GC-MS法分析茵陳揮發(fā)油成分*

劉俊山，鞏麗麗

(1.石家莊市第四醫(yī)院生殖中心，石家莊 050011； 2.山東中醫(yī)藥大學(xué)實驗中心，濟南 250355)

GC-MS法分析茵陳揮發(fā)油成分*

劉俊山1，鞏麗麗2

(1.石家莊市第四醫(yī)院生殖中心，石家莊 050011； 2.山東中醫(yī)藥大學(xué)實驗中心，濟南 250355)

采用水蒸氣蒸餾法提取茵陳中揮發(fā)性成分揮發(fā)油，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）對茵陳揮發(fā)油成分進(jìn)行分析鑒定，并采用峰面積歸一化法測定其相對含量。共檢出52種揮發(fā)性成分，鑒定了其中31種主要揮發(fā)性成分，含量較高的組分為石竹素（15.27%）、(-)-斯巴醇（6.64%）、石竹烯（4.89%）等。GC-MS法適用于茵陳揮發(fā)性成分的定性分析，具有靈敏度高、分析速度快的特點。

茵陳；揮發(fā)油；水蒸汽蒸餾法；GC-MS

茵陳始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，它是菊科植物濱蒿（Artemisiascoparia Waldst.et Kit）或 茵陳蒿（Artemisiacapillaries Thunb.）的干燥地上部分。具有清利濕熱，利膽退黃的功效［1］。茵陳揮發(fā)油的藥用價值高，尤其在利膽和保肝方面作用非常突出［2］，除具有利膽保肝作用外，還有陣痛、消炎、降血脂、增強免疫、抗腫瘤作用［3］，因此對茵陳揮發(fā)油成分進(jìn)行研究將有助于了解其藥效的發(fā)揮。

近年來，已有學(xué)者對不同提取方法提取的茵陳揮發(fā)油成分進(jìn)行了鑒定［2，4-6］，筆者采用水蒸氣蒸餾法提取山東產(chǎn)茵陳中的揮發(fā)性成分，并用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）進(jìn)行分析，用峰面積歸一化法測定其相對含量。該研究為進(jìn)一步開發(fā)利用山東茵陳提供了科學(xué)依據(jù)。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：GC 6890N型，美國安捷倫公司；

質(zhì)譜儀：MS 5975型，美國安捷倫公司；

色 譜 數(shù) 據(jù) 處 理 系 統(tǒng)：MSD Chemstation D.03.00.611，美國安捷倫公司；

質(zhì)譜檢索數(shù)據(jù)庫：NIST 08；

乙酸乙酯、無水硫酸鈉：分析純；

茵陳：購自濟南市建聯(lián)中藥店，產(chǎn)地為山東，經(jīng)鑒定為菊科植物茵陳蒿，剪碎，備用；

實驗用水為蒸餾水。

1.2 樣品提取方法

精密稱取茵陳100 g置于2 000 mL圓底燒瓶中，加入12倍量蒸餾水，浸泡2 h后，按《中華人民共和國藥典》2010年版(一部)附錄XD揮發(fā)油測定法(甲法)連接裝置［1］。自冷凝管上端加水至充滿揮發(fā)油測定器的刻度部分，再加入2 mL乙酸乙酯，置電熱套中加熱提取6～8 h，至測定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻，取上層乙酸乙酯層用少量無水硫酸鈉干燥，用于GC-MS分析。

1.3 儀器工作條件

1.3.1 色譜條件

色 譜 柱：HP-5MS柱(30 m×250 μm，0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度：250℃；載氣：He氣；柱流量：1.0 mL／min；進(jìn)樣體積：0.2 μL；分流比：20∶1；程序升溫：初始溫度50℃，保持8 min，以2℃／min升至140℃，保持8 min，以10℃／min升至250℃。

1.3.2 質(zhì)譜條件

標(biāo)準(zhǔn)譜圖調(diào)諧；電離方式：EI，電子能量70 eV；離子源溫度：230℃；數(shù)據(jù)采集掃描模式：全掃描；溶劑延遲時間：2 min。

2 結(jié)果與討論

2.1 實驗結(jié)果

對采用水蒸氣蒸餾法提取得到的茵陳揮發(fā)油進(jìn)行GC-MS分析，其揮發(fā)性成分總離子流圖見圖1。對各峰質(zhì)譜圖進(jìn)行NIST08標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索，選取質(zhì)譜匹配度高的可能物質(zhì)，鑒定了31種組分，采用峰面積歸一化法計算各組分的相對含量，結(jié)果列于表1。

