降糖類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥品的研究概況

黃海燕，饒偉文，鐘建理

（廣西壯族自治區(qū)桂林食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 桂林 541002）

我國(guó)的糖尿病患者已超過印度，是世界糖尿病人數(shù)最多的國(guó)家[1]。糖尿病需要持續(xù)的醫(yī)療干預(yù)及患者不斷地自我監(jiān)控，以避免糖尿病急性并發(fā)癥及減少慢性并發(fā)癥的發(fā)生。但長(zhǎng)時(shí)間服用降糖西藥不良反應(yīng)較大，很多糖尿病患者較青睞降糖中成藥和保健食品，故中國(guó)市場(chǎng)對(duì)降糖中成藥和保健食品的需求越來越大。一些不法廠商為增加產(chǎn)品功效，在降糖類中成藥和保健食品中非法添加降糖化學(xué)藥品，患者長(zhǎng)期大量服用此類中成藥或保健食品，可能造成嚴(yán)重的不良反應(yīng)，甚至?xí)＜盎颊呱Ｄ壳?，已有許多中成藥和保健食品非法添加降糖類化學(xué)藥品的研究報(bào)道，筆者結(jié)合工作實(shí)踐，對(duì)其研究近況進(jìn)行綜述。

1 降糖類化學(xué)藥品的分類與常見制劑

按照化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)，降糖類化學(xué)藥品可分為4類：雙胍類，包括鹽酸二甲雙胍、鹽酸苯乙雙胍、鹽酸丁雙胍等；磺脲類，包括甲苯磺丁脲、格列本脲、格列齊特、格列喹酮、格列吡嗪、格列美脲等；噻唑烷酮類，包括吡格列酮、羅格列酮等；格列奈類，包括瑞格列奈、那格列奈、米格列奈等[2]。

零售藥店常銷售的降糖化學(xué)藥品有鹽酸二甲雙胍片、格列吡嗪片、伏格列波糖分散片、格列齊特片（膠囊）、米格列奈鈣膠囊（片）、阿卡波糖片、格列本脲片、羅格列酮鈉片、瑞格列奈片、格列美脲片、格列喹酮片、鹽酸吡格列酮片等。

2010年版《中國(guó)藥典（二部）》收載的降糖類化學(xué)藥品有鹽酸二甲雙胍片（腸溶膠囊）、鹽酸苯乙雙胍片、格列本脲片、格列齊特片、格列吡嗪片（膠囊）、格列喹酮片、甲苯磺丁脲片、瑞格列奈片[3]。

2 已發(fā)現(xiàn)非法添加的降糖類化學(xué)藥品

張翠英等[4-5]在某降糖膠囊中發(fā)現(xiàn)違法添加了格列本脲和格列吡嗪，格列本脲含量為每粒0.15 mg，格列吡嗪含量較低。魏清芳等[6]通過對(duì)市售降糖類中成藥及保健食品103批次的篩查，發(fā)現(xiàn)有46批次含有格列本脲，33批次含有二甲雙胍，27批次含有苯乙雙胍。在這103批次中，添加1種降糖類化學(xué)藥品的有23批次，2種的有65批次，3～6種的有12批次，未檢出（陰性）的有3批次。劉福艷等[7]在降糖寧膠囊中發(fā)現(xiàn)違法添加了二甲雙胍和格列本脲，同時(shí)在甘露消渴膠囊中發(fā)現(xiàn)含有苯乙雙胍和格列本脲，含量分別為每粒 3.9，1.5 mg。曹玲等[8]發(fā)現(xiàn) 2 批降糖寧膠囊非法添加了鹽酸二甲雙胍。胡青等[9]對(duì)40個(gè)廠家，不同品種、不同劑型共300批次降糖類和調(diào)脂類中藥及保健食品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果分別檢出格列吡嗪、格列本脲、苯乙雙胍和洛伐他汀。楊釗等[10]檢測(cè)20批次中成藥，發(fā)現(xiàn)有1批次違法添加了鹽酸二甲雙胍和格列本脲，濃度為2.93%和0.34%，經(jīng)核實(shí)為非法假冒；另在檢測(cè)10批次為個(gè)人送檢的保健品、食品或非法醫(yī)療機(jī)構(gòu)生產(chǎn)的降糖類產(chǎn)品中，發(fā)現(xiàn)90%添加了化學(xué)藥品，為鹽酸二甲雙胍、鹽酸苯乙雙胍、格列齊特、羅格列酮、格列美脲、格列本脲。施亞琴等[11]對(duì)16種18個(gè)批次的市售降糖類中成藥及保健食品進(jìn)行篩查，發(fā)現(xiàn)有3種4個(gè)批次的降糖類中成藥及保健食品中添加有格列本脲和格列吡嗪。

