香黃通便膠囊瀉下作用的研究

祁秀玲 陳俊榮 于永軍 于 娜 林忠濤 李 鵬 張媛媛

滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河北滄州 061000

便秘是一種常見癥狀，病因復(fù)雜，有飲食、心理、藥物等多種治療方法。隨著社會節(jié)奏加快，飲食結(jié)構(gòu)的改變，便秘的發(fā)生率逐漸上升。據(jù)國外資料報道，慢性便秘的發(fā)病率，年輕人為3%，中年人為8%，老年人為20%。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國慢性便秘的發(fā)病率為6.07%。便秘雖為良性疾病，但它不僅嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量，而且在結(jié)腸癌、心腦血管意外、肝性腦病、乳腺疾病、老年癡呆等疾病的發(fā)生中有重要作用。治療本病的方法很多，西醫(yī)對此病多采用對癥治療，以刺激性瀉藥為主，治療效果不理想，不良反應(yīng)多，且容易產(chǎn)生依賴性，還可導(dǎo)致腸道神經(jīng)末梢的損害而加重便秘癥狀。中醫(yī)認(rèn)為便秘的發(fā)病原因歸納起來有飲食不節(jié)、情志失調(diào)、外邪犯胃、稟賦不足等，病機(jī)主要是熱結(jié)、氣滯、寒凝、氣血陰陽虧虛引起腸道傳導(dǎo)失司。便秘的基本病變屬大腸傳導(dǎo)失常，同時與肺、脾、胃、肝、腎等臟腑的功能失調(diào)有關(guān)，其病性可概括為寒、熱、虛、實(shí)四個方面。四者之中，又以虛實(shí)為剛，熱秘、氣秘、冷秘屬實(shí)，陰陽氣血不足的便秘屬虛[1]。因此，按照中醫(yī)辨證論治的指導(dǎo)思想，研制高效低毒、標(biāo)本兼治的中成藥成為當(dāng)前治療便秘藥物研發(fā)的熱點(diǎn)。香黃通便膠囊由大黃、木香、鹽知母、鹽黃柏、陳皮、半夏等十一味中藥材組成，通過清熱散結(jié)、順氣導(dǎo)滯、健脾消食達(dá)到潤便通便的作用，對便秘的治療效果非常顯著。原始方為全粉入藥，制劑工藝簡單，服用劑量大，使用不便。通過正交試驗(yàn)優(yōu)選提取和成型工藝，將原始方提取精制成膠囊劑。本試驗(yàn)主要研究該復(fù)方制劑香黃通便膠囊對便秘模型小鼠的瀉下作用，比較各組之間是否存在顯著性差異，為臨床試驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動物

本試驗(yàn)采用清潔級昆明種小鼠，共50只，體重（20±2）g，雌雄各半，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供，合格證書編號：1310110。

1.1.2 試驗(yàn)藥品

鹽酸洛哌丁胺（西安楊森只要有限公司提供，批號130218288）；酚酞片（山西新星制藥有限公司提供，批號20130101）；香黃通便膠囊（自制樣品，批號20130501）；活性炭（石家莊宏森活性炭有限公司提供）；阿拉伯膠粉（天津市北辰方正試劑廠提供，批號20100916）。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)用藥的配制

1.2.1.1 高劑量香黃通便膠囊混懸液 取香黃通便膠囊內(nèi)容物4.2 g，加純化水研磨均勻，定容到20 mL，搖勻后備用。

1.2.1.2 中劑量組香黃通便膠囊混懸液 取香黃通便膠囊內(nèi)容物2.1 g，加純化水研磨均勻，定容到20 mL，搖勻后備用。

1.2.1.3 酚酞片混懸液 取酚酞片2片（100 mg），加純化水研勻后，定容到25 mL，搖勻后備用。

1.2.1.4 鹽酸洛哌丁胺膠囊混懸液 取鹽酸洛哌丁胺膠囊3粒（6 mg），傾出內(nèi)容物，加純化水研勻后定容到20 mL，搖勻后備用。

1.2.1.5 墨汁[2]稱取50 g阿拉伯膠粉，加入400 mL純化水，煮沸，至膠液透明，加入25 g活性炭（活性炭粉末須過180目篩），煮沸3次，冷后加純化水至500 mL，搖勻后備用。

