PI3K在鼻咽癌組織中的表達(dá)及與預(yù)后關(guān)系研究

齊 巖，黃 波，張名霞，張秋航＊

PI3K在鼻咽癌組織中的表達(dá)及與預(yù)后關(guān)系研究

齊 巖1，黃 波2，張名霞1，張秋航1＊

（1.首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科，北京100053；2.廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院鼻咽癌研究所，廣西南寧530021）

目的觀察鼻咽癌（Nasopharyngeal Carcinoma NPC）組織中磷脂酰肌醇3－激酶（phosphatidylinositol 3－kinase PI3K）的表達(dá)與鼻咽癌預(yù)后的關(guān)系，以期為個(gè)體化綜合治療提供預(yù)測因素。方法將患者性別、年齡、臨床分期、免疫組化結(jié)果中PI3K蛋白表達(dá)同患者預(yù)后進(jìn)行多因素分析。結(jié)果PI3K的蛋白表達(dá)同TNM分期密切相關(guān)，PI3K的高表達(dá)組和低表達(dá)組無瘤生存率和5年總生存率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。Cox風(fēng)險(xiǎn)比例模型多因素分析結(jié)果顯示在性別、年齡、臨床分期、PI3K的蛋白表達(dá)這些因素中，臨床分期和PI3K的蛋白表達(dá)對預(yù)后有顯著影響。結(jié)論鼻咽癌患者PI3K的表達(dá)同腫瘤的TNM分期、腫瘤的預(yù)后有相關(guān)性，是影響患者無瘤生存率和總體生存率相對獨(dú)立的因素。

鼻咽癌；PI3K；預(yù)后

（Chin J Lab Diagn，2014，18：1978）

鼻咽癌的發(fā)生隱匿，易轉(zhuǎn)移，盡管大多數(shù)鼻咽癌對放射治療敏感，但隨著放療技術(shù)設(shè)備的不斷完善，其遠(yuǎn)期生存率仍然令人失望。對于鼻咽癌預(yù)后的判斷，一直沿用的TNM分期似乎不能完全解釋全部患者的臨床轉(zhuǎn)歸，因此，隨著腫瘤分子細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域研究的興起，人們把眼光投向分子生物學(xué)指標(biāo)對預(yù)后判斷的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1臨床資料實(shí)驗(yàn)所用組織標(biāo)本來自2003年8月到2004年8月于廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院鼻咽癌研究所門診就診的患者，全部病人初診時(shí)已確診為鼻咽癌，均為初治病人。

采用免疫組化SP法檢測PI3K在鼻咽癌組織中的表達(dá)，將PI3K表達(dá)的量值按（＋＋＋）和（＋＋）為高表達(dá)組，（＋）和（－）為低表達(dá)組進(jìn)行分組。

1.2治療方法全部病人中Ⅲ、Ⅳ期患者采用手術(shù)、放化療聯(lián)合治療，Ⅰ、Ⅱ期患者均采用單純根治性調(diào)強(qiáng)放療。所有患者至少隨訪5年以上，2009年2月為末次隨訪時(shí)間，其中失訪4例，隨訪率為96.1%，失訪者按死亡處理。全部患者治療后第1年內(nèi)每3個(gè)月復(fù)查一次，第2年每6個(gè)月復(fù)查一次，第3年開始每年復(fù)查一次。隨訪內(nèi)容包括鼻內(nèi)鏡檢查（必要時(shí)取活檢）、胸部X線或CT檢查、頸部及腹部B超、頭顱MRI等檢查。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法生存率中生存時(shí)間按月計(jì)算。應(yīng)用SPSS15.0軟件，相關(guān)性采用Spearman等級相關(guān)分析。生存率計(jì)算采取Kaplan－Meier的方法。組間比較使用Log－rank方法。P＜0.05具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。還應(yīng)用了多因素生存分析方法Cox Regression，篩選影響鼻咽癌生存時(shí)間的因素及研究多因素的相互關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 對PI3K陽性表達(dá)的腫瘤組織不同TNM分期的表達(dá)水平進(jìn)行分析，可以發(fā)現(xiàn)PI3K表達(dá)水平在各分期之間存在明顯的差異（P＜0.01），見表1。2.2 經(jīng)Kaplan－Meier計(jì)算總生存率平均為61.9± 23.0。病人的隨訪時(shí)間為12－87個(gè)月，平均隨訪時(shí)間為60個(gè)月。在隨訪的102例患者中30例患者最終死于鼻咽癌。其生存時(shí)間為從3個(gè)月到67個(gè)月。在圖1中可以看到經(jīng)Kaplan－Meier計(jì)算的PI3K的生存率曲線。在PI3K低表達(dá)組，5年總生存率為80.89%，PI3K高表達(dá)組5年總生存率為51.67%（χ2＝30.818 P＜0.001）.在這兩組中，無瘤生存率分別為75%和46.56%.（χ2＝30.916 P＜0.001），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 鼻咽癌組織中PI3K表達(dá)水平與臨床TNM分期的關(guān)系

