潛陽(yáng)合劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈重構(gòu)的影響1）

劉 春，蔣梅先

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 清潔級(jí)11周齡SHR，雄性，體重（290±20）g；相同周齡Wister－Kyoto（WKY）大鼠，雄性，體重（290±20）g。所有大鼠均購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，許可證號(hào)：SCXK［滬］2007－0005。實(shí)驗(yàn)鼠購(gòu)回后先觀察1周，每天測(cè)壓訓(xùn)練1次，待大鼠適應(yīng)環(huán)境、血壓穩(wěn)定后，隨機(jī)分為5 組：QYHJ高、中、低劑量組，福辛普利組和SHR 對(duì)照組，每組8只；另8只WKY 大鼠設(shè)為正常對(duì)照組。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 潛陽(yáng)合劑：由地黃、鉤藤、牡蠣等9味中藥組成（含生藥1.82g／mL），由上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院藥劑科提供。使用時(shí)濃縮或酌加雙蒸水，分別制成含生藥2.30g／mL、1.15g／mL、0.57g／mL的水溶液，用于高、中、低劑量組。福辛普利：每片10mg，生產(chǎn)批號(hào)：0804088，中美上海施貴寶制藥有限公司，使用時(shí)碾碎，過(guò)藥典100目篩后置于加入0.5%混懸劑（羧甲基纖維素鈉）的雙蒸水中，制成0.09mg／mL 濃度的福辛普利混懸劑。

1.3 藥物干預(yù) 各組藥物干預(yù)前均測(cè)定大鼠體重，并根據(jù)“人和動(dòng)物按體表面積折算的等效劑量比值表”折算確定等效劑量：福辛普利組給藥劑量為0.9 mg／kg；QYHJ折算后等效劑量作為中劑量組給藥劑量，高、中、低劑量組給藥劑量分別為22.94 g／kg、11.47g／kg和5.74g／kg；模型對(duì)照組和正常對(duì)照組給予等量雙蒸水。每天灌胃1次，連續(xù)8周。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 標(biāo)本采集 于末次灌胃后24h（禁食不禁水12h），大鼠稱重記錄后，以2%戊巴比妥鈉（35 mg／kg）腹腔麻醉。剖開(kāi)胸腹腔，迅速分離胸主動(dòng)脈，于主動(dòng)脈弓下約0.5cm 處剪取長(zhǎng)約0.5cm 的胸主動(dòng)脈，4 ℃冷生理鹽水沖洗后置入4%多聚甲醛－磷酸緩沖鹽溶液中固定，待作病理檢測(cè)。

1.4.2 胸主動(dòng)脈病理檢測(cè) 將以4%多聚甲醛－磷酸緩沖鹽溶液固定的胸主動(dòng)脈、腸系膜上動(dòng)脈常規(guī)梯度酒精脫水、石蠟包埋、切片，在每例動(dòng)脈的連續(xù)切片中隨機(jī)取2個(gè)血管環(huán)分裱于2張玻片上，分別行蘇木素伊紅染色和Masson染色。

1.4.3 測(cè)量 每個(gè)血管環(huán)在周向相互垂直位置取四處包含血管壁各層的測(cè)量點(diǎn)，光鏡下采用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)分別測(cè)量計(jì)算血管外徑（ED）、內(nèi)徑（LD）、中膜厚度（MT）、中膜厚度與內(nèi)徑比（MT／LD）、血管中膜橫截面積（MCSA）、血管橫截面積（CSA）、血管中膜橫截面積與血管橫截面積比（MCSA／CSA）、血管中膜膠原容積分?jǐn)?shù)（CVF）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 11.5進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠主動(dòng)脈管徑比較 SHR 對(duì)照組胸主動(dòng)脈ED 和LD 值均較正常對(duì)照組增大（P＜0.001）；與SHR 對(duì)照組比較，福辛普利組、QYHJ高劑量組大鼠胸主動(dòng)脈ED 值、LD 值均減?。≒＜0.05或P＜0.01）；QYHJ低劑量組ED 值、LD 值較福辛普利組增大（P＜0.01），亦較QYHJ高劑量組增大（P＜0.05或P＜0.01）。詳見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠主動(dòng)脈內(nèi)、外徑比較×103 m

