高壓臭氧自體血回輸顯著減輕干擾素治療慢性丙型肝炎患者的不良反應(yīng)*

夏冬麗，馬海林，石繡江，希爾娜依·阿不都黑力力，范曉棠，何方平

高壓臭氧自體血回輸顯著減輕干擾素治療慢性丙型肝炎患者的不良反應(yīng)*

夏冬麗，馬海林，石繡江，希爾娜依·阿不都黑力力，范曉棠，何方平

目的探討聯(lián)合高壓臭氧自體血回輸治療對干擾素治療慢性丙型肝炎（CHC）患者臨床療效和不良反應(yīng)的影響。方法105例CHC患者被分為對照組（52例，皮下注射干擾素和口服利巴韋林）和治療組（53例，皮下注射干擾素和口服利巴韋林，聯(lián)合應(yīng)用高壓臭氧自體血回輸療法，平均10～16次），療程均為48周，隨訪24周，觀察病毒學(xué)應(yīng)答率和不良反應(yīng)發(fā)生率。結(jié)果聯(lián)合治療組患者合并血清甘油三酯、高血壓和糖尿病的發(fā)生率分別為28.3%、28.3%和28.3%，顯著高于對照組的5.8%、7.7%和7.7%（P＜0.05），但兩組患者在性別構(gòu)成比、平均年齡、肝功能、HCV RNA載量和肝硬化患者比率等方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義；治療前后兩組肝功能指標(biāo)變化的差異無統(tǒng)計學(xué)意義；治療組患者發(fā)熱、流感樣癥狀和血紅蛋白減低發(fā)生率分別為50.9%、35.8%和34.0%，顯著低于對照組的73.1%、59.6%和55.8%（x2=5.5，P＜0.01；x2=5.9，P＜0.01和x2=5.0，P＜0.01）；治療組早期病毒學(xué)應(yīng)答率、治療結(jié)束時應(yīng)答率和持續(xù)應(yīng)答率分別為83.0%、83.0%和74.4%，與對照組相比無顯著統(tǒng)計學(xué)差異（分別為88.5%、86.5%和76.3%）。結(jié)論盡管合并高代謝綜合征，干擾素聯(lián)合高壓臭氧自體血回輸治療CHC患者病毒學(xué)應(yīng)答率與對照組無顯著性差異，但顯著減少了不良反應(yīng)發(fā)生率。高壓臭氧自體血回輸治療可能成為減少干擾素不良反應(yīng)的輔助療法。

慢性丙型肝炎；高壓臭氧自體血回輸；干擾素；不良反應(yīng)

1 資料與方法

1.1 病例選擇2008年10月～2013年10月在我院住院或門診就診的CHC或丙型肝炎肝硬化患者105例。所有患者診斷均符合慢性丙型肝炎防治指南（2004年版）[3]，排除重疊其他嗜肝病毒感染和HIV感染，無合并自身免疫性肝病、遺傳性肝病、酒精性肝病、惡性腫瘤和有干擾素治療禁忌證者，且所有病例1年內(nèi)未接受過免疫調(diào)節(jié)劑或抗病毒治療。

1.2 治療方法根據(jù)自己選擇，將患者分為兩組，在治療組53例中，給予14例患者聚乙二醇干擾素α-2b（美國先靈葆雅公司）1.5 μg.kg-1皮下注射，1次/w，給予32例患者聚乙二醇干擾素α-2a（瑞士羅氏公司）135/180 μg皮下注射，1次/w，給予7例患者重組人干擾素α-1b（深圳科興生物工程有限公司）400/600 萬單位皮下注射，1次/2d。同時給予利巴韋林（四川美大康藥業(yè)股份有限公司）300～400mg口服，3次/d，治療48 w。在給予抗病毒治療的同時給予高壓臭氧自體血回輸治療，其方法如下：無菌采靜脈血200 ml，取特制醫(yī)用高壓臭氧（具體制備方法參考曹國慶的報道[4]，德國赫爾曼高壓臭氧治療系統(tǒng)）20 μg.ml-1緩慢注入血液中，均勻混合后，立即輸回患者體內(nèi)。每例CHC患者平均治療10～16次，隨訪24 w；在對照組52例中，給予16例患者聚乙二醇干擾素α-2b（美國先靈葆雅公司）1.5μg.kg-1皮下注射，1次/w，給予29例患者聚乙二醇干擾素α-2a（瑞士羅氏公司）135/180μg皮下注射，1次/w，給予7例患者重組人干擾素α-1b（深圳科興生物工程有限公司）400/600萬單位皮下注射，1次/2d。同時給予利巴韋林口服，治療48 w，隨訪24 w。在治療過程中未應(yīng)用其他抗病毒藥物及免疫抑制劑。

