度的變化情況,同時(shí)采用TUNEL檢測LEC凋亡，免疫組織化學(xué)染色檢測LEC Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)，RT-PCR檢測Bcl-2、Bax基因的表達(dá)。結(jié)果STZ注射后12周時(shí)，模型組、治療組和對照組大鼠體質(zhì)量分別為(151.90±2.38)g、(412.99±2.17)g和(464.01±2.47)g，模型組明顯低于治療組和對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。STZ注射后4周時(shí)，治療組、對照組、模型組血糖分別為(9.11±2.32)mmol·L-1、(3.83±0.79)mmol·L-1、(20.31±3.23)mmol·L-1，對照組與模型組、治療組與模型組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05);12周時(shí)，治療組和對照組血糖分別為(5.62±1.25)mmol·L-1、(4.12±1.09)mmol·L-1，較模型組(25.02±2.27)mmol·L-1明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。在STZ注射后4周、8周、12周時(shí)，治療組大鼠晶狀體混濁程度均高于對照組，但明顯低于模型組，組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。STZ注射后4周、8周、12周時(shí)，模型組LEC凋亡率分別為(8.35±1.20)%、(13.05±1.39)%、(23.69±1.88)%，而治療組分別為(4.78±1.41)%、(6.08±0.95)%、(10.06±1.66)%，對照組分別為(1.18±0.16)%、(2.15±0.25)%、(3.53±0.65)%,組間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。與對照組比較，模型組LEC的Bcl-2蛋白和基因表達(dá)降低，Bax蛋白和基因表達(dá)上調(diào)，Bcl-2/Bax mRNA比值下降,兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。與模型組比較，治療組LEC的Bcl-2蛋白和基因表達(dá)增加，Bax蛋白和基因表達(dá)下調(diào)，Bcl-2/Bax mRNA比值明顯增加，兩組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。與對照組比較，治療組Bcl-2蛋白表達(dá)降低，Bax蛋白表達(dá)升高(P<0.05);而Bcl-2基因、Bax基因、Bcl-2/Bax mRNA比值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05)。結(jié)論金櫻子通過增加Bcl-2/Bax表達(dá)比抑制大鼠糖尿病性白內(nèi)障LEC的凋亡，延緩糖尿病性白內(nèi)障的發(fā)生和發(fā)展。

[眼科新進(jìn)展，2014，34(4)：314-318]

糖尿病性白內(nèi)障是糖尿病患者常見的并發(fā)癥之一，也是常見的致盲原因之一[1]。在白內(nèi)障的發(fā)生和發(fā)展過程中晶狀體上皮細(xì)胞(lens epithelial cells,LEC)凋亡的程度至關(guān)重要。金櫻子又名刺榆子、山雞頭子等，是雙子葉常綠攀緣植物，屬薔薇科，在我國分布廣泛，產(chǎn)量高。有研究顯示金櫻子能明顯清除超氧陰離子自由基、羥自由基，抑制凋亡，能防止脂質(zhì)過氧化，調(diào)節(jié)血糖及血脂，具有明顯的抗氧化活性和抗炎作用[2]。本研究擬初步探討金櫻子對大鼠糖尿病性白內(nèi)障LEC凋亡的影響及其機(jī)制，為防治糖尿病性白內(nèi)障尋找新的方法。

1 材料和方法

1.1材料與分組SD大鼠購自南華大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物部，經(jīng)散瞳實(shí)驗(yàn)檢查顯示晶狀體正常、透明，大鼠體質(zhì)量(250±5)g。將60只SD大鼠隨機(jī)分為對照組、模型組和治療組，每組各20只。金櫻子購自衡陽市中草藥材公司；鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)購自美國Sigma公司；TUNEL檢測試劑盒、Bcl-2和Bax抗體購自武漢博士德生物工程公司；其余試劑購自上海生物工程有限公司。采用Primer 5.0軟件設(shè)計(jì)引物,由上海生工生物工程有限公司合成。

