HER-2在非小細胞肺癌中的表達及與預后的關系

李鑄鵬張丹李丹蘇丹應莉莎毛偉敏,5

1.溫州醫(yī)科大學第一臨床學院心胸外科系，浙江 溫州 325000；

2.浙江省中醫(yī)藥大學藥學院藥理系，浙江 杭州 310000；

3.浙江省中醫(yī)藥大學第一臨床腫瘤學系，浙江 杭州 310000；

4.浙江省腫瘤醫(yī)院研究所，浙江 杭州 310000；

5.浙江省腫瘤醫(yī)院胸外科，浙江 杭州 310000

HER-2在非小細胞肺癌中的表達及與預后的關系

李鑄鵬1張丹2李丹3蘇丹4應莉莎4毛偉敏1,5

1.溫州醫(yī)科大學第一臨床學院心胸外科系，浙江 溫州 325000；

2.浙江省中醫(yī)藥大學藥學院藥理系，浙江 杭州 310000；

3.浙江省中醫(yī)藥大學第一臨床腫瘤學系，浙江 杭州 310000；

4.浙江省腫瘤醫(yī)院研究所，浙江 杭州 310000；

5.浙江省腫瘤醫(yī)院胸外科，浙江 杭州 310000

背景與目的：人類表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)對非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)患者預后的提示作用還處于爭議之中，本研究旨在探索HER-2在NSCLC中的表達及與預后的關系。方法：利用免疫組化檢測425例NSCLC的HER-2的表達。χ2檢驗評價HER-2與臨床病理參數(shù)的關系。COX比例風險回歸評估HER-2與預后的關系。結果：在425例組織中，HER-2陽性表達83例(19.5%)；HER-2表達與NSCLC的病理類型密切相關，腺癌中的表達最高(P=0.05)。COX回歸顯示HER-2與NSCLC的預后無相關性。結論：HER-2表達與NSCLC的病理類型密切相關，在腺癌中表達比較普遍，但與NSCLC的預后無關。

非小細胞肺癌；人類表皮生長因子2；預后

在世界范圍內(nèi)，肺癌的死亡率居所有惡性腫瘤的第1位，5年總生存率＜15%［1］。非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)約占肺癌的80%，盡管治療方法已經(jīng)有很大進步，但是患者的預后依然很差，其中一個很重要原因是缺乏有效的預后診斷標志物，因此基于分子水平的診斷具有非常重要的意義，如腫瘤標志物AFP、CA153可以為肝癌和乳腺癌診斷提供參考［2-3］。

人類表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)是一種185×103的酪氨酸激酶I型跨膜受體，含有1 255個氨基酸，由17號染色體上的基因編碼。HER-2在乳腺癌、肺癌、胃癌和大腸癌中的過表達很常見［4-6］。有研究認為，HER-2與腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移有關，與化療藥物的耐藥性及不良預后也有關，可以作為化療藥物治療的潛在靶點［7-9］。然而，HER-2在NSCLC中的表達情況尚不清楚，與預后的關系還具有爭議［1,7,10-12］。因此，本研究希望通過探討HER-2在NSCLC患者中的表達及與預后的關系，從而為NSCLC的個體化治療提供參考。

1 資料和方法

1.1 患者資料

收集2006年11月—2011年4月在浙江省腫瘤醫(yī)院接受手術治療的425例NSCLC患者的臨床組織標本，患者手術治療前均未接受任何放化療和免疫治療。病理診斷和分級參照世界衛(wèi)生組織和國際肺癌研究協(xié)會的標準(WHO/IASLC，2007年版)。425例NSCLC患者，男性322例，女性103例，年齡37～82歲，平均年齡60.4歲。鱗癌218例，腺癌200例，其他類型7例。Ⅰ、Ⅱ期284例，Ⅲ、Ⅳ期140例。吸煙患者280例，非吸煙患者123例。本研究通過浙江省腫瘤醫(yī)院倫理委員會的審查，所有患者在手術之前都簽署知情同意書。