表1 各組大鼠主動(dòng)脈內(nèi)、外徑比較×103 m

與正常對(duì)照組比較，1）P＜0.001；與SHR對(duì)照組比較，2）P＜0.05，3）P＜0.01；與福辛普利組比較，4）P＜0.01；與QYHJ高劑量組比較，5）P＜0.05，6）P＜0.01

組別 n ED LD正常對(duì)照組8 1.33±0.06 1.11±0.09 SHR 對(duì)照組 8 1.56±0.111） 1.29±0.061）福辛普利組 8 1.44±0.073） 1.15±0.083）QYHJ高劑量組 8 1.46±0.092） 1.18±0.063）QYHJ中劑量組 8 1.53±0.08 1.23±0.08 QYHJ低劑量組 8 1.58±0.094）6） 1.26±0.084）5）

2.2 各組大鼠主動(dòng)脈中膜厚度和橫截面積比較 SHR 對(duì)照組胸主動(dòng)脈MCSA、CSA、MT 值和MT／LD 比值較正常對(duì)照組增大（P＜0.001）。福辛普利組、QYHJ高劑量組MCSA、CSA 值均較SHR 對(duì)照組減?。≒＜0.01）；QYHJ各劑量組MCSA 值與福辛普利組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但QYHJ中、低劑量組CSA 值均較福辛普利組增大（P＜0.05或P＜0.01）；QYHJ低劑量組CSA值較高劑量組增大（P＜0.05）。SHR 對(duì)照組MCSA／CSA比值較正常對(duì)照組增大（P＜0.05），而其余各組間MCSA／CSA 比值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見(jiàn)表2。

2.3 各組大鼠主動(dòng)脈中膜膠原容積分?jǐn)?shù)比較 SHR 對(duì)照組主動(dòng)脈中膜CVF 較正常對(duì)照組增大（P＜0.001）；福辛普利組、QYHJ高劑量組、QYHJ中劑量組SHR 主動(dòng)脈中膜CVF 均較SHR對(duì)照組減?。≒＜0.05或P＜0.001）；QYHJ中、低劑量組較福辛普利組增加（P＜0.05或P＜0.01）。詳見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠胸主動(dòng)脈中膜厚度、橫截面積和中膜膠原容積分?jǐn)?shù)比較

表2 各組大鼠胸主動(dòng)脈中膜厚度、橫截面積和中膜膠原容積分?jǐn)?shù)比較

與正常對(duì)照組比較，1）P＜0.001；與SHR 對(duì)照組比較，2）P＜0.05，3）P＜0.01，4）P＜0.001；與福辛普利組比較，5）P＜0.05，6）P＜0.01；與QYHJ高劑量組比較，7）P＜0.05

組別 n MT（μm） MT／LD（×10－2）MCSA（×105μm2） CSA（×106μm2） MCSA／CSA CVF（%）正常對(duì)照組 8 70.05±11.55 6.40±1.50 2.60±0.34 1.39±0.130.19±0.03 16.95±4.01 SHR 對(duì)照組 8 99.76±16.691） 7.71±1.201） 4.44±0.881） 1.97±0.221） 0.22±0.031） 29.75±4.221）福辛普利組 8 91.27±12.13 7.95±1.32 3.62±0.513） 1.63±0.173） 0.22±0.02 21.17±3.384）QYHJ高劑量組 8 92.12±12.43 7.78±0.98 3.75±0.633） 1.68±0.193） 0.22±0.02 23.62±2.624）QYHJ中劑量組 8 96.23±17.98 7.85±1.51 4.09±0.86 1.83±0.205） 0.22±0.03 25.46±2.382）5）QYHJ低劑量組 8 96.48±13.46 7.64±1.01 4.21±0.74 1.93±0.256）7） 0.22±0.02 26.83±2.286）

