口服單劑量茶堿緩釋片的人體生物等效性

劉泗容張志超劉素華

（1 深圳市光明新區(qū)光明醫(yī)院，廣東 深圳 518107；2 北京大學(xué)深圳醫(yī)院，廣東 深圳 518036；3 深圳市大鵬新區(qū)南澳醫(yī)院，廣東 深圳 518121）

口服單劑量茶堿緩釋片的人體生物等效性

劉泗容1張志超2劉素華3

（1 深圳市光明新區(qū)光明醫(yī)院，廣東 深圳 518107；2 北京大學(xué)深圳醫(yī)院，廣東 深圳 518036；3 深圳市大鵬新區(qū)南澳醫(yī)院，廣東 深圳 518121）

目的 探究口服單劑量茶堿緩釋片的人體生物等效性評(píng)價(jià)。方法 將20例健康的志愿者作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為兩組，研究組與對(duì)照組各10例，分別給予兩種不同的國(guó)產(chǎn)茶堿緩釋片（詳見(jiàn)下文），采用交叉試驗(yàn)法口服單劑量200 mg，之后采用反相高效液相色譜法（HPLC）來(lái)測(cè)定研究對(duì)象體內(nèi)血清中的茶堿濃度，同時(shí)分析研究者體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)與相對(duì)生物利用度，最后做生物等效性評(píng)價(jià)。結(jié)果 兩組研究者分別口服不同種類(lèi)的單劑量200 mg茶堿緩釋片，通過(guò)相關(guān)的觀察、分析與統(tǒng)計(jì)之后得知，其中研究組：AUC—（57.52±13.95）（mg·h）/L，Cmax-（2.50±0.43）mg/L，Tmax-（6.16±1.58）h，t1/2-（19.43±5.93）h；對(duì)照組：AUC-（50.22±11.90）（mg·h）/L，Cmax-（2.30±0.41）mg/L，Tmax-（5.76±1.88）h，t1/2-（16.48±5.33）h。結(jié)論 通過(guò)對(duì)試驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后，對(duì)比兩種不同茶堿緩釋片的AUC，采用雙、單側(cè)t檢驗(yàn)后可知P＜0.05，可見(jiàn)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而Cmax、Tmax并無(wú)顯著性差異。

口服單劑量；茶堿緩釋片；人體生物等效性；AUC

在臨床上治療平喘常用的藥物為茶堿類(lèi)藥物，該類(lèi)藥物在治療支氣管哮喘上有著積極的療效，不過(guò)由于該類(lèi)藥物的治療指數(shù)過(guò)于狹窄，因此極易出現(xiàn)一些不良的反應(yīng)[1]。為了減小該類(lèi)藥物帶來(lái)的不良反應(yīng)發(fā)生率，可以適當(dāng)采用緩釋制劑，其能有效降低血藥的峰濃度。此外，在口服茶堿類(lèi)藥物的時(shí)候，有著很多影響因素，加之病患個(gè)體差異較大，那么緩釋制劑的應(yīng)用就顯得十分明顯。這些年，隨著茶堿緩釋制劑不斷研發(fā)，出現(xiàn)了幾十余種，我院應(yīng)用過(guò)幾種，效果不一，基于此本院針對(duì)兩種不同的茶堿緩釋片進(jìn)行了相關(guān)生物利用度的研究，給予志愿者口服單劑量不同的茶堿緩釋片，以此觀察人體生物利用度的對(duì)比研究。現(xiàn)將相關(guān)結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究20例健康的志愿者，均為男性，年齡為19～32歲，平均為24.3歲；身高168.38～184.12 cm，平均為175.89 cm；體質(zhì)量56.12～79.56 kg，平均為63.92 kg。隨機(jī)分為研究組與對(duì)照組，各10例，兩組志愿者在身高、體質(zhì)量及年齡等一般資料上沒(méi)有顯著性差異，可見(jiàn)具有可比性。

本研究中采用的兩種不同茶堿緩釋片分別為：研究組使用的是A類(lèi)——廠家為山西某藥廠，每粒含有茶堿100 mg，批號(hào)為120702；對(duì)照組采用的是B類(lèi)——廠家為廣州某藥廠，每粒含有茶堿100 mg，批號(hào)為1201091。采用的試劑主要有：茶堿標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品、高氯酸、甲醇及水等。

本研究采用的儀器主要有：紫外檢測(cè)儀、進(jìn)樣器、色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)、自動(dòng)平衡記錄儀、高速離心機(jī)、電動(dòng)離心機(jī)及旋渦混合器等。

1.2 方法

1.2.1 茶堿緩釋片使用方法

給予研究組口服單劑量200 mgA類(lèi)茶堿緩釋片，對(duì)照組則口服單劑量200 mgB類(lèi)茶堿緩釋片，按照交叉試驗(yàn)的要求進(jìn)行，待兩周之后采取交叉給藥。在給藥前1 d晚餐后就必須做好禁食準(zhǔn)備；在試驗(yàn)期間，應(yīng)禁煙酒、咖啡及茶等同類(lèi)的食品與飲料；試驗(yàn)者在試驗(yàn)前1周到試驗(yàn)結(jié)束期間，禁止服用其他任何類(lèi)藥物。