隨訪：在手術后的2年內(nèi)，每3個月隨訪1次；第3年每6個月隨訪1次，之后每年隨訪1次。無病生存期(disease free survival，DFS)為接受手術到原位復發(fā)、遠處轉(zhuǎn)移、死亡或失訪的時間。總生存期(overall survival，OS)為接受手術到死亡或失訪的時間。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化檢測

5 mm的切片在烤箱中烤30 min，二甲苯脫蠟，100%、95%和75%梯度酒精，PBS復水，枸櫞酸鈉高壓修復，蒸餾水沖洗，3%雙氧水封閉，蒸餾水沖洗，一抗(1∶50，購自福州邁新生物技術開發(fā)有限公司)溫育1～2 h，蒸餾水沖洗，即用型二抗(購自挪威DAKO公司)溫育30 min，蒸餾水沖洗，DAB(購自挪威DAKO公司)顯色5 min，蒸餾水沖洗，蘇木素復染2 min，自來水沖洗，促藍液2 min，自來水沖洗，75%、95%和100%梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片、觀察。

1.2.2 免疫組化評分

根據(jù)美國腫瘤協(xié)會(ASCO，2007版)的指南給染色的組織評分：0～10%腫瘤細胞膜著色為(-)；10%以上細胞呈輕度和不完整細胞膜著色為(+)；10%以上細胞呈中度的完整細胞膜著色為(++)；30%以上細胞呈強度完整細胞膜著色為(+++)。HER-2為細胞膜、細胞質(zhì)著色呈棕黃色顆粒。(-)和(+)為陰性；(++)和(+++)為陽性。

1.3 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件分析，用χ2檢驗分析HER-2與其他變量之間的關系，COX比例風險回歸模型作單因素和多因素分析。雙側檢驗P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 臨床病理特征及與HER-2表達的關系

HER-2蛋白陽性表現(xiàn)為細胞膜、細胞質(zhì)棕黃色顆粒狀著色(圖1)，陽性表達率為19.5% (83/425)。腺癌患者中HER-2陽性表達49例，占所有腺癌患者的24.5%；其次是鱗癌33例，占所有鱗癌患者的15.1%；其他類型1例，占其他類型肺癌的14.3%(P=0.05)。HER-2表達與性別、年齡、腫瘤臨床分期、腫瘤的分化及患者是否吸煙等臨床病理參數(shù)無相關性(表1)。

2.2 HER-2與NSCLC預后的相關性

在COX回歸分析中，單因素分析顯示HER-2表達與DFS和OS的相對危險系數(shù)分別為0.95和1.04，P值分別為0.83和0.84。在多因素分析中，利用年齡、性別、分化程度、組織類型、分期和吸煙史等因素進行矯正分析時，HER-2表達與DFS和OS的相對危險系數(shù)分別為1.04和1.03，P值分別為0.85和0.87。HER-2表達與DFS及OS無相關性(表2)。

圖1 HER-2免疫組化染色結果Fig. 1 Immunohistochemical staining for HER-2

表1 NSCLC患者臨床病理特征及與HER-2表達的關系Tab. 1 Relationships between the expression of HER-2 expression and clinicopathological variables

表2 HER-2表達與NSCLC患者預后的關系Tab. 2 Relationships between the expression of HER-2 and the prognosis of NSCLC patients