1.3 觀察項目采用ELISA法檢測抗-HCV（北京萬泰生物藥業(yè)有限公司）；采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測HCV RNA（中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司）；采用Dxc 800全自動生化分析儀檢測血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、白蛋白（ALB）等肝功能指標(biāo)及血清甘油三酯（TG）、血糖（美國Beckman公司）；采用Sysmex XE-2100全自動血液分析儀檢測血常規(guī)（日本東亞公司）。

1.4 血液系統(tǒng)不良反應(yīng)/骨髓抑制的處理在開始治療后第一個月內(nèi)每周檢測一次血常規(guī)、肝功能。當(dāng)出現(xiàn)中性粒細(xì)胞≤0.75×109/L、血紅蛋白≤100.0g/L、血小板計數(shù)≤50.0×109/L時，暫停使用干擾素，待血常規(guī)和肝功能自行恢復(fù)時再次應(yīng)用干擾素治療，再次用量為初始劑量的30%～50%,同時繼續(xù)每周檢測血常規(guī)、肝功能，待血常規(guī)和肝功能正常后再每月或每兩月復(fù)查一次。

1.5 療效評定標(biāo)準(zhǔn)（1）早期病毒學(xué)應(yīng)答（EVR）：治療l2周時血清HCV RNA陰性或HCV RNA水平較治療前降低2個對數(shù)級以上；（2）治療結(jié)束時病毒學(xué)應(yīng)答（ETVR）：治療結(jié)束時血清HCV RNA為陰性；（3）持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）：治療結(jié)束后隨訪24周時，血清HCV RNA陰性；（4）無應(yīng)答（NR）：指從未獲得EVR、ETVR及SVR者；（5）復(fù)發(fā)（relapse）：治療結(jié)束時血清HCV RNA陰性，但停藥后HCV RNA又轉(zhuǎn)為陽性。

1.6 統(tǒng)計方法應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料采用x2檢驗；符合正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，采用t檢驗；不符合正態(tài)分布的計量資料采用秩和檢驗，以（M,Q）表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料在105例CHC患者中，男性52例，女性53例；年齡19～68歲。入組時，兩組患者一般資料比較見表1。資料顯示兩組病例在性別、年齡、體質(zhì)量、肝功能、HCV RNA載量、白細(xì)胞減少（＜4.0×109/L）率、血小板減少（＜100.0×109/L）率、肝硬化發(fā)生率和干擾素選擇種類等方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而在甘油三酯、高血壓和糖尿病發(fā)生率等方面比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 兩組患者一般資料比較

2.2 兩組肝功能比較在治療前和治療48周結(jié)束時，兩組患者肝功能的比較見表2。

表2 兩組患者治療前后肝功能指標(biāo)[M（Q），（±s）]變化的比較

表2 兩組患者治療前后肝功能指標(biāo)[M（Q），（±s）]變化的比較

例數(shù)ALT（U/L）AST（U/L）TBIL（μmol/L）ALB（g/L）治療組對照組53治療前61.0（84.7）40.0（41.3）12.5（9.5）39.1±3.5治療后23.5（15.6）24.2（11.5）10.0（5.1）40.1±4.2 52治療前51.2（69.2）41.5（30.2）14.6（6.8）40.6±6.3治療后20.4（14.6）21.7（8.5）12.3（9.3）40.4±4.2

2.3 兩組療效的比較在治療結(jié)束時獲得病毒學(xué)應(yīng)答（ETVR）的患者中，在隨訪24周時，治療組有10例失訪，而對照組有14例失訪。在未失訪的病例中，兩組療效比較無顯著性相差（P＞0.05，表3）。

