鈣網(wǎng)蛋白的抗腫瘤作用及臨床應(yīng)用

徐文娟

【摘要】鈣網(wǎng)蛋白是多功能蛋白質(zhì)， 參與蛋白加工，細(xì)胞內(nèi)Ca2+ 穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)，參與抗原遞呈，抑制血管生成和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[2-3]。最近研究發(fā)現(xiàn)， CRT 與腫瘤的發(fā)生， 診斷、預(yù)防與治療密切相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】鈣網(wǎng)蛋白 CRT 腫瘤 預(yù)防

【中圖分類號(hào)】R73 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-6851（2014）04-0017-01

鈣網(wǎng)蛋白（ calreticulin， CRT） 是一種分子量為46 kD 的可溶性蛋白質(zhì)，人類的CRT 基因定位于第十九號(hào)染色體的p13.2- p13.3 區(qū)段， 免疫組化定位顯示主要分布在細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔及核被膜， 其他的細(xì)胞區(qū)室、細(xì)胞表面及細(xì)胞外環(huán)中也有少量分布^[1]。鈣網(wǎng)蛋白是多功能蛋白質(zhì)， 參與蛋白加工，細(xì)胞內(nèi)Ca2+ 穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)，參與抗原遞呈，抑制血管生成和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[2-3]。最近研究發(fā)現(xiàn)， CRT 與腫瘤的發(fā)生， 診斷、預(yù)防與治療密切相關(guān)。

1 CRT的抗腫瘤作用

1.1 CRT增強(qiáng)MHc—I類分子的表達(dá)和穩(wěn)定性：腫瘤細(xì)胞在轉(zhuǎn)化形成腫瘤的過(guò)程中， 機(jī)體免疫系統(tǒng)通過(guò)發(fā)動(dòng)針對(duì)腫瘤抗原的免疫應(yīng)答以殺傷腫瘤細(xì)胞， 阻止腫瘤的形成。大量的研究表明， CD8+CTL 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫在機(jī)體排斥腫瘤方面起著重要作用， T 淋巴細(xì)胞只能通過(guò)識(shí)別抗原肽- MHCⅠ分子復(fù)合體發(fā)揮細(xì)胞免疫作用。在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中， 腫瘤抗原分子被降解加工成8～12 個(gè)氨基酸殘基的短肽并被裝載在MHCⅠ類分子的肽結(jié)合槽， 然后一起被運(yùn)送至細(xì)胞表面供T 細(xì)胞識(shí)別。因此， 機(jī)體MHCⅠ類分子以及其與抗原肽的裝載正常與否對(duì)阻止腫瘤的發(fā)生至關(guān)重要。CRT 能維持MHCⅠ分子二聚體的穩(wěn)定，在MHCⅠ類分子與抗原肽的正確裝載及被運(yùn)送至細(xì)胞表面有著重要作用。Gao 等^[4] 發(fā)現(xiàn)，CRT 缺陷的細(xì)胞系（ K42） 其正確裝載抗原肽的能力下降50%～80%， 并影響T 細(xì)胞對(duì)2/3 抗原肽的識(shí)別， 而對(duì)該缺陷細(xì)胞系轉(zhuǎn)染CRT 基因后能恢復(fù)正常。

1.2 CRT抑制腫瘤血管的生成：CRT N端1～180 個(gè)氨基酸（ 血管抑制蛋白vasostatin） ， 被認(rèn)為有很好的抑制血管生成的作用。Pike 等^[5] 從EB 病毒中純化出血管抑制蛋白并證實(shí)其在體內(nèi)特異地抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖而不抑制其他細(xì)胞系， 把血管抑制蛋白注入無(wú)胸腺小鼠， 立即減少其Burkitt 瘤的生長(zhǎng)。Yao 等^[6] 研究發(fā)現(xiàn)， 血管抑制蛋白能特異地與整聯(lián)蛋白結(jié)合而抑制內(nèi)皮細(xì)胞與整聯(lián)蛋白的結(jié)合， 阻止內(nèi)皮細(xì)胞黏附于細(xì)胞外基質(zhì)， 由此減少成纖維生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)， 控制血管的生成。CRT通過(guò)抑制腫瘤血管的生產(chǎn)而抑制腫瘤生長(zhǎng)。