3 討 論

本研究發(fā)現(xiàn)，HER-2僅與肺癌的病理類型密切相關，腺癌患者更易表達HER-2，且HER-2與NSCLC的預后無明顯關聯(lián)。在臨床中，HER-2對乳腺癌和胃癌的預后判斷作用及機制已經(jīng)非常明確，并廣泛應用于指導臨床治療。但在NSCLC中，HER-2和預后的關系還存在爭議。一些研究者認為，HER-2的表達與NSCLC的預后呈負相關［1,7,13-14］。Selvaggi等［10］的一項研究發(fā)現(xiàn)在130例NSCLC腫瘤組織中，有21例(16%)HER-2過表達，證明HER-2過表達與患者的不良預后有關，但與病理分期和組織類型無關。Takenaka等［13］的研究表明，在159例腺癌患者中，HER-2表達是不良預后的一個獨立的影響因子，但這些患者中Ⅱ、Ⅲ期患者接受了術前化療。然而，Toh等［15］報道，在109例東亞女性患者中，HER-2表達與預后無關。Pfeiffer等［16］研究了186例術前未接受放化療的NSCLC患者HER-2表達情況及與預后的關系，也證實HER-2表達與預后無關，這與我們的研究結果一致。

以上研究得到不同的結論，一部分原因可能歸于免疫組化的評分系統(tǒng)。肺癌免疫組化的評分系統(tǒng)參考于乳腺癌HER-2的評分系統(tǒng)，但和乳腺組織不一樣的是，HER-2在肺癌組織中的表達是非均一性的，而且免疫組化的評分系統(tǒng)本身具有很強的主觀性，難免使評分出現(xiàn)誤差，導致研究者之間得出不一樣的結論。因此，制定一套適合肺癌的HER-2免疫組化評分系統(tǒng)很有必要。在一些研究中，患者接受過一些術前或術后治療，而這些治療勢必會影響患者的生存，從而使研究的結論不一致。另外，組織固定時間、抗體稀釋濃度及是否接受過放化療等因素都會影響實驗結果，導致出現(xiàn)不同的結論。

總之，由于在非小細胞肺癌患者中HER-2表達與預后相關性存在爭議，應用HER-2表達指導NSCLC患者的治療需慎重；對于HER-2表達與NSCLC預后的關系還需要做更多的研究。

［1］ MAZIERES J, PETERS S, LEPAGE B, et al. Lung cancer that harbors an HER-2 mutation: epidemiologic characteristics and therapeutic perspectives［J］. J Clin Oncol, 2013, 31(16): 1997-2003.

［2］ ZHAO Y J, JU Q, LI G C. Tumor markers for hepatocellular carcinoma［J］. Mol Clin Oncol, 2013, 1(4): 593-598.

［3］ 陳燕, 鄭瑜宏, 林鶯鶯, 等. 原發(fā)性乳腺癌患者術前血清中糖類抗原153癌胚抗原和組織多肽特異性抗原水平與臨床病理特征和預后的關系［J］. 中華腫瘤雜志, 2011, 33(11): 842-846.

［4］ NECHAEV I N, KNYAZEV E N, KRAINOVA N A, et al. Express analysis of HER-2/neu status in breast cancer biopsy specimens［J］. Bull Exp Biol Med, 2013, 155(4): 522-526.

［5］ SMITH H S, MOHSIN I. Painful boney metastases［J］. Korean J Pain, 2013, 26(3): 223-241.

［6］ ALBARELLO L, PECCIARINI L, DOGLIONI C. HER2 testing in gastric cancer［J］. Adv Anat Pathol, 2011, 18(1): 53-59.

［7］ CHIANG Y Y, CHOW K C, LIN T Y, et al. Hepatocyte growth factor and HER2/neu downregulate expression of apoptosisinducing factor in non-small cell lung cancer［J］. Oncol Rep, 2014, 31(2): 597-604.

［8］ EBERLé F. Characterization of principal predictive biomarkers of targeted therapies in thoracic cancer［J］. Ann Pharm Fr, 2013, 71(6): 369-375.

［9］ MAROUN C R, ROWLANDS T. The Met receptor tyrosine kinase: a key player in oncogenesis and drug resistance［J］. Pharmacol Ther, 2014, 142(143): 316-338.

［10］ SELVAGGI G, SCAGLIOTTI G V, TORRI V, et al. HER-2/neu overexpression in patients with radically resected non small cell lung carcinoma. Impact on long-term survival［J］. Cancer, 2002, 94(10): 2669-2674.

