VEGF在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)及意義

陳小慧 郭玲玲

1.江蘇省連云港中醫(yī)藥高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校醫(yī)學(xué)護(hù)理系 江蘇 連云港 222000;

2.江蘇省蘇州大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院病理科 江蘇 蘇州 215000

VEGF在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)及意義

陳小慧△1郭玲玲＊2

1.江蘇省連云港中醫(yī)藥高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校醫(yī)學(xué)護(hù)理系 江蘇 連云港 222000;

2.江蘇省蘇州大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院病理科 江蘇 蘇州 215000

目的:研究VEGF在膀胱尿路上皮癌(Bladder Urothelial Carcinoma，BUC)中表達(dá)，探討該指標(biāo)與BUC病理分級(jí)、臨床分期及預(yù)后的關(guān)系。方法:對(duì)105例術(shù)后病理檢查為膀胱尿路上皮癌患者的病理切片進(jìn)行VEGF免疫組化染色，另外選擇20例正常膀胱粘膜作為對(duì)照，將染色結(jié)果與BUC病理分級(jí)、臨床分期以及預(yù)后情況進(jìn)行比較分析。結(jié)果:VEGF通過(guò)影響腫瘤血管生成的相關(guān)機(jī)制，促進(jìn)了膀胱尿路上皮癌的發(fā)生，進(jìn)而影響其進(jìn)展與預(yù)后。結(jié)論:VEGF對(duì)膀胱尿路上皮癌的臨床病理診斷、治療及預(yù)后評(píng)估具有一定的指導(dǎo)意義。

VEGF;膀胱尿路上皮癌;腫瘤標(biāo)志物

膀胱癌(bladder cancer，BC)是人類(lèi)常見(jiàn)的惡性腫瘤，發(fā)病率及死亡率均居泌尿系統(tǒng)腫瘤的首位［1］，在組織學(xué)類(lèi)型上以膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma，BUC)最為多見(jiàn)，占90%以上。有研究表明膀胱癌嚴(yán)重危害人類(lèi)的健康，且發(fā)病率逐年增高［2］。另外膀胱癌的復(fù)發(fā)率高達(dá)55%～85%，BC的診治及預(yù)后已引起了人們極大重視［3］。膀胱癌確切的發(fā)病機(jī)制仍未完全闡明。膀胱鏡檢查和病理活檢是診斷膀胱癌的最準(zhǔn)確的方法，但此法屬于有創(chuàng)檢查，敏感性偏低，且無(wú)法預(yù)測(cè)預(yù)后。因而尋找敏感和特異性高的技術(shù)具有非常重要的意義。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2011年1月～2013年12月，在連云港地區(qū)泌尿外科手術(shù)切除的105例術(shù)后病理檢查為膀胱尿路上皮癌的組織作為BUC組，另外選擇20例正常膀胱粘膜(取自前列腺增生癥手術(shù)的患者)作為對(duì)照。BUC組中男74例，女31例，性別比為2.4:1;患者年齡44～72歲，平均年齡56.3歲，其中初發(fā)69例，復(fù)發(fā)36例。膀胱癌病理分級(jí)(WHO/ISUP，2004):非浸潤(rùn)性尿路上皮癌(non－invasive urothelial carcinoma，NIUC)64例，浸潤(rùn)性尿路上皮癌(infiltrating urothelial carcinoma，IUC)41例;臨床分期按國(guó)際抗癌聯(lián)盟UICC－TNM標(biāo)準(zhǔn)分為:淺表性癌(Ta～T1)62例，浸潤(rùn)性癌(T2～T4b)43例。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法及試劑

采用免疫組化SP法進(jìn)行組織染色，每個(gè)步驟嚴(yán)格控制時(shí)間及溫度。即用型鼠抗人VEGF單克隆抗體、美國(guó)ProtTech公司生產(chǎn)，購(gòu)自北京中杉橋生物技術(shù)有限公司。PBS緩沖(粉劑)、EDTA抗原修復(fù)液、DAB顯色試劑盒，上?；蚩萍加邢薰旧a(chǎn)，均購(gòu)自北京中杉橋生物技術(shù)有限公司。常規(guī)病理檢驗(yàn)試劑由徐州醫(yī)學(xué)院附屬連云港醫(yī)院病理科提供。

1.3 結(jié)果判斷

1.3.1 質(zhì)量控制

(1)實(shí)驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)化:每次實(shí)驗(yàn)均以磷酸鹽緩沖液PBS代替一抗的方法設(shè)置陰性對(duì)照，陽(yáng)性對(duì)照則采用福建邁新和北京中杉橋公司提供的陽(yáng)性切片。

(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定，采用雙盲法進(jìn)行結(jié)果判定，由2名病理科醫(yī)師確診，如有異議請(qǐng)另一位經(jīng)驗(yàn)豐富的高年資病理醫(yī)師協(xié)助診斷。

1.3.2 判定標(biāo)準(zhǔn)

VEGF在胞膜或胞漿內(nèi)出現(xiàn)明顯棕黃色或棕色顆粒者為陽(yáng)性，參照Kinoshita等的判定標(biāo)準(zhǔn)，陽(yáng)性細(xì)胞比例＜10%為陰性，陽(yáng)性細(xì)胞比例≥10%為陽(yáng)性［4］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，免疫組化結(jié)果中的VEGF指標(biāo)在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)及復(fù)發(fā)的關(guān)系采用X2檢驗(yàn)。P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01表示有極顯著意義。