經(jīng)統(tǒng)計(jì)，在發(fā)現(xiàn)的非法添加降糖類化學(xué)藥品中，格列本脲最常見，其次是鹽酸二甲雙胍和鹽酸苯乙雙胍，格列吡嗪也較常見，格列齊特、羅格列酮、格列美脲偶有報(bào)道，有的兩三種降糖類化學(xué)藥品同時(shí)添加。

3 非法添加成分的檢測(cè)方法

對(duì)降糖類中成藥和保健食品添加化學(xué)藥品的檢測(cè)方法報(bào)道很多，一般是高效液相色譜（HPLC）法定性，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）法確證，也可先用薄層色譜（TLC）法篩選。另外，應(yīng)用顯微共聚焦拉曼光譜法、近紅外光譜（NIR）法、高效毛細(xì)管電泳（HPCE）法也有報(bào)道。

1)TLC法

TLC法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、快速，是切實(shí)有效的篩查方法，同時(shí)還可用于藥品快檢車上中藥、保健食品非法添加降糖藥品的快速篩查。但經(jīng)TLC檢驗(yàn)呈陽(yáng)性的樣品，需進(jìn)一步通過二極管陣列檢測(cè)器-高效液相色譜或液質(zhì)聯(lián)用確證。

施亞琴等[11]采用硅膠GF254薄層板，三氯甲烷-環(huán)己烷-乙醇 -冰醋酸（8∶12∶1∶1）為展開劑，碘化鉍鉀試液為顯色劑，建立了快速篩查中成藥及保健食品中添加磺酰脲類化學(xué)降糖藥的薄層色譜法，磺酰脲類化學(xué)降糖藥品格列喹酮、格列齊特、格列本脲和格列吡嗪顯紅色斑點(diǎn)，在中成藥中的最低檢出限分別為每1 g中成藥含 0.2，0.3，0.2，0.1，0.2 mg。李亞琴等[12]使用 2 種不同的薄層板和展開劑，建立了降糖類中成藥中成添加降糖西藥成分格列齊特的快速檢測(cè)方法，用該方法檢出2批次糖力舒甘露消咳膠囊、糖力舒膠囊可能添加格列齊特。該法簡(jiǎn)單易行。

2)HPLC法

HPLC法具有同時(shí)分離、分析的功能，具有快速、高效、靈敏的特點(diǎn)，在檢測(cè)分析中發(fā)揮著重要作用。付大友等[13]建立了降糖類中成藥中非法添加的鹽酸二甲雙胍、格列本脲、格列吡嗪3種化學(xué)物質(zhì)同時(shí)分離測(cè)定的HPLC法，采用Zorbax Eclipse XDB-C18色譜柱，流動(dòng)相為0.1 mol/L磷酸二氫鈉緩沖液 -甲醇（70∶30），檢測(cè)波長(zhǎng)為233 nm，根據(jù)外標(biāo)法計(jì)算樣品中非法化學(xué)物質(zhì)的含量，結(jié)果懷疑2種降糖制劑含有二甲雙胍、格列本脲、格列吡嗪3種化學(xué)物質(zhì)，另一種含有鹽酸二甲雙胍、格列吡嗪2種違禁成分并進(jìn)行了定量。吳澤君等[14]以對(duì)羥基苯甲酸丁酯作為內(nèi)標(biāo)物，采用HPLC法對(duì)糖樂膠囊中違法添加的格列本脲進(jìn)行含量測(cè)定，色譜柱為Hypersil ODS2，流動(dòng)相為磷酸二氫銨溶液（取磷酸二氫銨3.550 7 g，加水 600 mL 溶解，用磷酸調(diào)節(jié) pH 至 3.50±0.02）-甲醇（300 ∶600），檢測(cè)波長(zhǎng)為 274 nm。