［11］ TOMIZAWA K, SUDA K, ONOZATO R, et al. Prognostic and predictive implications of HER2/ERBB2/neu gene mutations in lung cancers［J］. Lung Cancer, 2011, 74(1): 139-144.

［12］ PELOSI G, DEL CURTO B, DELL'ORTO P, et al. Lack of prognostic implications of HER-2/neu abnormalities in 345 stage Ⅰ non-small cell carcinomas (NSCLC) and 207 stageⅠ-Ⅲ neuroendocrine tumours (NET) of the lung［J］. Int J Cancer, 2005, 113(1): 101-108.

［13］ TAKENAKA M, HANAGIRI T, SHINOHARA S, et al. The prognostic significance of HER-2 overexpression in nonsmall cell lung cancer［J］. Anticancer Res, 2011, 31(12): 4631-4636.

［14］ XIA Q, ZHU Z, WANG J, et al. Expression and association of HER2 with prognosis in early-stage (T1-T2N0M0) non-small cell lung cancer［J］. Tumour Biol, 2012, 33(5): 1719-1725.

［15］ TOH C K, AHMAD B, SOONG R, et al. Correlationbetween epidermal growth factor receptor mutations and expression of female hormone receptors in East-Asian lung adenocarcinomas［J］. J Thorac Oncol, 2010, 5(1): 17-22.

［16］ PFEIFFER P, ANDERSEN K, ROSE C, et al. Lack of prognostic significance of epidermal growth factor receptor and the oncoprotein p185HER-2 in patients with systemically untreated non-small cell lung cancer: an immunohistochemical study on cryosections［J］. Br J Cancer, 1996, 74(71): 86-91.

The expression of HER-2 and its prognostic implication in patients with non-small cell lung cancer

LI Zhu-peng1, ZHANG Dan2, LI Dan3, SU Dan4, YING Li-sha4, MAO Wei-min1,5
(Cardiothoracic Surgery Department of The First Clinical College of Wenzhou Medical University, Wenzhou Zhejiang 325000, China; 2.Department of Pharmacology, Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou Zhejiang 310000, China; 3.The First Clinical Oncology Department of Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou Zhejiang 310000, China; 4.Cancer Research Institute, Zhejiang Provincial Cancer Hospital, Hangzhou Zhejiang 310000, China; 5.Department of Thoracic Surgery, Zhejiang Provincial Cancer Hospital, Hangzhou Zhejiang 310000, China)

MAO Wei-min E-mail: maowm1218@163.com

Background and purpose: The prognostic role of human epidermal growth factor receptor 2 (HER-2) remains controversial in patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). This study aimed to evaluate the expression of HER-2 and its prognostic implication in patients with NSCLC. Methods: Four hundred and twenty- fi ve NSCLC patients’ specimens were obtained from Zhejiang Cancer Hospital. HER-2 protein expression was determined by immunohistochemistry (IHC). The relationship between HER-2 and clinicopathological parameters and patients’prognosis was analyzed by Chi-square test and COX proportional hazards regression model. Results: Eighty-three patients were positive expression of HER-2 (83/425, 19.5%). The expression of HER-2 was closely related with histological type (P=0.051), most patients with HER-2 positive were adenocarcinoma, then were squamous carcinoma or other histological types. However, HER-2 was not an independent prognostic indicator for the overall survival of patients with NSCLC. Conclusion: We found that the expression of HER-2 was closely connected with histological type, but it was not a predictive marker for the prognosis in patients with NSCLC.

Non-small cell lung cancer; Human epidermal growth factor receptor 2; Prognosis

10.3969/j.issn.1007-3969.2014.09.007

R734.2

A

1007-3639(2014)09-0679-05

2014-05-07

2014-08-21）

衛(wèi)生部科研基金項目(No：WKJ2010-2-004)；浙江省重大科技專項計劃項目(No：2011C13039-1)。

毛偉敏 E-mail:maowm1218@163.com