圖1 Kaplan－Meier計(jì)算的PI3K的生存率曲線

2.3 Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型多因素分析結(jié)果顯示（表2），在性別、年齡、臨床分期、PI3K的蛋白表達(dá)這些因素中，臨床分期、PI3K蛋白表達(dá)對預(yù)后有顯著影響。PI3K蛋白的高表達(dá)提示預(yù)后不良，可以做為判斷鼻咽癌預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)。

表2 鼻咽癌總生存率及無瘤生存率Cox風(fēng)險(xiǎn)比例模型多因素分析

3 討論

近年來，鼻咽癌患者總體生存率并未得到改善，大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，鼻咽癌的預(yù)后同腫瘤分期、病理類型等因素相關(guān)。但我們臨床中也常常發(fā)現(xiàn)較多相同臨床分期或病理類型相同的患者預(yù)后差別較大，這提示我們應(yīng)該還有更多的預(yù)后相關(guān)指標(biāo)需要補(bǔ)充。近年來很多學(xué)者發(fā)現(xiàn)有些分子標(biāo)志物能夠被證實(shí)成為有意義的預(yù)后相關(guān)的預(yù)測指標(biāo)，這些分子標(biāo)志物有的已經(jīng)試驗(yàn)性的應(yīng)用臨床，作為臨床綜合治療的選擇依據(jù)。

傳統(tǒng)的預(yù)后指標(biāo)一是病理組織學(xué)指標(biāo)，二是臨床分期。但其存在許多不足，難以全面評估一些患者的預(yù)后。血漿EBV－DNA水平同鼻咽癌預(yù)后的相關(guān)研究近年來成為熱點(diǎn)，大多數(shù)的學(xué)者的觀點(diǎn)是檢測鼻咽癌患者EB病毒DNA的表達(dá)水平對判斷預(yù)后有較為重要的意義，而且對判斷腫瘤的殘留、腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移有幫助［3］。但目前這方面研究因需采用PCR法檢測，將其作為大規(guī)模人群篩查指標(biāo)的目標(biāo)還難以實(shí)現(xiàn)。另有學(xué)者許新華等報(bào)道COX－2在鼻咽癌組織中高表達(dá)，其表達(dá)與鼻咽癌的預(yù)后呈負(fù)相關(guān)［4］。Xiang等報(bào)道用免疫組化法觀察了80例鼻咽癌標(biāo)本中Survivin and Livin的表達(dá)，并應(yīng)用log等級檢驗(yàn)和Cox多因素回歸分析的方法分析了這80例病例的生存率與這兩個(gè)指標(biāo)表達(dá)的關(guān)系［5］。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在鼻咽癌標(biāo)本中Survivin和Livin表達(dá)增高。而且Survivin的表達(dá)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)。與Survivin高表達(dá)的病例組相比，Survivin低表達(dá)的病例組有著更高的總體生存率，無瘤生存率和無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移生存率（P＝0.0086，0.0097，0.0318）。Cox回歸分析證實(shí)Survivin的高表達(dá)同鼻咽癌的預(yù)后不良相關(guān)。本課題組曾報(bào)道過Rac1和Cdc42在鼻咽癌組織中的表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)其表達(dá)同患者的預(yù)后密切相關(guān)［6］。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)PI3K／mTOR信號通路的活化在胰腺癌、肝癌、肺癌中均有發(fā)生，抑制PI3K通路對提高對腫瘤細(xì)胞的放療與化療效果有幫助［7］。特別是PI3K在鼻咽癌組織中的表達(dá)是明顯增高的，其超表達(dá)同腫瘤的惡性表型密切相關(guān)［8］。本研究通過多因素分析，發(fā)現(xiàn)鼻咽癌患者PI3K的表達(dá)、腫瘤的分期同預(yù)后相關(guān)顯著，對患者無瘤生存率和總體生存率的影響是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的（P＝0.036，P＝0.031）。人們有可能通過對PI3K的檢測對患者的預(yù)后做趨勢判斷，為個(gè)體化綜合治療提供預(yù)測因素。