1.2方法

1.2.1糖尿病大鼠白內(nèi)障模型的建立及金櫻子處理對照組常規(guī)飼料喂養(yǎng)；模型組采用一次性腹腔注射STZ(60 mg·kg-1)誘發(fā)建立糖尿病性白內(nèi)障模型，72 h后尾靜脈取血，當(dāng)空腹血糖>14 mmol·L-1表示糖尿病模型建立成功；治療組在糖尿病性白內(nèi)障模型建立的同時(shí)按400 mg·kg-1體質(zhì)量給予金櫻子灌胃。觀察大鼠的一般情況并稱體質(zhì)量，記錄并調(diào)整金櫻子藥物用量。分別于STZ注射后于4周、8周時(shí)各組隨機(jī)處死5只大鼠，共30只；12周時(shí)處死剩余30只大鼠。采用戊巴比妥鈉麻醉處死，取晶狀體用于后述研究。

1.2.2晶狀體混濁度的檢測10 g·L-1托品酰胺滴眼液滴大鼠雙眼一次，5 min后大鼠吸入乙醚蒸氣麻醉。4周、8周、12周時(shí)用TOPCON SL-2G裂隙燈顯微鏡觀察晶狀體變化并拍照，晶狀體混濁程度按照文獻(xiàn)[4]的標(biāo)準(zhǔn)分為5級：Ⅰ級：無混濁，晶狀體透明；Ⅱ級：輕度混濁，晶狀體周邊出現(xiàn)空泡；Ⅲ級：中度混濁，晶狀體周邊空泡向中心擴(kuò)展，核出現(xiàn)霧狀混濁；Ⅳ級：高度混濁，晶狀體周邊空泡擴(kuò)展到核區(qū)，核霧狀混濁加重；Ⅴ級：核混濁，白內(nèi)障成熟。

1.2.3TUNEL檢測細(xì)胞凋亡金櫻子處理12周后，將各組動物晶狀體常規(guī)取出，立即用體積分?jǐn)?shù)10%中性甲醛液固定，制成石蠟切片(0.4 μm厚)，然后按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。每個(gè)晶狀體標(biāo)本選3張切片，Olympus BH-2型顯微鏡觀察，統(tǒng)計(jì)凋亡細(xì)胞率。凋亡陽性細(xì)胞的細(xì)胞核呈棕黃色、棕褐色。

1.2.4免疫組織化學(xué)染色檢測Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)將石蠟切片常規(guī)脫蠟、水化后， 體積分?jǐn)?shù)30% H2O2和蒸餾水110混合，室溫下孵育10 min，用蒸餾水沖洗3次，每次5 min；切片浸入0.01 mmol·L-1枸櫞酸鹽緩沖液進(jìn)行抗原修復(fù)，加熱致沸騰5～10 min，冷卻后PBS沖洗3次，每次3 min；每張切片加1滴50 g·L-1BSA封閉液，室溫下孵育20 min，甩去多余液體；滴加一抗，4 ℃過夜，PBS洗3次，每次5 min；再滴加二抗，37 ℃孵育20 min，PBS洗3次，每次5 min；滴加試劑SABC,37 ℃孵育20 min，PBS洗4次，每次5 min；用新鮮配制的DAB顯色液顯色，顯微鏡下觀察2～5 min；自來水沖洗，蘇木素淺染，自來水沖洗返藍(lán)，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。采用圖像分析系統(tǒng)(Leica ICM-100圖像分析儀)分析Bcl-2和Bax蛋白的相對含量。

1.2.5RT-PCR檢測Bcl-2和Bax基因的表達(dá)用Trizol試劑提取晶狀體RNA，并逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。反應(yīng)體系：10×Tag緩沖液2.50 μL,25.0 mmol·L-1MgCl21.50 μL，2.5 mmol·L-1dNTP 2.00 μL、上下游引物各1 μL(引物序列為：Bcl-2：S：CCGGGAGAACAGGGTATGA，AS：CCTACCCAGCCTCCGTTAT；Bax:S: AGATGAACTGGACAGCAATATG，AS: CACCCCTCCCAATAATTACA；β-actin:S: ACCGTGGAGAAGAGCTACGA，AS: GTACTTGCGCTCAGAAGGAG),cDNA模板2.00 μL,重蒸水14.75 μL，Tag酶0.25 μL。94 ℃預(yù)變性3 min后，進(jìn)入31個(gè)循環(huán):96 ℃ 50 s,55 ℃ 50 s,70 ℃ 50 s，最后72 ℃延伸10 min。取10.00 μL進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳與灰度掃描分析。