2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果

VEGF呈胞膜或胞漿陽(yáng)性表達(dá)(見(jiàn)圖1)。在105例膀胱尿路上皮癌中有53例(50.5%)陽(yáng)性表達(dá)，20例正常膀胱粘膜組織VEGF陽(yáng)性表達(dá)2例(10.0%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。VEGF蛋白在病理分級(jí)為NIUC中的陽(yáng)性表達(dá)25例(39.1%)，在IUC中陽(yáng)性表達(dá)28例(68.3%)，兩者之間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。VEGF蛋白在臨床分期為T(mén)2～T4b中的陽(yáng)性表達(dá)29(67.4%)，顯著高于臨床分期為T(mén)a～T1期陽(yáng)性表達(dá)的24例(38.7%)，兩者之間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。VEGF蛋白在復(fù)發(fā)組中的陽(yáng)性表達(dá)25(69.4%)，初發(fā)組中的陽(yáng)性表達(dá)28(40.6%)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見(jiàn)表1)

表1 VEGF在正常膀胱組織與膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)Tab4:The expression of VEGF in normal bladder tissues and bladder urothelial carcinoma

圖1 VEGF在浸潤(rùn)性膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)陽(yáng)性(SP×40)Fig 1 VEGF expression in infiltrating urothelial carcinoma of the positive SP×40

3.討論

膀胱尿路上皮癌是典型的血管生成活躍的組織，腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移都依賴(lài)于血管為瘤體提供足夠的養(yǎng)料，所以新生血管的生成是腫瘤生成、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)［5］。VEGF是目前唯一能特異性作用于血管內(nèi)皮的促血管生成的因子，其特異性所發(fā)揮的作用在所有的促血管生成因子中最強(qiáng)［6］。腫瘤細(xì)胞分泌的VEGF與受體結(jié)合后，在血管內(nèi)皮發(fā)揮作用，能有效促進(jìn)血管內(nèi)皮的增殖、分離和遷移，另外VEGF還能發(fā)揮促發(fā)纖溶和降解膠原的作用，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤血管形成，新生的血管為腫瘤生長(zhǎng)提供更多的營(yíng)養(yǎng)，間接促進(jìn)腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移。此外血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的生長(zhǎng)因子本身也刺激腫瘤生長(zhǎng)，新血管生成本身就是一種侵襲行為［7］。

目前在體外培養(yǎng)的細(xì)胞株及較多的惡性腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)VEGFmRNA的高表達(dá)［8］。但VEGF在膀胱尿路上皮癌的研究報(bào)道在國(guó)內(nèi)較少見(jiàn)，有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)VEGF在膀胱尿路上皮癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)等過(guò)程中起著重要的作用［9～10］。國(guó)外Santos L用免疫組化的方式研究淺表乳頭狀膀胱腫瘤患者中VEGF的表達(dá)以及與血管新生的關(guān)系，推測(cè)血管新生可作為膀胱腫瘤復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)因子［11］。

本研究結(jié)果支持上述觀點(diǎn)，BUC組織中VEGF的表達(dá)顯著高于正常膀胱組織，其表達(dá)隨著腫瘤分級(jí)、分期的升高而增強(qiáng)，此外VEGF在BUC復(fù)發(fā)組中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于初發(fā)組，VEGF加快BUC的進(jìn)展，與膀胱尿路上皮癌的預(yù)后密切相關(guān)。通過(guò)研究，筆者認(rèn)為VEGF是研究BUC生物學(xué)行為的重要標(biāo)記物，是評(píng)價(jià)膀胱尿路上皮癌術(shù)后復(fù)發(fā)有意義的指標(biāo)。目前，針對(duì)VEGF傳導(dǎo)通路的分子靶向治療藥物已被成功研制，且取得良好的治療效果。隨著腫瘤發(fā)病機(jī)制的不斷深入，阻斷腫瘤血管生成從而實(shí)現(xiàn)腫瘤防治的研究已成為新的研究領(lǐng)域，血管生成抑制劑將來(lái)有可能成為抗腫瘤的主要藥物，并可能最終治愈腫瘤。

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Objective:In order to study VEGF expression in bladder urothelial carcinoma，discuss it with pathological grade，clinical stage and prognosis，provide the basis for the pathological diagnosis，treatment and prognosis of bladder cancer.Methods:the retrospective study includes 105patients specimens wax block with pathologic examination of the bladder urothelial cancer，Immunohistochemical SP method detectes the expression of VEGF 105cases BUC pathological specimens.And select 20cases of normal bladder mucosa as control.The immunostaining results were analyzed in relation to the tumor stage，grade and compared with the clinical par ameters of prognosis.Results:VEGF promoted the occurrence of bladder cancer by affecting the the progress and prognosis.The expression of VEGF has a certain guidance to clinical and pathological diagnosis，treatment and prognosis of bladder cancer.

VEGF;Bladder urothelial carcinoma;Tumor Marker

R446.6

B

1009－6019(2014)11－0002－02

陳小慧 職務(wù):教研室主任 職稱(chēng):高校講師 學(xué)歷:碩士