1.2.1.6 含藥墨汁 分別取各藥物混懸液和配好的墨汁以體積比2∶3混合，搖勻備用。

1.2.2 便秘小鼠造模及給藥

昆明小鼠50只，采用標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后隨機(jī)分為五組，分別為正常對照組、模型對照組、香黃通便膠囊高、中劑量組、陽性對照組（酚酞片組），每組動物10只。試驗(yàn)藥物組和陽性對照組均每日灌胃給藥，灌胃容積為0.2 mL/20 g，注意灌胃前應(yīng)將混懸液搖勻，并排氣。香黃通便膠囊高、中劑量組的給藥劑量分別為人體正常推薦劑量的20、10倍，即2.10、1.05 g/kg。陽性對照組酚酞片[3]的給藥劑量是人體使用劑量的10倍，即40 mg/kg。正常對照組和模型對照組分別灌胃給予等體積的純化水。連續(xù)灌胃7 d后，各組小鼠禁食不禁水，12 h后，模型對照組、陽性對照組、香黃通便膠囊高、中劑量組經(jīng)灌胃給予鹽酸洛哌丁胺（3.0 mg/kg）[4]混懸液，正常對照組給予同體積的純化水。給予鹽酸洛哌丁胺30 min后，正常對照組給予墨汁灌胃，陽性對照組及香黃通便膠囊高、中劑量組分別灌胃給予含相應(yīng)藥物的墨汁，體積相等，均為0.5 mL/20g。便秘模型復(fù)制成功的標(biāo)志是小鼠外觀干癟、瘦小，體重減輕，小便發(fā)黃，出現(xiàn)大便干結(jié)，糞便顆粒細(xì)小。各組給予墨汁后，即開始計時，每只小鼠均單獨(dú)喂養(yǎng)（籠內(nèi)加隔斷），籠下墊相同濾紙各兩層，記錄相關(guān)指標(biāo)。

1.3 觀察指標(biāo)

首次排黑便時間、8 h排便粒數(shù)及糞便重量、糞便性狀及糞便含水率[5-7]。糞便含水率計算方法：糞便含水率=（干燥前糞便重量-恒重后糞便重量）/干燥前糞便重量×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義[8-9]。

2 結(jié)果

模型對照組較正常對照組首次排黑便時間明顯延長，8 h排便粒數(shù)及糞便重量明顯減少，兩組之間差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），表明造模成功。陽性對照組與模型對照組相比，首次排黑便時間、8 h排便粒數(shù)及糞便重量差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。香黃通便膠囊中、高劑量組與模型對照組相比，明顯縮短便秘小鼠的首便時間，增加便秘小鼠8 h排便粒數(shù)及糞便重量，差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。香黃通便膠囊高劑量組，與陽性對照組相比，明顯縮短便秘小鼠的首便時間，增加便秘小鼠8 h排便粒數(shù)及糞便重量，差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；香黃通便膠囊中劑量組，與陽性對照組相比，明顯縮短便秘小鼠的首便時間，增加便秘小鼠8 h排便粒數(shù)及糞便重量，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05及P＜0.01）。小鼠糞便性狀，模型對照組較硬，陽性對照組有較多稀便，香黃通便膠囊組糞便較軟，增加香黃通便膠囊劑量后糞便含水率增加。見表1。

3 討論

便秘是多種原因引起的常見病癥，主要表現(xiàn)為排便困難，排便時間長，便硬、少，因此縮短排便時間，軟化硬質(zhì)糞便是治療便秘的主要措施。但是傳統(tǒng)的刺激性瀉藥不良反應(yīng)多，容易產(chǎn)生依賴性，還可導(dǎo)致腸道神經(jīng)末梢的損害而加重便秘癥狀。