圖1 茵陳揮發(fā)性成分總離子流圖

2.2 結(jié)果討論

由表1及圖1可知，茵陳揮發(fā)油所含成分較多，主要為倍半萜及單帖類，如石竹素、石竹烯、β-蒎烯等。從茵陳中共檢出52種組分，通過標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索鑒定出31種主要成分，已鑒定出的成分峰面積占色譜總流出峰面積的67.46%，其中含量大于1%的有22種，占色譜總流出峰面積的62.89%，主要成分為石竹素（含量15.27%）、(-)-斯巴醇（含量6.64%）、石竹烯（含量4.89%）；另外還含有烯醇類化合物及少量酯、醛類化合物等。王玉林等［4］研究后認(rèn)為茵陳的主要成分為有機酸類，如正十六烷酸；姚健等［5］對甘肅產(chǎn)茵陳進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn)主要成分為長馬鞭草烯酮；霍務(wù)貞［6］等研究后認(rèn)為香荊草酚在揮發(fā)油中。本實驗所得化合物成分與一些文獻(xiàn)報道有一定差異，筆者認(rèn)為這可能與藥材的揮發(fā)性成分提取方法、產(chǎn)地、采收期、貯藏時間以及生長時期的氣候等因素有關(guān)。

表1 茵陳揮發(fā)油化學(xué)成分分析結(jié)果

3 結(jié)語

采用水蒸氣蒸餾法提取茵陳中的揮發(fā)性成分，對茵陳揮發(fā)性成分進(jìn)行了GC-MS分析，并采用峰面積歸一化法測定其含量。該法靈敏度高，分析速度快。用該法首次對山東產(chǎn)茵陳的揮發(fā)性成分進(jìn)行了鑒定分析，為進(jìn)一步開發(fā)利用山東茵陳提供了理論數(shù)據(jù)。

［1］國家藥典委員會.中國藥典(2010年版一部)［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010.

［2］張知俠，楊亞婷，張興.茵陳揮發(fā)油成分的GC-MS分析［J］.咸陽師范學(xué)院學(xué)報，2006，21(6): 25-26.

［3］曹錦花.茵陳的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J]. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2013，30(6): 489-494.

［4］王玉林，朱丹暉，馮曉亮，等. GC-MS和平滑預(yù)處理及SFA法用于茵陳揮發(fā)性成分的分析［J］.咸陽師范學(xué)院學(xué)報，2013,33(1): 98-102.

［5］姚健，趙保堂，王俊龍，等. 甘肅茵陳蒿超臨界CO2萃取產(chǎn)物化學(xué)成分的差異性分析［J］.草業(yè)科學(xué)，2009,26(4): 37-42.

［6］霍務(wù)貞，衛(wèi)世杰，袁旭江，等. 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析茵陳與牛至揮發(fā)油的化學(xué)成分［J］. 廣東藥學(xué)院學(xué)報，2010,26(5): 492-496.

Analysis of Chemical Constituents of the Volatile Oil of Capillary Wormwood Herb by GC-MS

Liu Junshan1， Gong Lili2
(1. Department of Reproductive Center， The Fourth Hospital of Shijiazhuang， Shijiazhuang 050011, China ；2. Shandong University of Traditional Chinese Medicine Experimental Center, Jinan 250355, China)

The volatile compounds in volatile oil of capillary wormwood herb were extacted by steam distillation method, and then analyzed and identified by gas chromatography-mass spectroscopy (GC-MS). The relative content was determined by using peak area normalization method. Results indicated that 52 components in capillary wormwood herb were detected by GC-MS and 31 main volatile compounds were identified by MS. Compounds with high contents were as the follows: caryophyllene oxide（15.27%），(-)-spathulenol（6.64%），caryophyllene（4.89%），and so on. GC-MS method is suitable for qualitative analysis of the volatile components in capillary wormwood herb with high sensitivity and rapid analysis.

capillary wormwood herb; volatile oil; steam distillation; GC-MS

O657.7

A

1008-6145(2014)04-0017-03

10.3969／j.issn.1008-6145.2014.04.005

*國家科技重大專項資助項目（2011ZX09102-003-06）

聯(lián)系人：鞏麗麗；E-mail: lily@sdutcm.edu.cn

2014-04-08