具體而言，單劑量給藥方法為：上午8點(diǎn)給藥，給之前取研究者空白血，給藥之后分別在1、2、4、6、8、12、16、24、36 h取靜脈血約3 mL，將其放入10 mL的離心試管內(nèi)，以3000 r/min的轉(zhuǎn)速離心十分鐘左右，將血清進(jìn)行分離。采用一定方法進(jìn)行血藥濃度的測(cè)定，建立藥-時(shí)數(shù)據(jù)曲線，并進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)的對(duì)比與研究。

1.2.2 測(cè)定方法

本研究采用的測(cè)定方法為高效液相色譜法（HPLC）來(lái)進(jìn)行茶堿血藥濃度的測(cè)定。其中，色譜條件為：色譜柱Hypersil ODS2（5 μm，4.0 mm×200 mm）；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為273 nm；流動(dòng)相為甲醇-水，比例為70∶436，流速約為1 mL/min；紙速為0.5 cm/min。血樣中的藥物處理方法為：將血清樣品進(jìn)行精確吸取約0.5 mL，加內(nèi)標(biāo)10 μL（內(nèi)標(biāo)為撲熱息痛溶液），加以混勻，之后加入蛋白沉淀劑高氯酸溶液，濃度為7 %左右，容量為200 μL為宜，并采用旋渦混合器進(jìn)行振蕩（2 min左右），轉(zhuǎn)速以10000 r/min為宜，離心旋轉(zhuǎn)約10 min，吸取其中的20 μL上清液后利用HPLC進(jìn)行測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究相關(guān)數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS12.0進(jìn)行分析，相關(guān)數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

兩組研究者分別口服不同種類(lèi)的單劑量200 mg茶堿緩釋片，其中研究組，采用的是A類(lèi)茶堿緩釋片，相關(guān)結(jié)果為：AUC-（57.52 ±13.95）（mg·h）/L，Cmax-（2.50±0.43）mg/L，Tmax-（6.16± 1.58）h，t1/2-（19.43±5.93）h；對(duì)照組采用的是B類(lèi)茶堿緩釋片，相關(guān)結(jié)果為：AUC-（50.22±11.90）（mg·h）/L，Cmax-（2.30± 0.41）mg/L，Tmax-（5.76±1.88）h，t1/2-（16.48±5.33）h。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)進(jìn)行分析與對(duì)比后可知，研究組與對(duì)照組的AUC有著顯著性的差異（P＜0.05）；而研究組與對(duì)照組的Tmax與Cmax沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05）。具體而言，詳見(jiàn)表1所示。

表1 口服單劑量200 mgA類(lèi)與B類(lèi)茶堿緩釋片后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)（n=20）

3 討 論

就目前來(lái)看，HPLC屬于一種常用的茶堿分離檢測(cè)方法，有著專屬性強(qiáng)與定量準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì)[2]。傳統(tǒng)采用的是對(duì)茶堿血漿的預(yù)處理采用提取法的方式，除了操作過(guò)于繁瑣之外，并且在提取二氯甲烷與溶劑氯仿時(shí)毒性較大。本文中采用的是水與甲醇作為流動(dòng)相，使得成本十分低廉；而且采用的是高氯酸沉淀法，能有效避免提取液毒性大的問(wèn)題，并且操作十分簡(jiǎn)單，對(duì)于快速分析有著積極的意義。本研究采用的HPLC法，靈敏度十分高，最低檢測(cè)濃度能達(dá)到0.08 μg/mL，檢測(cè)量則可達(dá)到1.12 mg。

本研究中的20例健康志愿者經(jīng)過(guò)隨機(jī)交叉口服單劑量200 mg茶堿緩釋片A類(lèi)與B類(lèi)之后，兩組體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程表明，兩種制劑都能起到緩釋作用，并且同常規(guī)的劑型比較，有著峰濃度低、維持血藥濃度時(shí)間較長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)。不過(guò)，由于各類(lèi)緩釋制劑存在著差異，因此在利用不同的制劑時(shí)往往會(huì)產(chǎn)生不同的治療效果[3]。研究組與對(duì)照組采用的A類(lèi)與B類(lèi)茶堿緩釋片在健康人體內(nèi)相應(yīng)的各時(shí)間點(diǎn)茶堿血藥濃度數(shù)據(jù)采用3P97程序經(jīng)計(jì)算機(jī)自動(dòng)迭代擬合與判別，其藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程呈現(xiàn)一級(jí)吸收的一房室開(kāi)放模型。兩種茶堿緩釋制劑的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)AUC經(jīng)雙、單側(cè)t檢驗(yàn)，90 %左右的可信限落在B類(lèi)茶堿緩釋制劑101.7 %～127.5 %范圍內(nèi)，超過(guò)生物利用度實(shí)驗(yàn)要求80.11 %～124.79 %的范圍，因此研究組與對(duì)照組AUC存在顯著性差異；兩組比較，具有較高的生物利用度，二者Cmax、Tmax無(wú)顯著性差異，可避免峰濃度過(guò)高而易出現(xiàn)不良反應(yīng)的問(wèn)題，因此臨床上應(yīng)選用A類(lèi)茶堿緩釋制劑，以取得更好的療效。

[1] 谷大建,王本杰,李宏建.氨茶堿緩釋片的人體生物等效性研究[J].藥學(xué)服務(wù)與研究,2010,10(3):208-211.

[2] 張書(shū)華.淺談氨茶堿不良反應(yīng)[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2012,31(6):60-61.

[3] 何瑾,周瓊,張峻.茶堿不同給藥方案與其血藥濃度關(guān)系的研究[J].昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,31(5):42-45.

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：1671-8194（2014）04-0051-02