15種薏苡仁中多糖含量測(cè)定

楊志清，王 碩，張世鮑，張魚雷，何金寶*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，云南省優(yōu)勢(shì)中藥材規(guī)范化種植工程研究中心，云南 昆明 650201；2.保山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，云南 保山679100；3.文山州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，云南 文山 663000)

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15種薏苡仁中多糖含量測(cè)定

楊志清1，王 碩2，張世鮑3，張魚雷1，何金寶3*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，云南省優(yōu)勢(shì)中藥材規(guī)范化種植工程研究中心，云南 昆明 650201；2.保山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，云南 保山679100；3.文山州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，云南 文山 663000)

薏苡仁是我國(guó)傳統(tǒng)中藥，含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和特殊的藥用成分，具有多種藥理活性。采用回流提取儀提取薏苡仁多糖，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)曲線，采用苯酚-硫酸法對(duì)15個(gè)不同種源薏苡仁中多糖含量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果表明：不同種源薏苡仁中多糖含量存在較大差異，多糖含量最高的為德宏梁河種，達(dá)2.3%，最低的為老撾種，只有1.0%，為充分開(kāi)發(fā)利用薏苡資源提供了理論依據(jù)。

薏苡仁；多糖；含量測(cè)定

薏苡(Coixlacryrna-jobi L．)為禾本科薏苡屬(CoixL.)植物，又名米仁、六谷子、苡米、菩提子等，是中國(guó)傳統(tǒng)藥食兼用作物。薏苡仁(Semen Coicis)英文名Coix Seed，性味甘、淡、微寒, 入脾、胃、肺，經(jīng)常見(jiàn)的中藥薏苡仁即為薏苡的成熟種仁，具有健脾利濕、除痹止瀉、清熱排膿、健胃解痙等功效[1-2]。 薏苡仁含有多種活性成分，如脂類、多糖類、木脂素類、酚類和腺苷等化合物，其中薏苡仁中含有豐富的多糖，具有顯著降糖作用[3]。徐梓輝等[4]研究發(fā)現(xiàn)，薏苡仁多糖可能有抑制肝糖原分解、肌糖原酵解，抑制糖異生作用，從而達(dá)到血糖水平降低的目的。

薏苡屬不同種質(zhì)之間在薏苡仁脂和多糖的含量上存在著顯著差異。呂峰等[5]報(bào)道不同產(chǎn)地薏苡仁的功能成分含量差異明顯，特別是薏苡仁多糖的含量差異極為顯著，但對(duì)云南不同生境下的薏苡居群的薏苡仁脂和薏苡仁多糖的含量進(jìn)行系統(tǒng)的比較測(cè)定，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)對(duì)不同地區(qū)薏苡多糖含量的分析比較，為云南薏苡優(yōu)良品種的選育提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

選取來(lái)自老撾、越南、陜西省農(nóng)科院、中國(guó)農(nóng)科院品質(zhì)所、廣西省農(nóng)科院及云南的文山、德宏、版納、普洱、曲靖并保育在文山州農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)基地的15個(gè)薏苡仁種質(zhì)資源，帶回云南農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)室烘干備用。

1.2 試劑與儀器

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、苯酚純品、5%苯酚、濃硫酸。T-6紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、回流提取儀。

1.3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法

采用苯酚-硫酸法測(cè)定多糖含量[6-7]。先用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品0.1g置于100mL容量瓶中，加入蒸餾水至刻度(1mg/mL)配制葡萄糖對(duì)照品溶液備用；再用葡萄糖對(duì)照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于100mL容量瓶中，分別加入蒸餾水定容，得標(biāo)準(zhǔn)曲線系列溶液；最后吸取標(biāo)準(zhǔn)曲線系列溶液0.5mL于25mL試管，對(duì)照管加入蒸餾水0.5mL，在各管中加入0．5mL的5%苯酚溶液搖勻后，迅速加入濃硫酸3mL，搖勻后置冷水浴中10min，置沸水浴加熱16min，然后在冷水浴中冷卻10min，再用分光光度計(jì)于490nm處測(cè)定吸光度，以吸光度(Z)為縱坐標(biāo)，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(C)為橫坐標(biāo)，得葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4 薏苡仁多糖含量測(cè)定方法[7]

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

從圖1可知，在10～50μg/mL范圍內(nèi)葡萄糖濃度值與回歸方程y值及吸光度Z值有線性關(guān)系。隨著吸光度值(Z)從0.08到0.40不斷增大，各個(gè)處理的葡萄糖濃度也從10～50μg/mL范圍內(nèi)成線性關(guān)系變化。

圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 不同種源薏苡仁多糖含量比較

由表2可知，15種薏苡仁所得到的吸光度值不同，測(cè)定得到的多糖含量也各不相同，吸光度值Z從品種文薏1號(hào)的0.142到品種YDL的0.869不斷變化，而多糖含量也從老撾品種的最低1.0%到Y(jié)DL品種的最高2.3%不斷變化，但也有些薏苡種類之間薏苡仁的多糖含量比較相似。

