唇香草多糖超聲提取工藝研究

吳燕妮， 郭玉婷， 耿 直， 蘭 衛(wèi)

(1新疆名醫(yī)名方與特色方劑學(xué)自治區(qū)重點實驗室， 2新疆醫(yī)科大學(xué)對口協(xié)作辦公室， 烏魯木齊 830011)

維吾爾藥唇香草(ZiziphoraclinopodioidesLam.)為唇形科新塔花屬多年生半灌木草本植物唇香草的干燥地上部分，維吾爾族名字為蘇則[1]。唇香草為維吾爾族民間常用藥材，具有提高免疫力的作用。為了更好地使用唇香草，本研究以唇香草多糖含量為檢測指標(biāo),用苯酚-硫酸法進(jìn)行含量測定,考察料液比(g/mL) 、提取溫度(℃)、超聲時間(m)三因素,探討超聲提取條件下提取多糖的最佳工藝條件。

1 儀器與試劑

透析袋(MWCO:500) (上海綠島科技發(fā)展有限公司)，UV-2550紫外光譜儀(日本島津)、EYELA SB-1000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司)等。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、蒽酮、硫酸等均為分析純，蒸餾水。唇香草(購買自新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)院中藥房)經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院王新玲副教授鑒定為唇形科植物唇香草(ZiziphorabungeanaJuz.)的干燥地上部分。

2 方法與結(jié)果

2.1葡萄糖對照品溶液的制備精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品101.9 mg置于100 mL的容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，精密吸取1 mL至10 mL容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，即得濃度為0.1 mg/mL的葡萄糖對照品溶液。

2.2蒽酮試劑的制備準(zhǔn)確稱取0.1 g蒽酮溶于100 mL 72%硫酸中(需當(dāng)天配制)[2]

2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作用微量吸取器分別吸取葡萄糖對照品溶液0.3、0.5、0.7、0.9 、1.1、1.3、1.5 mL分別置于10 mL具塞試管中，均用蒸餾水補(bǔ)充至2.0 mL。空白管加入2.0 mL蒸餾水做對照,各管中加入6 mL硫酸-蒽酮溶液搖勻，沸水浴中加熱10 min，后冷卻至室溫。620 nm處測定吸光值。標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為:A=10.783C+0.007 9,r=0.999 8，樣品檢測量在3.82～19.10 μg/mL 范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

2.4正交試驗參照文獻(xiàn)[2-3]，根據(jù)單因素預(yù)試驗結(jié)果，選擇超聲溫度、超聲時間及料液比為參考因素，以唇香草多糖的提取率為指標(biāo)，采用L9(33)正交試驗設(shè)計(表1)，對唇香草中多糖的提取條件進(jìn)行優(yōu)化(表2)，方差分析見表3。

表1 因素水平

表2 正交實驗設(shè)計及數(shù)據(jù)處理表

以唇香草多糖的提取率為考察指標(biāo)，由表2的R值可以看出，各因素對試驗結(jié)果影響的大小順序為B>C>A；其中，B因素和C因素，各因素之間具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。A因素，各因素間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，從節(jié)約溶劑考慮，選擇A1，從極差和方差分析的結(jié)果可以看出，最佳提取工藝條件為A1B2C2。

表3 方差分析表

2.5常規(guī)提取結(jié)果取唇香草藥材5.0g，粉碎，按料液比1:30，加入蒸餾水，回流提取2次，每次1.0 h，合并提取液，濃縮，經(jīng)含量測定，唇香草總多糖含量為6.36%。

2.6驗證性試驗根據(jù)2.4的分析結(jié)果，依照提取工藝A1B2C2進(jìn)行提取試驗，唇香草樣品平行提取5次，試驗結(jié)果精密度良好(表4)。

表4 重現(xiàn)性試驗結(jié)果

3 結(jié)論

為了更科學(xué)合理利用唇香草資源，本研究以唇香草多糖含量為檢測指標(biāo)，考察料液比(g/mL) 、提取溫度(℃ )、超聲時間( m)三因素, 確定超聲提取條件下提取多糖的最佳工藝條件，超聲法提取唇香草多糖具有高效、方便特點。唇香草多糖超聲提取法與常規(guī)提取法相比，提取效率提高了17.9%。

參考文獻(xiàn)：

[1] 劉勇民, 沙吾提·伊克木. 維吾爾藥志(上冊)[M].烏魯木齊:新疆科技衛(wèi)生出版社，1999:446-451.

[2] 勾建剛,劉春紅.白茅根多糖超聲提取的優(yōu)化[J].時珍國醫(yī)國藥，2007，18(11)：2749-2750.

[3] 任雪峰，吳冬青，王永生，等.人參果多糖超聲提取工藝的研究[J].食品研究與開發(fā)，2010,31(1):9-11.