表3 兩組患者療效（%）的比較

2.4 兩組不良反應(yīng)的比較見表4。

表4 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率（%）的比較

3 討論

干擾素聯(lián)合利巴韋林是目前治療CHC的一線治療方案[5，6]。CHC患者抗病毒治療的療效與治療前宿主因素、病毒因素及疾病相關(guān)特點(diǎn)等相關(guān)[7]。宿主因素包括性別、年齡、體質(zhì)量及生化學(xué)指標(biāo)等。本組治療組與對照組比，血清甘油三酯差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其余差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。病毒因素主要包括HCV基因分型及基線時的病毒載量。本組未行基因型測定，兩組之間病毒載量的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。在疾病相關(guān)特點(diǎn)方面，包括白細(xì)胞減少、血小板減少、肝硬化發(fā)生率、高血壓合并率和糖尿病合并率等，僅后兩者比較，兩組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），余項方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。另外，兩組之間干擾素選擇的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。在本研究中，治療組合并血清高甘油三酯、高血壓、糖尿病的發(fā)生率均顯著高于對照組，這些代謝性因素被發(fā)現(xiàn)可以降低干擾素治療CHC的應(yīng)答率，并增加了不良反應(yīng)發(fā)生率，與文獻(xiàn)報道相似[8～10]。

干擾素通過與細(xì)胞膜上的干擾素受體結(jié)合，誘生多種抗病毒蛋白，阻礙病毒核酸和蛋白的合成，從而抑制病毒復(fù)制[11]。目前正在進(jìn)行Ⅳ期臨床試驗的小分子蛋白合成抑制劑對CHC有抑制作用，HCV基因2型和3型感染的慢性丙型肝炎患者可以不再依賴干擾素治療，但是對于基因1型感染的CHC患者仍然需要聯(lián)合干擾素，而我國基因1型CHC患者占全部患者的80%[12,13]。

高壓臭氧自體血回輸是目前俄羅斯、古巴等地廣泛采用的自然療法。其確切機(jī)制尚不明確，但總體認(rèn)為是通過提高細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)活性而改善氧化應(yīng)激。該治療技術(shù)始于20世紀(jì)50年代的德國，此后逐漸被應(yīng)用于慢性疲勞、抗氧化、抗衰老、腰椎間盤突出、骨關(guān)節(jié)疾病、創(chuàng)傷、難治性潰瘍、高血脂、慢性病毒性肝炎等領(lǐng)域。臭氧具有強(qiáng)氧化性、降酶、退黃、抑制RNA復(fù)制等作用，其抗病毒機(jī)制如下：①免疫殺傷作用。臭氧是一種強(qiáng)氧化劑，通過臭氧及活性代謝產(chǎn)物誘導(dǎo)人體產(chǎn)生免疫細(xì)胞，清除肝炎病毒；②誘導(dǎo)人體產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，最終殺滅病毒感染細(xì)胞，使肝炎病毒的復(fù)制得到抑制，從而延緩和阻止病毒性肝炎的發(fā)展[14]；③護(hù)肝作用。通過促進(jìn)血紅蛋白的攜氧能力，改善肝臟血供，同時激活肝臟的自由基清除系統(tǒng)，提高肝臟的抗氧化能力，從而提高肝臟的解毒功能，進(jìn)而起到退黃、降酶的作用[15]。

在本研究中，治療組SVR和復(fù)發(fā)率與對照組比，未見明顯差異，但發(fā)熱、流感樣癥狀和血紅蛋白減低等不良反應(yīng)發(fā)生率顯著減低。本研究不能充分證明高壓臭氧自體血回輸可顯著提高干擾素治療CHC的應(yīng)答率，但高壓臭氧自體血回輸顯著減輕了干擾素治療CHC的不良反應(yīng)。干擾素治療期間出現(xiàn)的不良反應(yīng)是影響患者依從性及生活質(zhì)量的重要因素。除了對癥治療外，目前尚無理想方法可減少其發(fā)生[16]。本研究表明，干擾素聯(lián)合高壓臭氧自體血回輸治療CHC可顯著提高CHC合并血清高甘油三酯、高血壓、糖尿病患者的應(yīng)答率，并顯著減少不良反應(yīng)發(fā)生率，提高患者耐受性，且改善肝功能的效果更好。高壓臭氧自體血回輸改善干擾素治療CHC的不良反應(yīng)似乎為臨床提供了一種新的安全而可行的選擇?？傊邏撼粞踝泽w血回輸是干擾素聯(lián)合利巴韋林治療CHC一種非常好的輔助手段，不失為臨床一種新的選擇。但考慮到納入研究質(zhì)量不高，研究時間短，樣本量較少，治療方案不規(guī)范，且未行基因型測定，無法分析病毒應(yīng)答率與基因型的關(guān)系，因此對于干擾素聯(lián)合高壓臭氧自體血回輸療法治療CHC的確切結(jié)論還有待更多高質(zhì)量大樣本的RCT研究進(jìn)一步論證。