2 結(jié)果

2.1糖尿病大鼠的一般情況模型組和治療組大鼠自STZ注射后7 d飲水、進(jìn)食、尿量明顯增加。對照組大鼠隨時(shí)間延長體質(zhì)量增長迅速，模型組大鼠體質(zhì)量增長較快，而治療組大鼠體質(zhì)量緩慢增長。4周時(shí)模型組大鼠一般狀況變差，體質(zhì)量下降，毛發(fā)失去光澤、脫毛，中后期逐漸出現(xiàn)糖尿病癥狀和并發(fā)癥(如消瘦和多發(fā)感染)，而治療組體質(zhì)量明顯較模型組增加，一般狀況明顯較模型組好；對照組情況良好。STZ注射12周時(shí)模型組、治療組、對照組大鼠體質(zhì)量分別為(151.90±2.38)g、(412.99±2.17)g、(464.01±2.47)g，模型組明顯低于治療組和對照組(均為P<0.05)，對照組與治療組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2各組大鼠的血糖值檢測注射STZ前大鼠(40只)空腹血糖為(3.86±0.35)mmol·L-1，用STZ誘發(fā)后3 d，40只大鼠空腹血糖為(15.22±1.21)mmol·L-1，均為造模成功(空腹血糖>14 mmol·L-1)。STZ注射后4周，對照組、模型組、治療組大鼠血糖分別為(3.83±0.79)mmol·L-1、(20.31±3.23)mmol·L-1、(9.11±2.32)mmol·L-1，組間兩兩比較比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。至12周時(shí)，模型組、治療組、對照組血糖分別為(25.02±2.27)mmol·L-1、(5.62±1.25)mmol·L-1、(4.12±1.09)mmol·L-1，治療組血糖較模型組明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對照組與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而對照組與治療組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.3晶狀體混濁的程度三組大鼠晶狀體混濁程度見表1。模型組、治療組均于STZ注射后4周晶狀體出現(xiàn)不同程度的混濁(P<0.05)，并隨著時(shí)間的推移，晶狀體混濁程度不斷加重。至8周時(shí)，治療組的晶狀體混濁程度較模型組輕。至12周時(shí)，模型組的晶狀體全部出現(xiàn)了不同程度的混濁，已無1例Ⅰ級透明的晶狀體，而治療組的晶狀體混濁發(fā)展程度明顯減慢。4周、8周、12周對照組的晶狀體至始至終無1例發(fā)生混濁。各時(shí)間點(diǎn)治療組的晶狀體混濁度均低于模型組，三組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。

2.4各組大鼠細(xì)胞凋亡率三組大鼠LEC凋亡情況見表2。各時(shí)間點(diǎn)對照組大鼠LEC幾乎無凋亡，模型組LEC凋亡率明顯高于對照組，治療組LEC凋亡率明顯低于模型組，治療組LEC凋亡率雖然明顯降低，但仍高于對照組；各時(shí)間點(diǎn)組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P<0.05)。

表1 各時(shí)間點(diǎn)三組大鼠晶狀體混濁程度Table 1 Lens opacity degree among three groups at different time points(rats)

表2 各組大鼠LEC的凋亡率Table 2 Apoptotic ratio of LEC in each group(rate/%)