3)HPLC-MS法

HPLC-MS法是檢驗(yàn)中成藥和保健品中非法添加化學(xué)藥品的確證方法，不需待測(cè)組分與干擾物質(zhì)完全色譜分離，可通過質(zhì)荷比判定檢出物質(zhì)的分子量，還可通過二級(jí)質(zhì)譜得到碎片離子進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，進(jìn)一步確證化合物的結(jié)構(gòu)。

張翠英等[4]建立了超高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)中成藥降糖制劑中非法添加格列苯脲和格列吡嗪的定性分析，同時(shí)對(duì)其含量采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定時(shí)間只需4 min。

程顯隆等[15]采用HPLC-MS法，以Agilent TC-C18色譜柱對(duì)樣品進(jìn)行分離，以甲醇 -0.1%甲酸水溶液（30∶70）為流動(dòng)相，采用電噴霧離子化正離子檢測(cè)模式，全掃描，通過液相色譜保留時(shí)間、紫外光譜圖、相對(duì)分子質(zhì)量及源內(nèi)CID（碰撞誘導(dǎo)裂解）碎片離子等信息，與羅格列酮對(duì)照，對(duì)中藥降糖制劑及膠囊殼中非法添加的羅格列酮進(jìn)行檢測(cè)。

殷帥等[16]建立了液相色譜-電噴霧離子化質(zhì)譜法，流動(dòng)相以甲醇-0.1%乙酸銨溶液進(jìn)行梯度洗脫，正離子模式，結(jié)果11種輔助降糖類化學(xué)藥品鹽酸苯乙雙胍、鹽酸二甲雙胍、甲苯磺丁脲、格列齊特、格列吡嗪、格列本脲、格列美脲、鹽酸吡格列酮、馬來酸羅格列酮、格列喹酮和瑞格列奈的HPLC色譜圖分離良好，質(zhì)譜分辨率符合鑒別要求，最小檢出量為 0.01～1.4 mg/kg。

另外，魏青芳等[6]、劉福艷等[7]、張翠英等[5]、胡青等[9]都建立了HPLC-MS法對(duì)中成藥和保健食品中非法添加的降糖類化學(xué)藥品進(jìn)行檢測(cè)和驗(yàn)證。

4)顯微共聚焦拉曼光譜法

曹玲等[8]建立了檢測(cè)中成藥中非法添加降糖類化學(xué)藥品的拉曼光譜法，采用顯微共聚焦拉曼光譜法，使樣品在顯微鏡下微區(qū)成像，逐點(diǎn)選擇不同點(diǎn)采集拉曼光譜圖，并與對(duì)照品光譜圖進(jìn)行比對(duì)分析。用此方法在市場(chǎng)監(jiān)督抽樣的中成藥中檢出鹽酸二甲雙胍，檢出結(jié)果進(jìn)一步得到HPLC-MS法驗(yàn)證，說明顯微共聚焦拉曼光譜法可作為中成藥、保健食品中非法添加降糖化學(xué)藥物檢測(cè)的可選方法。

5)NIR法

NIR檢測(cè)技術(shù)具有簡(jiǎn)單、快速、無損等特點(diǎn)，王新財(cái)?shù)萚17]建立了非法添加格列本脲的近紅外檢測(cè)方法，以格列本脲對(duì)照品近紅外光譜圖為參照光譜，選擇特征譜段，根據(jù)已知樣本的近紅外光譜與參照光譜的相關(guān)系數(shù)及格列本脲的有效劑量，確定閾值，建立檢測(cè)模型，并通過驗(yàn)證，檢測(cè)模型準(zhǔn)確率較高，可用于非法添加格列本脲產(chǎn)品的快速檢測(cè)。

6)HPCE法

HPCE法具有分離效率高、分析速度快等特點(diǎn)。鄒定等[18]以含50 mmol/L磷酸 -硼酸鹽溶液(pH7.6)為運(yùn)行緩沖液，毛細(xì)管(60 cm×75 μm)有效長(zhǎng)度為 55 cm，以磺胺甲 唑?yàn)閮?nèi)標(biāo)物，分離電壓為 20 kV（運(yùn)行電流 100～110 μA)，測(cè)定波長(zhǎng)為 214 nm，建立了毛細(xì)管區(qū)帶電泳色譜法，對(duì)復(fù)方降糖制劑中的苯乙雙胍、格列本脲、阿卡波糖進(jìn)行分離鑒定及含量測(cè)定。結(jié)果3種組分在10 min內(nèi)得到很好地分離，苯乙雙胍、格列本脲、阿卡波糖的加樣回收率分別為 99.1% ，98.9% ，98.6% 。

