甘肅岷縣當歸產(chǎn)地鑒別研究進展

摘 要 由于地理環(huán)境影響，甘肅岷縣當歸與其它產(chǎn)地當歸在主要成分及其含量上存在差異，地道藥材岷縣當歸的鑒別方法有性狀鑒別、組織鑒別、顯微結(jié)構(gòu)鑒別、指紋圖譜鑒別和rRNA鑒別等，通過研究為當歸藥材的開發(fā)和利于提供參考。

關(guān)鍵詞 甘肅岷縣；當歸；產(chǎn)地鑒別

中圖分類號：F326.12 文獻標志碼：B 文章編號：

當歸別名干歸、馬尾歸、云歸及金當歸等，為多年生草本植物，在中國主要分布于甘肅、云南、青海及湖南等地。當歸的根可入藥，是最常用的中藥之一[1]。甘肅岷縣地處青藏高原邊緣，具有高寒陰濕的氣候特點，素有“隴原旱碼頭”和千年藥鄉(xiāng)的美譽。當歸忌積水，以土層深厚、肥沃疏松及腐殖質(zhì)多的沙壤土為宜，故甘肅省岷縣為當歸的生長提供了得天獨厚的環(huán)境。

岷縣當歸與歐當歸的鑒別方法有多種，最常見的方法是從性狀特征、外觀特征出發(fā)進行辨認[2]。另外還有組織鑒別、粉末鑒定、指紋圖譜鑒別等。

1 性狀鑒別

就性狀特征而言，岷縣當歸呈不規(guī)則圓柱形，表面黃褐色至棕褐色具有皺紋和皮孔，有油潤感。根頭略顯膨大直徑1～4cm且有環(huán)紋，上端圓鈍，有紫色或黃綠色殘留的葉鞘和莖基。主根粗短1～3cm，下部有支根2～10條。歐當歸較之岷縣當歸略長，表面灰褐色及有皺紋和皮孔，干枯無油潤感。根頭較膨大，平截直徑3～5cm，主根粗長一般長約10cm，下部有支根數(shù)條，多平直。

2 組織鑒別

岷當歸與歐當歸的組織鑒別：需取全材研成細末，過60目篩。并取當歸和歐當歸直徑相當?shù)闹Ц鰴M向切片。再就二者的粉末和支根切片進行顯微觀測。兩者切面大小相仿，但它們是同科不同屬，故其組織結(jié)構(gòu)有別?？勺鳛榻M織鑒別的依據(jù)有二：1）木質(zhì)部導(dǎo)管和射線：岷縣當歸木質(zhì)部欠發(fā)達，導(dǎo)管疏松，木射線寬廣數(shù)10列細胞。后者則木質(zhì)部發(fā)達，導(dǎo)管緊密，木射線狹窄2～3列細胞。2）淀粉粒：取二者粉末裝片鏡檢發(fā)現(xiàn)，當歸淀粉粒較少分散成單?；虮С蓤F，呈圓形或橢圓形直徑5～18μm。后者淀粉含量高，呈類球形，大粒少小粒多。

3 顯微鑒別

岷當歸與歐當歸的薄片層析：將二者研細過20目，取少量當歸與歐當歸的粉末用甲醇浸泡3h以上，濃縮提取液備用。以2倍量的1%羥甲基纖維素鈉混合硅膠粉研勻，鋪板，風(fēng)干，110℃烘干40miN做吸附劑。氯仿-乙酸乙酯-乙醇-甲酸（5∶4∶3∶1）做展開劑，1%香莢蘭醛-濃硫酸做顯色劑。在365mm熒光燈下觀察結(jié)果顯示，岷縣當歸：Rf0.83（亮藍綠色）、Rf0.74（藍紫色）。歐當歸：Rf0.83（亮藍綠色）、Rf0.74（藍紫色）、Rf0.22（藍灰色）。岷當歸與歐當歸在氯仿-乙酸乙酯-乙醇-甲酸（5∶4∶3∶1）系統(tǒng)中的層析行為差異，可作為二者鑒別的重要依據(jù)。

4 超顯微鑒別

目前，超微結(jié)構(gòu)及形態(tài)的觀察比較在當歸鑒定上的應(yīng)用比較廣泛，但利用掃描電子顯微鏡對不同品系的當歸種子形態(tài)的鑒別尚不多見。后者的主要鑒別指標是種子形態(tài)和表面紋理。岷歸的種子細胞為寬卵圓形，背部隆起較低且隆起間隔較大。它們的一級紋飾也近似，只在二級紋飾上存在較大差異。一級紋飾為不平行起伏排列，二級紋飾為不規(guī)則交叉排列。種子的形狀和表面紋飾可作為品種鑒別的

依據(jù)。

5 指紋圖譜鑒別

建立綜合評價當歸質(zhì)量的HPLC指紋圖譜分析法，對當歸進行鑒定和評價能更全面的反應(yīng)它的質(zhì)量和道地性，可準確反應(yīng)產(chǎn)地對當歸的影響信息[3]。在當歸質(zhì)量控制中，判別分析又稱“分辨法”，是在分類確定的條件下，根據(jù)某一研究對象的各種特征值判別其類型歸屬問題的一種多變量統(tǒng)計分析方法。其基本原理是按照一定的判別準則，建立一個或多個判別函數(shù)，用研究對象的大量資料確定判別系數(shù)，并計算判別指標。據(jù)此即可確定某一樣本的種屬。

6 rRNA基因間隔區(qū)測序法

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，中藥材的鑒定方法從最初的形狀鑒定，至后來形成的顯微鑒別、理化鑒別和光譜等方法的應(yīng)用，已發(fā)展到了DNA指紋圖譜鑒定等分子水平。從分子水平對當歸道地性鑒定的研究，以當歸rRNA基因內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)通過引物套疊式擴散當歸種子DNA中rRNA基因的第1和第2間隔區(qū)對擴散產(chǎn)物進行DNA堿基排列順序的測定，并以獲得的當歸rRNA基因內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)堿基序列作為分子水平的鑒定標記。

7 各鑒別方法的比較

性狀鑒別是一種基于經(jīng)驗的快速鑒別方法，為藥農(nóng)或商販親睞。性狀鑒別從當歸的外形特征和組織的的結(jié)構(gòu)特征出發(fā)對當歸的產(chǎn)地信息作出快速判斷。不同產(chǎn)地的當歸在以上方面的差異不是很大，所以結(jié)果也不是很可靠。顯微鑒別和超顯微鑒別的重現(xiàn)性好，并且當歸越新鮮結(jié)果越明顯，是現(xiàn)行鑒別方法中嘗用且較好的一種。岷縣當歸指紋圖譜還沒有建立起來，rRNA基因內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)堿基序列數(shù)據(jù)庫也沒有建立起來，指紋圖譜和DNA擴散技術(shù)方法還有待完善。

參考文獻

[1] 柳永青.當歸的化學(xué)成分與生物活性[J].沈陽航空航天醫(yī)藥，2009，20（11）：127-129.

[2] 齊耀東.當歸藥材資源調(diào)查與分析[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2009，25（23）：437-441.

[3] 劉元生.當歸造血作用研究進展[J].醫(yī)學(xué)綜述，2010，17（1）：1089-1091.

（責任編輯：趙中正）

收稿日期：2014-01-14

基金項目：甘肅省科技計劃資助項目（1308RJZE305）。

作者簡介：王文（1964-），男人，博士，畜牧師，從事草地生態(tài)資源與環(huán)境