1.3 CRT誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞免疫原性凋亡：腫瘤的發(fā)生與凋亡異常有關(guān)， CRT 能通過(guò)多種途徑調(diào)節(jié)凋亡而延緩或阻止腫瘤的進(jìn)展。當(dāng)腫瘤發(fā)生時(shí)，機(jī)體發(fā)生一系列的變化，其中細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中鈣網(wǎng)蛋白向細(xì)胞基質(zhì)移動(dòng)，在粘附到細(xì)胞膜便面。細(xì)胞膜表面的CRT可作為某些腫瘤細(xì)胞表面一種有效的促吞噬信號(hào)，通過(guò)結(jié)合吞噬細(xì)胞表面的低密度脂蛋白-相關(guān)蛋白受體（lowdensity lipoprotein-related protein，LRP）使腫瘤細(xì)胞被吞噬，引起機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)。

2 CRT的臨床應(yīng)用

研究發(fā)現(xiàn)CRT在腫瘤組織中的表達(dá)高于正常組織，分別在肝癌、胃癌和結(jié)腸腺癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等中發(fā)現(xiàn)CRT表達(dá)的顯著增高^[2-3]。Chiqnard 等^[7] 應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法， 比較分析了肝癌患者、肝癌高危人群及正常人中蛋白質(zhì)的表達(dá)差異， 結(jié)果前者血液中CRT 及其裂解片段遠(yuǎn)高于后兩者。Kageyama 等^[8] 用窄ph 范圍雙向電泳， 分析了各3 例癌變和正常膀胱上皮其CRT表達(dá)的差異， 用Western 技術(shù)監(jiān)測(cè)22 例癌性和10例非癌性的手術(shù)切除樣本以證實(shí)CRT 的存在， 結(jié)果均發(fā)現(xiàn)癌變組織中CRT高于正常組織。許多文獻(xiàn)報(bào)道了CRT在腫瘤的基因治療中的應(yīng)用。Liu^[9]等用E7/CRT的融合基因疫苗，有研究等用攜帶CRT/E7融合基因的腺病毒載體免疫小鼠，都發(fā)現(xiàn)徹底清除了荷瘤小鼠攜帶的腫瘤細(xì)胞；并誘導(dǎo)了可以長(zhǎng)期存在的免疫記憶細(xì)胞，起到阻止腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，完全根除腫瘤的作用。肺癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其病死率較高。肺癌的早期診斷及治療是提高患者治愈率和降低病死率的關(guān)鍵。有研究表明在肺癌組織中及血清中有鈣網(wǎng)蛋白表達(dá)，其量的變化與肺癌分型、分級(jí)及預(yù)后有著密切關(guān)系。綜上所述，CRT為多種腫瘤的診斷、治療及評(píng)估預(yù)后提供了新的靶點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)

[1]Johnson S et al. Trends Cell Biol， 2001， 11（ 3） ： 122- 129.

[2]Garg AD，Now is D，Golab J，et al.Immunogenic cell death，DAMPs and anti cancer therapeutics： an emerging amalgamation [J]. Biochim Biophys Acta， 2010， 1805（1）：53-71.

[3]Villagomez M， Szabo E， Podcheko A， et al. Calreticulin and focal-contact-dependent adhesion[J]. BIochem Cell Biol， 2009， 87（4）：545-556.[4]Gao B et al. Immunity， 2002， 16（ 2） ： 99- 109.

[5]Pike SE et al. Blood， 1999， 94（ 7） ： 2461- 2468.

[6]Yao L et al. J Leukoc Biol， 2002， 71 （ 1） ： 47- 53.

[7]Chignard N et al. Gastroenterology， 2006， 130： 2010- 2022.

[8]Kageyama S et al. Clin Chem， 2004， 50（ 5） ： 857- 866.

[9]Liu B，Ye D，Song X，et a1.A novel therapeutic fusion protein vaccine by tWO different families of beat shock proteins linked with HPVl6 E7 generates potent antitumor immunity and antiangiogenesis[J].Vaccine，2008，26（10）l 1387-96.