終上所述，人們對腫瘤標(biāo)志物同預(yù)后關(guān)系的研究尚處于探索階段，鼻咽癌的TNM分期是從臨床角度定義腫瘤的生物學(xué)特征，病理分型又從細(xì)胞學(xué)角度闡明癌的組織來源和細(xì)胞學(xué)特征，鼻咽癌的腫瘤標(biāo)志物的檢測是否可能幫助我們從分子生物學(xué)的角度探討腫瘤的轉(zhuǎn)歸，幫助我們制定個(gè)體化治療方案仍是我們今后努力的方向。

［1］Lin SY，Tsang NM，Kao SC，et al.Presence of Epstein－Barr virus latent membrane protein 1gene in the nasopharyngeal swabs from patients with nasopharyngeal carcinoma［J］.Head Neck－J Sci Spec，2001，23：194.

［2］許新華，胡國清，李道俊.環(huán)氧化酶－2對鼻咽癌血管生成及預(yù)后的影響［J］.中華放射腫瘤學(xué)雜志，2003，12：154.

［3］Xiang YQ，Yao HR，Wang SS，et al.Prognostic value of survivin and livin in nasopharyngeal carcinoma［J］.Laryngoscope，2006，116：126.

［4］齊 巖，黃 波，司晉源，等.Rac1和Cdc42在鼻咽癌組織中的表達(dá)及其臨床意義［J］.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2013，9：1594.

［5］David A，David M.An Expanding role for mTor in cancer［J］.TRENDS in Molecular Medicine，2005，11：354.

［6］齊 巖，黃 波，蘭桂萍，等.PI3K蛋白和mRNA在鼻咽癌組織中的表達(dá)及意義［J］.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2012，6：1013.

The Prognosis Value of PI3K Overexpression in NPC

QI Yan，HUANG Bo，ZHANG Ming－xia，et al.（Department of Otorhinolaryngology Head and Neck，XuanWu Hospital，Capital Medical University，Beijing100053，China）

ObjectiveThe aim of this study is to identify whether the overexpression of PI3Kis inter－related with NPC，and to define its association with the extent of the presenting disease as measured by the TNM staging system.In addition，we hope to determine whether PI3Kexpression could serve as a prognostic factor in human NPCs.MethodsNPC samples were analyzed with immunohistochemical labeling for PI3Kprotein，Cox regression analysis has been completed.ResultsThe protein up－regulation of PI3Kwas significantly associated with tumor－node－metastasis（TNM）stage and tumor grading（P＜0.05for all）.Cox regression analysis revealed that PI3Kprotein up－regulation was correlated with lower disease－free and overall survival rates（P＜0.001），ConclusionIt could contribute to a poor prognosis of NPC.

NPC；PI3K；prognosis

R739.62

：A

齊巖（1974－），女，醫(yī)學(xué)博士，副主任醫(yī)師，主要從事頭頸腫瘤的相關(guān)研究。

2014－03－12）

1007－4287（2014）12－1978－03

＊通訊作者