醒酒護(hù)肝口服液對小鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用

李慶德，鄭錦坤，賴水招，李旭桂，卞益民

（廣東省粵北人民醫(yī)院藥學(xué)部，廣東 韶關(guān) 512026）

醒酒護(hù)肝口服液是由我院藥劑科主任藥師卞益民依據(jù)《脾胃論》治療“酒傷”的辨證理論調(diào)配而成，該組方經(jīng)多年臨床使用，抗醉、防醉效果顯著。本試驗(yàn)中對解酒護(hù)肝口服液的急、慢性酒精性肝損傷進(jìn)行了評價，為臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物與材料

SPF級 KM種小鼠，雌雄各半，體重（20±2）g，許可證號為SCXK粵2006－0015，試驗(yàn)動物合格證號為 0086704，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。ECHO全自動生化儀(愛康，意大利)；BH－2顯微鏡（日本Olympu公司）。醒酒護(hù)肝口服液（粵北人民醫(yī)院藥劑科，批號為20110314）；聯(lián)苯雙酯滴丸（廣州星群藥業(yè)股份有限公司，批號為IF40003）。血清乙醇濃度測定試劑盒（咸寧吉斯生物科技有限公司，批號為20110720）；天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）測定試劑盒（批號為101531），丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）測定試劑盒（批號為110771），均由北京中生北控生物科技股份有限公司提供。56度二鍋頭（北京紅星股份有限公司，批號為20110116）。

1.2 方法

1.2.1 對急性酒精中毒小鼠血中乙醇含量的影響

昆明種小鼠，雌雄各半，體重（20±2）g，按隨機(jī)分組法分為模型對照組、醒酒護(hù)肝口服液高、低劑量組，各12只。適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后，禁食不禁水12 h后，各組小鼠灌胃給予相應(yīng)藥液（模型對照組給予等體積水），每只0.5 mL，30 min后各組小鼠按體重灌胃56度二鍋頭白酒，0.15 mL/10 g。其中醒酒護(hù)肝口服液低劑量為7.5 g/kg，0.3 g/mL；高劑量組 30 g/kg，1.2 g/mL。灌酒 90 min后，摘眼球采血，以3 000 r/min的速率離心10 min，取上層血清，按照乙醇測定試劑盒測定血清中乙醇含量。

1.2.2 對小鼠慢性酒精性肝損傷的保護(hù)作用[1]

昆明種小鼠，雌雄各半，體重（20±2）g，隨機(jī)分為空白對照組、模型對照組、聯(lián)苯雙酯滴丸對照組、醒酒護(hù)肝口服液低、高劑量組，各12只。適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后，除空白對照組外，其余各組動物在早上9:00灌胃給予56度二鍋頭15 mL/kg（灌胃后禁水 60 min），連續(xù) 15 d。同時，每天 15:00各組動物按體重給予相應(yīng)藥物。其中，聯(lián)苯雙酯滴丸組0.003 g/kg，醒酒護(hù)肝口服液低劑量組 7.5 g/kg、高劑量組 30 g/kg。小鼠連續(xù)灌胃給藥 15 d 后，禁食不禁水16 h，給藥后1 h摘眼球取血，以3 000 r/min的速度離心 10 min，取上層血清，測定 AST及 ALT。同時，計算肝指數(shù)并用10%福爾馬林固定肝大葉以進(jìn)行組織病理學(xué)檢查和評分。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 對急性酒精中毒小鼠血中乙醇含量的影響

結(jié)果見表1，可見，醒酒護(hù)肝口服液能加快小鼠體內(nèi)酒精代謝速率，醒酒護(hù)肝口服液高劑量組顯著降低血中乙醇濃度。

表1 醒酒護(hù)肝口服液對急性酒精中毒小鼠血中乙醇含量的影響（±s）

表1 醒酒護(hù)肝口服液對急性酒精中毒小鼠血中乙醇含量的影響（±s）

注：與模型對照組比較， P＜0.05， P＜0.01。

組別模型對照組（n＝12）醒酒護(hù)肝口服液低劑量組（n＝12）醒酒護(hù)肝口服液高劑量組（n＝12）劑量（g/kg）－7.5 30.0乙醇含量（g/L）3.30 ± 1.03 2.92 ± 0.84 2.54 ± 0.91

