固相萃取及GC/MS技術(shù)檢驗(yàn)水中殺撲磷一例

周 妍，郭 磊

(西雙版納州公安局，云南·西雙版納州 666100)

殺撲磷為無(wú)色晶體，別名:40%殺撲磷乳油，速撲殺，麥達(dá)西磷;相對(duì)密度 1.495(20℃)熔點(diǎn):34－40℃，易溶于丙酮、苯和甲醇，在中性和弱酸性介質(zhì)中穩(wěn)定，但在強(qiáng)酸和堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定。分子式:C6H11N2O4PS3，分子量302.3313;殺撲磷是一種有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑，具有觸殺和胃毒作用，有滲透作用，但無(wú)內(nèi)吸作用，對(duì)人畜高毒。

圖1 殺撲磷分子結(jié)構(gòu)圖

本文利用GDX－403樹(shù)脂固相萃取法，對(duì)大體積量水中的殺撲磷進(jìn)行提取和凈化，濃縮后經(jīng)氣質(zhì)聯(lián)用儀檢驗(yàn)，從水中檢出殺撲磷成分，方法簡(jiǎn)便快捷。

一、材料和方法

(一)儀器和試劑

美國(guó)安捷倫7890A－5975C型氣質(zhì)聯(lián)用儀，BF－S2500簡(jiǎn)易固相萃取器，BF－2000氮?dú)獯蹈蓛x，甲醇、氯仿、異丙醇 (均為分析純)、純凈水，GDX403固相萃取小柱 (5ml)。

(二)儀器原理

1.固相萃取法。簡(jiǎn)稱(chēng)SPE法，也稱(chēng)液固萃取法，是根據(jù)液相色譜的理論，利用藥物 (液相)與吸附劑 (固相)間選擇性吸附與選擇性洗脫的原理，使樣品中通過(guò)吸附劑后，保留其中的藥物，再選用適當(dāng)溶液沖去雜質(zhì)，然后用少量溶劑洗脫藥物，從而達(dá)到分離凈化的目的。①劉耀等.固相萃取技術(shù)在藥 (毒)物分析中的應(yīng)用.2000.

2.氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)。簡(jiǎn)稱(chēng)氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù) (GC/MS)，是通過(guò)氣相色譜分離組分和質(zhì)譜對(duì)各組分進(jìn)行鑒定的實(shí)時(shí)分析方法。對(duì)于一個(gè)復(fù)雜的混合物體系，傳統(tǒng)的方法是將混合物進(jìn)行組分的分離和純化，然后用有機(jī)質(zhì)譜進(jìn)行鑒定，這是因?yàn)橛袡C(jī)質(zhì)譜儀要求被分析物是一個(gè)純品。分離和純化不僅是冗長(zhǎng)的過(guò)程，而且會(huì)導(dǎo)致樣品的損失，尤其是微小組分的丟失。GC/MS是一種理想的，邊分離邊鑒定的在線(xiàn)聯(lián)用方法。②中國(guó)人民大學(xué)出版社.理化物證檢驗(yàn)學(xué).2002.

(三)檢材處理

1.固相萃取柱活化。用 5ml甲醇淋洗GDX—403小柱，再用5ml蒸餾水將柱中的甲醇洗去，以便使小柱處于水溶性狀態(tài)。①公安部物證鑒定中心.固相萃取技術(shù)在藥毒物分析中應(yīng)用.2000.

2.檢材處理。取檢材水500ml用濾紙過(guò)濾，過(guò)濾好的檢材以2ml/min左右的流速加入到已活化過(guò)的GDX—403小柱中，溶液通過(guò)固相柱后，將柱中殘留的水相用簡(jiǎn)易固相萃取器抽干，用5ml蒸餾水淋洗小柱后用固相萃取器抽干，以1ml/min左右的流速用氯仿:異丙醇 (3∶1)10ml將柱中吸附的農(nóng)藥洗脫下來(lái)，收集洗脫液，除去上層水液，并于50℃的氮?dú)饬飨聯(lián)]至近干。殘?jiān)謩e用100μl甲醇溶解，取1μl進(jìn)行GC/MS分析。②公安部物證鑒定中心.固相萃取技術(shù)在藥毒物分析中應(yīng)用.2000.

(四)GC/MS條件

色譜柱:HP－5MS(0.25mm×30m×0.25um);柱溫:80℃， (3min)30℃/min280(20min);進(jìn)樣口溫度:280℃;分流比:2∶1;載氣He;柱流量恒流，1ml/min。質(zhì)譜條件:傳輸線(xiàn)溫度:280℃;EI源，離子源溫度:230℃;質(zhì)量掃描范圍:40～450amu。

二、結(jié)果

氣質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)未知化合物進(jìn)行檢索匹配的基本原理是:GC/MS在定性的時(shí)候，未知化合物的EI－MS(電子轟擊離子源－質(zhì)譜譜圖)譜圖會(huì)和NIST(美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)局化學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù))庫(kù)的標(biāo)準(zhǔn)譜圖通過(guò)既定的算法來(lái)進(jìn)行匹配，用來(lái)判斷未知化合物。該案件中通過(guò)GC/MS分析，在以下總離子流圖中 (圖2)及提取離子圖中(圖3)，對(duì)12.113min、12.108min色譜峰處分別進(jìn)行NIST庫(kù)檢索，均檢出殺撲磷成分。

圖2 水中提取物總離子流圖

圖3 水中殺撲磷提取離子圖

三、討論

(一)兩種方法比較 (見(jiàn)表4)

(二)固相萃取檢測(cè)程序及注意事項(xiàng)

1.固相萃取法的程序?；罨バ≈鶅?nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境;上樣——將樣品用一定的溶劑溶解或者過(guò)濾，轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上;淋洗——最大程度除去干擾物;洗脫——用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)洗脫下并收集。

2.注意事項(xiàng)。一是活化過(guò)程中要使小柱保持濕潤(rùn);二是上樣時(shí)流速不能過(guò)快，一般為1ml/min，最大不超過(guò)5ml/min;三是淋洗過(guò)程中需把小柱完全抽干;四是洗脫過(guò)程中流速不能過(guò)快，以1ml/min為宜;有機(jī)溶劑對(duì)身體有害，洗脫過(guò)程需在通風(fēng)櫥中操作。

(三)結(jié)論

通過(guò)近幾年的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在案件的檢驗(yàn)中使用GDX－403小柱能有效萃取水中的有機(jī)磷、有機(jī)氯、有機(jī)氮、擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥和毒鼠強(qiáng)、尿中非法藥物，及血中乙醇、各類(lèi)毒品，且目標(biāo)化合物純凈，雜峰少，并能通過(guò)GC/MS檢測(cè)出來(lái)。

表4 固相萃取與液－液萃取比較圖① 劉耀等.固相萃取技術(shù)在毒物分析中應(yīng)用—評(píng)述.2000

四、案例

2010年10月5日，景洪市嘎灑鎮(zhèn)安麻囡村，村民開(kāi)水龍頭時(shí)，發(fā)現(xiàn)水中有異味，查看水池時(shí)發(fā)現(xiàn)水中有大量泡沫和一股難聞氣味。懷疑被人投毒。為查明案件事實(shí)，西雙版納州公安局刑事技術(shù)民警勘驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)，并提取水池水1250ml，進(jìn)行常規(guī)毒物檢驗(yàn)。經(jīng)采用上述方法，成功從水池水中檢出殺撲磷成分，為案件的成功偵破提供了有力的科學(xué)證據(jù)，發(fā)揮了重要作用。