由圖2方差分析中可以看出，在0.05水平上YDL、德宏種與其它品種差異顯著；Y7-1、越南種、Y9-1、版納種之間差異不明顯；Y8-1、Y-11、YGL-12品系、文薏2號(hào)、Y12-2之間差異不明顯；老撾種、文薏1號(hào)、Y3-6、Y6-2之間差異不明顯。在0.01水平上YDL與德宏種差異顯著，與其它品種差異極顯著；德宏種、Y7-1、越南種、Y9-1、版納種之間差異不明顯；Y8-1、Y-11、YGL-12品系、文薏2號(hào)、Y12-2之間差異不明顯；老撾種、文薏1號(hào)、Y3-6、Y6-2之間差異不明顯。

表2 不同種源薏苡仁多糖含量的測(cè)定結(jié)果

3 討論

15個(gè)不同種源的薏苡仁中的多糖含量存在著一些差異，種子來(lái)自于同一地區(qū)的薏苡仁多糖含量也存在著差異；不同種源薏苡仁中多糖含量最高的為德宏梁河種(YDL)，為2.3%，最低的為老撾種，為1.0%；來(lái)自文山地區(qū)的4個(gè)種源中以文薏2號(hào)最高，為1.6%，其它3個(gè)相同，為1.1%；來(lái)自德宏州的3個(gè)種源中以德宏梁河種(YDL)最高，為2.3%，最低的為德宏梁河大廣種1.3%。這種差異說(shuō)明由于每個(gè)地方的薏苡經(jīng)過(guò)多年的人工種植，受到各地氣候、土壤及栽培方法等的影響，形成了一些各自不同的特征，包括薏苡仁中化學(xué)成分的差異，形成了薏苡種質(zhì)資源的生物多樣性[8]。

注：小寫字母表示在P<0.05水平差異顯著；大寫字母表示在P<0.01水平差異極顯著。

圖2 不同種源薏苡仁多糖含量(%)方差分析

用熱水浸提薏苡仁多糖時(shí)利用了多糖類化合物水溶性好的特點(diǎn)，經(jīng)研究表明隨著溫度的提高多糖得率也逐漸增加，溫度為100℃時(shí)，多糖得率最高，但在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用了75℃的溫度提取多糖，多糖提取不完全，可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

本實(shí)驗(yàn)測(cè)定了15個(gè)不同種源薏苡仁中多糖的含量，但有資料表明薏苡非種仁部位，如：根、莖、葉中也含有豐富的多糖[9]，為了提高薏苡的綜合利用效率，需在今后的實(shí)驗(yàn)中開(kāi)展薏苡非種仁部位有效成分研究。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典[M].2010版．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：353-354．

[2] 胡軍，金國(guó)梁．薏苡仁的營(yíng)養(yǎng)與藥用價(jià)值[J]．中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)，2007，13(6)：57-58．

[3] KROTO HW，HEATH JR，O’BRIEN S C，et a1．c60：Buekmin-sterfullerene[J]．Nature，1985(318)：162-163．

[4] 徐梓輝，周世文，陳衛(wèi)，等．薏苡仁多糖對(duì)糖尿病血管并發(fā)癥大鼠NO及主動(dòng)脈iNOS基因表達(dá)的影響[J]．第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，29(17)：1673．

[5] 呂峰，楊彩霞，姜艷梅，等.不同產(chǎn)地薏苡仁的保健與加工品質(zhì)[J]．福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2008,37(4)：433.

[6] 董群，鄭麗伊，方積年． 改良的苯酚-硫酸法測(cè)定多糖和寡糖含量的研究[J]． 中國(guó)藥學(xué)雜志，1996，31(9):550 -553．

[7] 王貞，徐增萊，史云云,等．不同居群薏苡生物學(xué)與經(jīng)濟(jì)學(xué)性狀分析比較[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009(2):148-149．

[8] 王碩，張世鮑，何金寶，等.薏苡資源性狀的主成分分析和聚類分析[J]. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2013,28(2):157-162.

[9] 劉春蘭，周宜君，巴 特．薏苡多糖的提取及其單糖組分的分析[J]．中央民族大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2005，14(1)：49．

(責(zé)任編輯：宋勇剛)

2014-05-27

云南省科技廳基金項(xiàng)目(2011FB055);云南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014RE002)

楊志清(1968-)，女，云南農(nóng)業(yè)大學(xué)副教授，研究方向?yàn)樗幱弥参镌耘嗯c資源評(píng)價(jià)。

何金寶(1968-)，男，云南省文山州農(nóng)業(yè)科學(xué)院高級(jí)農(nóng)藝師，研究方向?yàn)殡s糧作物品種選育。E-mail：wshejinbao@163.com。

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A

1673-2197(2014)19-0025-02