3 討 論

動(dòng)脈結(jié)構(gòu)和功能隨著血流動(dòng)力學(xué)的變化而變化，血管重構(gòu)過(guò)程是其對(duì)動(dòng)脈血流和壓力長(zhǎng)期變化的適應(yīng)性反應(yīng)過(guò)程，最終結(jié)果是保持血管壁張力和剪切應(yīng)力的穩(wěn)定。血管重構(gòu)的幾何變化依賴血流動(dòng)力學(xué)變化和完整的血管內(nèi)皮。實(shí)驗(yàn)和臨床證據(jù)表明急性和慢性血流增加可成比例地增加血管管腔面積，而血流減少則可減小血管直徑。動(dòng)脈直徑增加通常伴隨血管壁張力增加，血管壁張力是高血壓血管幾何結(jié)構(gòu)變化的重要決定因素。高血壓時(shí)，由于心輸出量增加，主動(dòng)脈血流量和血管內(nèi)壓力增加，血管壁肥厚是動(dòng)脈內(nèi)壓力和血管半徑增加代償機(jī)制的結(jié)果［2］。

研究表明高血壓動(dòng)物模型主動(dòng)脈發(fā)生明顯重構(gòu)，LD、CSA、MT／LD 值均明顯增高。在腎性高血壓大鼠模型，主動(dòng)脈管腔內(nèi)徑和血管中膜彈力纖維容積分?jǐn)?shù)較正常大鼠明顯增高［3］；SHR主動(dòng)脈舒張末期血管直徑在3個(gè)月、6個(gè)月齡時(shí)較正常血壓大鼠明顯增高［4］；在老齡SHR，9個(gè)月、15個(gè)月齡SHR 的主動(dòng)脈脈搏波速度（PWV）、血管壁張力和彈性模量較同齡正常血壓大鼠明顯增高，血管LD、MT、MT／LD 值較同齡正常血壓大鼠明顯增高［5］。

高血壓時(shí)，在各種神經(jīng)體液因素作用下血管壁膠原蛋白合成增加，降解減少。血管壁膠原蛋白增加導(dǎo)致血管壁僵硬，黏彈性增加，影響血管的舒縮功能，使大動(dòng)脈對(duì)血流增高的緩沖調(diào)節(jié)功能降低。原發(fā)性高血壓患者血清中Ⅰ型膠原蛋白合成增加，隨著血壓的增高，PWV 增快［6］?？傊?，原發(fā)性高血壓大動(dòng)脈重構(gòu)的病理特征為L(zhǎng)D、CSA 和MT／LD 值的增高，這種改變的主要是由于肥厚性重構(gòu)、VSMC體積和數(shù)量的改變和膠原蛋白的沉積［2］。本研究結(jié)果表明，SHR 胸主動(dòng)脈ED、LD、MT、MT／LD、MCSA、CSA、MCSA／CSA 值均較WKY 大鼠增大，SHR 胸主動(dòng)脈發(fā)生明顯的肥厚性重構(gòu)。SHR 胸主動(dòng)脈血管中膜CVF值較WKY 大鼠明顯增大。

QYHJ干預(yù)后血管重構(gòu)的指標(biāo)明顯改善，SHR 胸主動(dòng)脈ED、LD、MCSA、CSA 值較SHR 對(duì)照組減小，MT、MT／LD、MCSA／CSA 值則無(wú)明顯改善；同時(shí)，血管中膜CVF 值明顯降低。結(jié)果表明QYHJ具有改善SHR 胸主動(dòng)脈肥厚性重構(gòu)的作用，主要原因除具有降低血壓［1］，從而降低主動(dòng)脈血管內(nèi)壓力外，還與抑制血管壁膠原蛋白的合成有關(guān)。

［1］ 劉春，蔣梅先.潛陽(yáng)合劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血壓及心率的影響［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21（1）：80－82.

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［3］ Kochova P，Tonar Z，Matejka VM，et al.Morphology and mechanical properties of the subrenal aorta in normotensive and hypertensive rats［J］.Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub，2008，152（2）：239－245.

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