7)法定的補(bǔ)充檢驗(yàn)方法

針對(duì)市場(chǎng)上出現(xiàn)的降糖類中成藥和保健食品非法添加化學(xué)藥品的現(xiàn)象，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布了藥品檢驗(yàn)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批準(zhǔn)件（批準(zhǔn)件編號(hào)為2009029）。該補(bǔ)充檢驗(yàn)方法適用于降糖類中成藥及保健食品中非法添加甲苯磺丁脲、格列本脲、格列齊特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲、馬來酸羅格列酮、瑞格列奈、鹽酸吡格列酮、鹽酸二甲雙胍、鹽酸苯乙雙胍等11種化學(xué)藥品的篩查和驗(yàn)證。其中，TLC法用于快速篩查，HPLC法用于定性檢查，經(jīng)快速篩查或定性檢查結(jié)果為陽(yáng)性的樣品，需經(jīng)HPLC-MS方法驗(yàn)證。該補(bǔ)充檢驗(yàn)方法使藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在出具檢驗(yàn)報(bào)告時(shí)有法可依，有力地打擊了降糖類中成藥和保健食品的非法添加行為。

4 結(jié)語(yǔ)

由于不法分子在中成藥和保健食品中非法添加的降糖類化學(xué)藥品的種類和加入量存在隨意性，如劉福艷等[7]報(bào)道的1批次降糖寧膠囊摻入的格列本脲每粒含量為5.2 mg，服用1粒降糖寧膠囊就已達(dá)到格列本脲片每次服用量（輕癥者1.5 mg，一般為5～10 mg），該降糖寧膠囊同時(shí)還摻有含量為每粒83.2 mg的鹽酸二甲雙胍，患者服用這樣的中成藥或保健食品容易發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)，對(duì)患者的身體健康危害極大。如2009年在新疆發(fā)生的2例糖尿病患者服用假冒廣西平南制藥廠生產(chǎn)的糖脂寧膠囊導(dǎo)致死亡的惡性案件。

非法添加降糖類化學(xué)藥品的種類多變、層出不窮，僅按上述補(bǔ)充方法有時(shí)還不能檢出非法添加的化學(xué)物質(zhì)。2012年，筆者按國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局頒布的補(bǔ)充檢驗(yàn)方法對(duì)1種降糖保健食品復(fù)方蜂膠膠囊進(jìn)行檢驗(yàn)，未檢出該補(bǔ)充方法所列的11種降糖化學(xué)藥品。經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，摻有新的降糖化學(xué)藥品格列波脲(Glibornuride)，并以格列波脲對(duì)照品為對(duì)照，用HPLC-MS法進(jìn)行了驗(yàn)證，含量接近每粒4 mg。格列波脲化學(xué)結(jié)構(gòu)與甲苯磺丁脲相似，屬磺脲類降糖化學(xué)藥[19]，在中成藥或保健食品中非法添加格列波脲在國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道。筆者對(duì)同一廠家生產(chǎn)的另一批號(hào)的同一品種復(fù)方蜂膠膠囊進(jìn)行檢驗(yàn)，卻未檢出格列波脲，而檢出了格列本脲和鹽酸格列吡嗪?？梢?，非法摻入的化學(xué)物質(zhì)有不確定性，在檢驗(yàn)時(shí)不能僅按補(bǔ)充方法檢驗(yàn)，還要加強(qiáng)對(duì)非標(biāo)方法的研究，靈活把握。

摻有降糖類化學(xué)藥品的中成藥和保健食品一般都不是在正規(guī)渠道銷售，而是通過網(wǎng)絡(luò)或郵購(gòu)等方式，而且還送貨上門，貨到付款，藥監(jiān)部門無法進(jìn)行有效監(jiān)督。應(yīng)加大宣傳力度，提高患者防范意識(shí)，到正規(guī)零售藥店購(gòu)藥。同時(shí)，藥監(jiān)部門應(yīng)加大查處無證經(jīng)營(yíng)行為，嚴(yán)懲無證經(jīng)營(yíng)謀取暴利的違法分子，保障人們用藥安全、有效。

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