2.5Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)情況三組大鼠Bcl-2蛋白、Bax蛋白表達(dá)情況見表3-表4。正常大鼠LEC均有一定量Bcl-2、Bax的表達(dá)，胞漿內(nèi)棕黃色顆粒沉淀，胞核均呈陰性染色。STZ注射4周、8周、12周時(shí)模型組Bcl-2蛋白陽性表達(dá)均較對照組下降(均為P<0.05)，同一時(shí)間點(diǎn)模型組Bax蛋白陽性表達(dá)均增強(qiáng)(均為P<0.05)。4周、8周、12周時(shí)治療組Bcl-2蛋白陽性表達(dá)均高于模型組(均為P<0.05)，同一時(shí)間點(diǎn)Bax蛋白陽性表達(dá)均低于模型組(均為P<0.05)。4周、8周、12周時(shí)治療組Bcl-2蛋白的表達(dá)均低于對照組(均為P<0.05)，而同一時(shí)間點(diǎn)治療組Bax蛋白的表達(dá)均高于對照組(均為P<0.05)。

表3 各組大鼠LEC中Bcl-2蛋白表達(dá)Table 3 Expressions of Bcl-2 protein in LEC of each group(±s,n=20)

表4 各組大鼠LEC中Bax蛋白表達(dá)Table 4 Expression of Bax protein in LEC of each group(±s,n=20)

2.6Bcl-2與Bax基因表達(dá)情況三組大鼠Bcl-2、Bax基因表達(dá)情況見表5。正常大鼠LEC Bcl-2和Bax基因均有表達(dá)。模型組Bcl-2 mRNA的相對表達(dá)量明顯低于對照組(P<0.05)，Bax mRNA的相對表達(dá)量明顯高于對照組(P<0.05),Bcl-2/Bax mRNA比值減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療組Bcl-2 mRNA的相對表達(dá)量明顯高于模型組(P<0.05)，Bax mRNA的相對表達(dá)量明顯低于模型組(P<0.05)，Bcl-2/Bax mRNA比值增大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療組Bcl-2 mRNA的相對表達(dá)量和Bax mRNA的相對表達(dá)量均略低于對照組，但Bcl-2/Bax mRNA比值略增大，兩組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05)。

表5 各組大鼠LEC中Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表達(dá)Table 5 Expression of Bcl-2 and Bax mRNA in LEC of each group(±s,n=20)

3 討論

隨著我國人民生活水平的提高和受不健康的生活方式的影響，糖尿病已成為影響我國國民健康的常見疾病[3]。糖尿病性白內(nèi)障的特點(diǎn)是皮質(zhì)和后囊膜下混濁，進(jìn)展較快，常常雙眼同時(shí)發(fā)病，是糖尿病患者致盲的一個(gè)重要原因。LEC凋亡是除先天性白內(nèi)障以外的所有類型白內(nèi)障形成的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。

已有研究證實(shí)[4]，當(dāng)血糖值超過10 mmol·L-1時(shí)，糖基化反應(yīng)速率與白內(nèi)障晶狀體混濁呈指數(shù)級增加，糖尿病性白內(nèi)障中糖基化終產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)累積使晶狀體混濁，顏色加深。LEC是晶狀體代謝最活躍的部位，它能分裂、增殖于赤道部，產(chǎn)生晶狀體纖維并維持整個(gè)晶狀體的代謝，在保持晶狀體的透明性上起重要作用，而在晶狀體混濁前均有LEC凋亡，因此LEC凋亡是除先天性白內(nèi)障以外的所有類型白內(nèi)障形成的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)[5]。LEC是糖尿病性白內(nèi)障最早受累的位點(diǎn)，高糖產(chǎn)生的高氧化、高滲透壓等損害因子能以LEC為攻擊目標(biāo)，誘導(dǎo)它發(fā)生凋亡而喪失功能，并由此產(chǎn)生級聯(lián)反應(yīng)，破壞晶狀體的穩(wěn)定，如鈣離子滲入、半胱氨酸酶激活、細(xì)胞骨架降解、晶狀體蛋白變性聚集、水和電解質(zhì)進(jìn)入等，最終導(dǎo)致晶狀體混濁[6]。在糖尿病性白內(nèi)障中LEC能自主地發(fā)現(xiàn)凋亡并進(jìn)行調(diào)整從而阻止過度凋亡，在高血糖這種外源性病理因素的刺激下，LEC凋亡和增殖的平衡關(guān)系被打破而導(dǎo)致LEC凋亡，晶狀體內(nèi)環(huán)境代謝失衡，最終導(dǎo)致白內(nèi)障發(fā)生[7]。而高血糖及并發(fā)的細(xì)胞高滲狀態(tài)可改變Bcl-2、Bax等凋亡調(diào)控基因的表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生[8]。我們在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，模型組晶狀體混濁程度均明顯高于對照組，而治療組則明顯輕于模型組(表1)。同時(shí)模型組LEC凋亡率明顯高于對照組,而治療組的凋亡率較模型組低，且發(fā)生時(shí)間晚。再次證實(shí)糖尿病性白內(nèi)障隨著晶狀體混濁程度逐漸加重，LEC凋亡的程度亦加重，而經(jīng)過金櫻子處理后的大鼠，LEC凋亡水平明顯低于模型組，說明金櫻子能在一定程度上抑制或延緩凋亡的發(fā)生。

