改革完善“有機磷中毒與解救”實驗

劉 芬，呂文偉，陳 霞，王秋靜

（吉林大學基礎醫(yī)學院，吉林 長春 130021）

“家兔有機磷中毒與解救”作為傳統(tǒng)的經(jīng)典實驗在醫(yī)學實驗教學中有著重要意義，是醫(yī)學生必做的實驗項目。學生從實驗中可觀察到機體從正常生理狀態(tài)到有機磷中毒狀態(tài)的病理變化以及藥物對中毒治療的整個作用過程，該實驗為機能綜合性實驗。急性有機磷中毒使機體器官功能紊亂，出現(xiàn)多種臨床癥狀，但以往該實驗用肉眼粗略觀察實驗動物呼吸頻率、肌張力、瞳孔大小等指標，對實驗指標的觀察不定量、不直接、不準確。我們通過改進實驗方法，完善實驗內(nèi)容，應用先進儀器，客觀評價有機磷中毒的各種癥狀指標。在實驗教學過程中結(jié)合臨床檢查項目和用藥情況培養(yǎng)學生實踐能力[1]。

1 增加實驗內(nèi)容

1.1 心電圖監(jiān)測

有機磷中毒表現(xiàn)為各類心律失常和心肌細胞損害，嚴重的心律失常已成為急性有機磷中毒后期主要致死原因[2]。臨床上已將心電圖（ECG）檢查作為判斷急性有機磷中毒患者中毒程度和預后的指標，所以實驗動物心電圖監(jiān)測是非常重要的項目，學生可直觀地了解有機磷中毒對心肌電活動的影響。心電圖表現(xiàn)為心動過速、過緩和Q-T間期延長。通過對心電圖的監(jiān)測，可準確記錄心率變化，也可觀察到肌顫的出現(xiàn)。

1.2 血壓監(jiān)測

急性有機磷中毒可抑制血管運動中樞造成血壓下降。我們在實驗中增加頸總動脈插管測量血壓，可以直接監(jiān)測血壓變化，同時以備取血測量膽堿酯酶活性。

1.3 呼吸監(jiān)測

有機磷中毒時，呼吸系統(tǒng)癥狀最為明顯。由支氣管平滑肌收縮、呼吸道腺體分泌增加引起的呼吸困難導致缺氧，呼吸流量和頻率發(fā)生明顯改變。在實驗中增加動物氣管插管，用PowerLab記錄系統(tǒng)直接測量呼吸流量、呼吸頻率和幅度指標。

以上指標可用PowerLab記錄系統(tǒng)實時監(jiān)測，如圖1、2。

圖1 PowerLab記錄系統(tǒng)

1.4 血氣分析

有機磷中毒時出現(xiàn)呼吸困難，導致血氧變化和電解質(zhì)紊亂，因此血氣分析是判定有機磷中毒程度很重要的指標[3]，也是臨床上快速診斷和判定預后的重要指標。所以實驗增加血氣分析指標測定，使學生學習和掌握用AVL-OPTI血氣分析儀測定血氧飽和度和電解質(zhì)的方法，培養(yǎng)學生的動手能力。

圖2 有機磷中毒的ECG表現(xiàn)

2 改進取血方法

2.1 膽堿酯酶活性測定意義

有機磷酸酯類為持久性抗膽堿酯酶劑，進入機體后，能與膽堿酯酶結(jié)合并使后者失去水解乙酰膽堿的能力，導致乙酰膽堿（ACh）在體內(nèi)大量堆積，進而激動M、N受體并作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，產(chǎn)生M、N樣及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀?？鼓憠A藥阿托品能解除有機磷中毒的M樣癥狀，而解磷定可恢復乙酰膽酯酶（AXhE）水解乙酰膽堿的能力，對M、N樣癥狀均有效[4]。臨床上膽堿酯酶活性測定是對急性有機磷中毒患者進行早期診斷、判斷療效和預后的重要指標，對治療具有指導意義[5]。所以膽堿酯酶活性測定實驗是七年制醫(yī)學生必做的實驗，以學習AChE活性的測定方法，觀察中毒前后及使用不同解救藥后AChE活性的變化。

2.2 取血方法的改進

在AChE活性測定實驗中，我們設計了7個取血時間點，即給藥前、中毒癥狀明顯時、給阿托品待癥狀明顯緩解后以及給予解磷定解救后 0 min、10 min、20 min、30 min 各取血 0.8 ml[6]。在以往的實驗中，采用刀片橫斷耳緣靜脈采血法，由于有機磷中毒后血管收縮，用刀片采血時血液凝固變黑不易流出[7]，導致錯過最佳取血時間甚至無法取出血來，直接影響了AChE活性測定結(jié)果。通過實驗摸索，我們采用家兔頸總動脈插管取血測量AChE活性，由于動脈血豐富不易凝固，取血快、時間短、取血量準確，所以實驗效果非常好，大大提高了課堂實驗成功率。3先進儀器在實驗中的應用

醫(yī)學機能實驗是基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學的橋梁，起著承前啟后的重要作用。我們在實驗教學中不單通過動物實驗操作讓學生初步掌握操作要點，還讓學生使用一些特定的實驗儀器來了解未來臨床和科研工作中常用的儀器[8]。實驗的順利進行以及結(jié)果的準確性依賴于精確、敏感的先進儀器設備，完備的實驗儀器設備是進行實驗的基本條件，儀器設備的質(zhì)量決定實驗研究水平的高低。本實驗使用PowerLab記錄系統(tǒng)同步實時監(jiān)測有機磷中毒及解救藥物對心電、血壓、呼吸頻率和呼吸流量的影響，而且是在家兔清醒狀態(tài)下進行，不影響觀察肌張力、瞳孔大小指標的變化。實驗結(jié)束后對實驗結(jié)果進行測量、分析和統(tǒng)計，培養(yǎng)學生處理問題和科學分析能力。PowerLab記錄系統(tǒng)抗干擾能力強、性能穩(wěn)定，適合科研和實驗教學。實驗采用AVL-OPTI血氣分析儀測定血氧飽和度和電解質(zhì)變化，能提供快速方便的全血 PH、PCO2、PO2、Na+、K+結(jié)果。學生在教師指導下自己操作，一方面拓寬了學生的知識面，另一方面還可讓學生學會獨立操作精密儀器，培養(yǎng)學生實踐能力，為今后的科研和臨床工作奠定堅實的基礎。

4 結(jié)語

通過改革實驗方法，增加實驗內(nèi)容，應用先進儀器，豐富實驗課教學，使課堂知識與臨床實踐緊密結(jié)合，激發(fā)了學生對實驗課的興趣，提高了實驗教學效果。隨著醫(yī)學技術(shù)的不斷發(fā)展，人才培養(yǎng)的要求增高，今后的實驗教學應加大改革力度，淘汰陳舊的實驗方法，引進并應用先進的實驗手段，進一步開發(fā)先進儀器在機能實驗教學中的應用，更新實驗內(nèi)容，使機能實驗課與培養(yǎng)高素質(zhì)應用型人才的要求相適應，從而提高學生綜合素質(zhì)。