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（收稿：2013-11-14）（校對：陳從新）

Ozone-enriched autologous blood transfusion significantly reduce adverse reactions in chronic hepatitis C patients receiving interferon-α and ribavirin therapy

Xia Dongli，Ma Hailin，Shi Xiujiang，et al.Department of Liver Disease，F(xiàn)irst Affiliated Hospital，Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China

Objective To study the effects of ozone-enriched autologous blood transfusion on the efficacy and adverse reactions in patients with chronic hepatitis C（CHC）receiving interferon-α and ribavirin therapy. MethodsOne hundred and five CHC patients were divided into control group and treatment group；The patients in control group （n=52）were treated with subcutaneous injection of peginterferon-α and oral administration of ribavirin，while the patients in treatment group（n=53）were treated with combinational therapy of interferon，and ribavirin，and ozone-enriched autologous blood transfusion （an average of 10 to 16 times）. The regimen lasted for 48 weeks with a 24 week-posttreatment of follow-up. The virologic response rates and adverse reactions were observed. Results The incidence rates of serum high triglycerides levels，hypertension and diabetes in patients of treatment group were 28.3%，28.3% and 28.3%，respectively，significantly higher than those in the control patients（5.8%，7.7% and 7.7%，respectively，P＜0.05）；No significant differences as respect to gender，average age，liver function tests，HCV RNA load and percentage of cirrhosis were observed between the two groups；The incidence rates of fever，flu-like symptoms and reduction of hemoglobin in patients of the treatment group（50.9%，35.8% and 34.0%，respectively）were significantly lower than those in the control patients （73.1%，x2=5.5，P＜0.01；59.6% x2=5.9，P＜0.01 and 55.8%，x2=5.0，P＜0.05）；The rates of early virologic response，virologic response at end of treatment and sustained virologic response in patients in the treatment group（83.0%，83.0% and 74.4%，respectively）were not significantly different from those （88.5%，86.5% and 76.3%，respectively）in the control patients. Conclusions Although some patients having metabolic syndrome，the virologic response rate in patients receiving interferon-αand ozone-enriched autologous blood transfusion is very high，with reduced adverse reac-tions. Ozone-enriched autologous blood transfusion may be promising in reducing interferon-α-induced adverse reactions.

Chronic hepatitis C; Ozone-enriched autologous blood transfusion; Interferon-α; Adverse reactions我國普通人群HCV感染率約為0.43%[1]，約50%～80%急性HCV感染者將演變?yōu)槁员透窝祝–hronic hepatitis C，CHC），部分患者可發(fā)展成為肝硬化，甚至肝癌[2]。及早發(fā)現(xiàn)和治療CHC可以阻斷肝纖維化的進(jìn)展及肝細(xì)胞癌的發(fā)生。干擾素聯(lián)合利巴韋林是目前治療CHC的首選藥物，但治療期間發(fā)生流感樣癥狀、骨髓抑制、消化道癥狀等不良反應(yīng)明顯，導(dǎo)致部分患者依從性差，甚至退出治療。高壓臭氧自體血回輸治療具有改善血液流變學(xué)指標(biāo)、改善微循環(huán)、抗炎、促進(jìn)組織修復(fù)、保護(hù)肝細(xì)胞等作用。本研究應(yīng)用干擾素聯(lián)合高壓臭氧自體血回輸治療CHC患者，觀察了臨床療效及對不良反應(yīng)的影響，現(xiàn)報告如下。

10.3969/j.issn.1672-5069.2014.03.010

新疆維吾爾自治區(qū)科技支撐項目（編號：201141137）；國家自然科學(xué)基金資助項目（編號：81360138）

830054 烏魯木齊市新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院肝病科

夏冬麗，女，26歲，碩士研究生。E-mail：xiadongli822@qq.com

何方平，E-mail：Hefp@sina.com