Bcl-2家族是最早研究的凋亡相關(guān)基因，其中Bcl-2具有抗凋亡作用，而Bax具有促凋亡作用。Bcl-2/Bax在凋亡通路上發(fā)揮重要作用，決定了凋亡調(diào)控的方向，是研究細(xì)胞凋亡關(guān)系的熱點(diǎn)基因[9]。它們主要通過線粒體途徑參與凋亡調(diào)控，當(dāng)細(xì)胞受到死亡信號刺激，與Bcl-2或Bcl-xl蛋白相結(jié)合的Bax蛋白就會被置換出來，線粒體膜通透性增加，釋放出一系列物質(zhì)，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。Bcl-2為抑制細(xì)胞凋亡的基因，通常以二聚體的形式在細(xì)胞凋亡中發(fā)揮作用。在細(xì)胞內(nèi)，Bcl-2和Bax可以分別形成同二聚體，也可以互相形成異二聚體。當(dāng)細(xì)胞接受某些刺激信號后，如果Bcl-2過表達(dá)，形成Bcl-2/Bax異二聚體增加，細(xì)胞免于凋亡；如果Bax過表達(dá)，形成Bax/Bax同二聚體增加，則促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生凋亡。有研究證實(shí)在大鼠糖尿病性白內(nèi)障中對LEC凋亡的抑制作用可能是通過改變Bcl-2/Bax的比值而實(shí)現(xiàn)的[10]。本研究結(jié)果顯示，模型組與對照組相比，Bcl-2蛋白和Bcl-2 mRNA降低，Bax蛋白和Bax mRNA升高，Bcl-2/Bax mRNA比值下降，表明Bcl-2和Bax表達(dá)水平的改變在糖尿病性白內(nèi)障LEC凋亡過程中發(fā)揮了重要的作用。治療組的Bcl-2 /Bax mRNA表達(dá)比值較模型組則明顯增高，結(jié)果提示金櫻子可能通過提高Bcl-2 /Bax表達(dá)比值而抑制LEC凋亡。

總之，金櫻子具有一定的抗LEC凋亡的能力，可能對大鼠糖尿病性白內(nèi)障有一定的延緩和治療作用，其作用機(jī)制可能是通過增強(qiáng)Bcl-2的表達(dá)、降低Bax的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的，但其全面的、具體的機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。

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date：Oct 21,2013

Scientific Research Foundation of Hunan Provincial Science and Technology Department (No: 2014SK3021)From theDepartmentofOphthalmology,theSecondAffiliatedHospitalofNanhuaUniversity,Hengyang421001,HunanProvince,China

Inhibitive effects of Rosa laevigata on LEC apoptosis of diabetic cataract rats by increasing Bcl-2/Bax expression ratio