目前國內(nèi)尚無成熟的慢性便秘動物模型可供使用，建模時使用較多的是止瀉藥，如復(fù)方地芬諾酯，考慮到復(fù)方地芬諾酯的副作用以及本品在購買時的難度，參考相關(guān)文獻(xiàn)筆者選擇了副作用更小的止瀉劑鹽酸洛哌丁胺灌胃造模。通過觀察造模前后小鼠的一般情況、首次排黑便時間、8 h內(nèi)排便粒數(shù)及重量、小鼠糞便性狀及含水率，并對觀察結(jié)果進(jìn)行對比，成功建立了小鼠慢性便秘模型。該模型小鼠排便次數(shù)減少，腸道傳輸減慢，與臨床上便秘患者的表現(xiàn)極為相似。造模藥鹽酸洛哌丁胺為阿片受體激動藥，通過激動腸壁的μ-阿片受體和阻止乙酰膽堿及前列腺素的釋放，拮抗平滑肌收縮，而減少腸蠕動和分泌，延長腸內(nèi)容物的滯留時間，致使小鼠排便次數(shù)減少或排便困難，與便秘臨床癥狀及診斷對比基本相同。同時通過試驗(yàn)觀察，本研究模型對照組小鼠在試驗(yàn)過程中無一只死亡，用藥后模型對照組小鼠生活習(xí)性正常，無異常反應(yīng)，說明鹽酸洛哌丁胺的副作用小，可以用于小鼠便秘模型的建立，為今后的進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)提供了基礎(chǔ)。

表1 香黃通便膠囊對便秘小鼠排便的影響（x±s，n=10）

小鼠的便秘模型建模成功后，通過進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，從小鼠的首次排便時間、排便粒數(shù)及糞便重量、糞便性狀及含水率等方面探討了香黃通便膠囊的部分藥理作用。從研究結(jié)果看，試驗(yàn)中各給藥組對鹽酸洛哌丁胺所致便秘模型小鼠的排便功能均有促進(jìn)作用。香黃通便膠囊高劑量組，與陽性對照組相比，明顯縮短便秘小鼠的首便時間，增加便秘小鼠8 h排便粒數(shù)及糞便重量，差異具有顯著性（P＜0.01）；香黃通便膠囊中劑量組，與陽性對照組相比，明顯縮短便秘小鼠的首便時間，增加便秘小鼠8 h排便粒數(shù)及糞便重量，差異具有顯著性（P＜0.05或P＜0.01）。而且在整個試驗(yàn)觀察中，香黃通便膠囊便高、中劑量組的全部小鼠用藥后生活習(xí)性正常，在試驗(yàn)過程中均無死亡，說明香黃通便膠囊副作用較小。從便秘模型小鼠用藥治療后糞便性狀來看，模型對照組較硬，陽性對照組有較多稀便，香黃通便膠囊組糞便較軟，增加劑量后糞便濕度增加。說明香黃通便膠囊在推薦劑量下使用，瀉下作用緩和而平穩(wěn)，具有較好的軟便、通便功效。本研究顯示，香黃通便膠囊作為一種安全有效的治療便秘的藥物具有很好的開發(fā)前景，將會產(chǎn)生良好的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。但是目前的試驗(yàn)結(jié)果只說明香黃通便膠囊具有較好的通便作用，本制劑的全部藥理作用還有待于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

[1]付凱，朱瑩.中醫(yī)藥治療慢性傳輸型便秘概況[J].湖南中醫(yī)雜志，2011，27（6）：128.

[2]張筱軍，周永學(xué).硝菔通結(jié)顆粒通便效應(yīng)及機(jī)制的研究[D].咸陽：陜西中醫(yī)學(xué)院，2008：11.

[3]閔光寧，武新安，祁有亮，等.大黃中游離蒽醌瀉下作用的初步實(shí)驗(yàn)研究[J].蘭州大學(xué)學(xué)報，2008，34（1）：41-43.

[4]楊子明，董仲璽，吳建璋，等.L-阿拉伯糖和蔗糖復(fù)配物對便秘模型小鼠潤腸通便作用的研究[J].食品工業(yè)科技，2012，33（23）：362-392.

[5]國家藥典委員會.中國藥典[M].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[6]孫江宏，歐陽五慶，劉雪梅.通爽沖劑對實(shí)驗(yàn)性便秘的藥效學(xué)研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2010，38（11）：36-42.

[7]唐學(xué)貴，伍靜，劉芳.便塞通合劑對便秘模型小鼠胃腸蠕動功能的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010，28（3）：498-500.

[8]許東強(qiáng)，余保平，高山，等.便秘寧對便秘小鼠排便作用的影響[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2006，15（3）：295-296.

[9]羅玨，王福彥.預(yù)防醫(yī)學(xué)[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2009：39-40.