ZHOU Jun, HE Xiang-Zhen, XIAO Qi-Guo

Rosa laevigata; diabetic cataract; apoptosis; Bcl-2 protein; Bax protein

Objective To investigate the effects of Rosa laevigata on lens epithelial cell (LEC)apoptosis of diabetic cataract rats and its mechanism.Methods Sixty rats were random1y divided into normal control group, diabetic model group and treatment group, 20 cases in each group. The rats in control group were routine bred, the diabetic cataract models were induced by streptozotocin (STZ, 60 mg·kg-1)in model group. Rosa laevigata treatment group established in diabetic cataract at the same time, according to 400 mg·kg-1body weight given gastric perfusion of Rosa laevigata. At 4 weeks, 8 weeks, 12 weeks after STZ injection, the changes of lens opacity were observed. TUNEL method was used to analyze the lens epithelial cells apoptosis, the expression of Bcl-2 and Bax were detected by immunohistochemical method, and the expression level of Bcl-2 and Bax mRNA were detected by RT-PCR.Results At 12 weeks, the body weight of model group, treatment group and control group were (151.90± 2.38)g, (412.99±2.17)g and (464.01±2.47)g, respectively, the model group was significantly lower than the treatment group and the control group (allP<0.05). At 4 weeks, the blood glucose in treatment group, control group and model group were (9.11±2.32)mmol·L-1, (3.83±0.79)mmol·L-1and (20.31±3.23)mmol·L-1, respectively, the differences between control group, treatment group and model group were statistically significant (allP<0.05). At 12 weeks, the blood glucose in treatment group, control group and model group were (5.62±1.25)mmol·L-1, (4.12±1.09)mmol·L-1and (25.02±2.27)mmol·L-1, respectively, the control group and treatment group were all lower than the model group (allP<0.05). At 4 weeks, 8 weeks, 12 weeks, the rats lens opacity degree in treatment group were all higher than those in the control group, but lower than those in the model group (allP<0.05). The apoptotic rate of LEC at 4 weeks, 8 weeks and 12 weeks in model group were (8.35±1.20)%，(13.05±1.39)% and (23.69±1.88)%, respectively, the treatment group were (4.78±1.41)%, (6.08±0.95)% and (10.06± 1.66)%, respectively, and the control group were (1.18±0.16)%, (2.15±0.25)% and (3.53± 0.65)%, respectively, the differences were statistically significant between each group (allP<0.05). Compared with the control group, the protein and mRNA expression of Bcl-2 in the model group reduced, the protein and mRNA expression of Bax up-regulated, Bcl-2/Bax ratio decreased (allP<0.05). Compared with the model group, the protein and mRNA expression of Bcl-2 in LEC of the treatment group increased, the protein and mRNA expression of Bax decreased, the ratio of Bcl-2/Bax increased obviously (allP<0.05). Compared with the control group, the protein expression of Bcl-2 in LEC of the treatment group reduced, the protein expression of Bax increased (allP<0.05), but there was no statistical difference in Bcl-2 mRNA expression, Bax mRNA expression and Bcl-2/Bax mRNA ratio between two groups (allP>0.05).Conclusion Rosa laevigata can inhibit the LEC apoptosis of diabetic cataract rats by increasing Bcl-2/Bax expression ratio, and delay the occurrence and development of diabetic cataract.

周俊，男，1979年5月出生，碩士，主治醫(yī)師。聯(lián)系電話：0734-8288053；E-mail：nhf2zhoujun@163.com

AboutZHOUJun:Male,born in May,1979.Master degree.Tel:+86-734-8288053; E-mail：nhf2zhoujun@163.com

2013-10-21

湖南省科技廳科研基金資助(編號：2014SK3021)

421001 湖南省衡陽市，南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科

周俊,何湘珍,肖啟國.金櫻子通過增加Bcl-2/Bax表達(dá)比抑制大鼠糖尿病性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞的凋亡[J].眼科新進(jìn)展,2014,34(4):314-318.

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10.13389/j.cnki.rao.2014.0085

修回日期：2013-12-20

本文編輯：付中靜

Accepteddate:Dec 20,2013

[RecAdvOphthalmol，2014，34(4):314-318]