2.2 對小鼠慢性酒精性肝損傷肝功能的影響

結(jié)果見表2，可見，藥物組均可降低肝損傷小鼠AST及ALT值，減輕酒精對肝組織的損傷。與模型對照組比較，醒酒護(hù)肝口服液高、低劑量組ALT比較有顯著性差異。

2.3 對小鼠酒精性肝損傷組織病理改變和評分的影響

肝臟病理組織學(xué)觀察顯示，模型對照組小鼠連續(xù)15 d灌酒后，肝細(xì)胞明顯水腫、胞質(zhì)疏松淡染，偶見肝索排列紊亂。同時，出現(xiàn)點(diǎn)狀壞死和胞漿嗜伊紅增強(qiáng)等病理性改變。動物灌服給藥后，聯(lián)苯雙酯對照組肝大葉的組織結(jié)構(gòu)基本接近正常，肝細(xì)胞輕度腫脹，肝細(xì)胞索排列整齊，但仍可見少量充血；醒酒護(hù)肝口服液低劑量組肝細(xì)胞腫脹；高劑量組肝大葉排列較齊，腫脹程度減輕，病變范圍變小。

表2 醒酒護(hù)肝口服液對模型小鼠AST及ALT的影響（±s，n＝12）

表2 醒酒護(hù)肝口服液對模型小鼠AST及ALT的影響（±s，n＝12）

注：與正常對照組比較， P＜0.05；與模型對照組比較， P＜0.05。

組別正常對照組模型對照組聯(lián)苯雙酯對照組醒酒護(hù)肝口服液低劑量組醒酒護(hù)肝口服液高劑量組劑量（g/kg）－－0.002 7.5 30.0 AST(U/L)95±23 185±35 156±39 157±35 165±53 ALT(U/L)37±19 122±33 88±17 90±22 95±26肝指數(shù)（%）4.5 ± 0.5 5.0 ± 0.9 4.8 ± 0.7 4.7 ± 1.0 5.0 ± 0.9

2.4 對小鼠酒精性肝損傷組織病理評分的影響

結(jié)果見表3，可見，醒酒護(hù)肝口服液能降低酒精性肝損傷小鼠的病理評分值，減輕酒精對肝損傷的作用，與模型對照組比較，均有顯著性差異。

表3 醒酒護(hù)肝口服液對酒精性肝損傷模型小鼠肝組織評分的影響（±s）

表3 醒酒護(hù)肝口服液對酒精性肝損傷模型小鼠肝組織評分的影響（±s）

注：與正常對照組比較， P＜0.05， P＜0.01；與模型對照組比較，P＜0.05，＃＃P＜0.01。

組別正常對照組（n＝12）模型對照組（n＝12）聯(lián)苯雙酯對照組（n＝12）醒酒護(hù)肝口服液低劑量組（n＝12）醒酒護(hù)肝口服液高劑量組（n＝12）劑量 （g/kg）－－0.002 7.5 30.0 Mean Rank 8.79 40.58 20.86 ＃＃30.11 ＃23.14

3 討論

醒酒護(hù)肝口服液根據(jù)《脾胃論》中辨證理論(“夫酒者大熱有毒，氣味俱陽，乃無形之物也。若傷之，止當(dāng)發(fā)散，汗出則愈矣。其次莫如利小便。二者乃上下分消其濕?！?[2]，在葛花解酲湯的基礎(chǔ)上組方而成。方中枳 子、葛花、草豆 、黨參、干姜，即能辛涼透表達(dá)邪，又通調(diào)水道，有疏風(fēng)解毒的功效[3]，廣泛用于解酒、預(yù)防和治療急性酒精中毒致肝損傷。

本研究結(jié)果表明，醒酒護(hù)肝口服液能加快小鼠血中乙醇代謝速率，降低其濃度，且可降低肝損傷小鼠AST、ALT、肝損傷病理評分值，這對于酒精性肝損傷的防護(hù)起到重要作用。有文獻(xiàn)報道，乙醇過量，人體肝臟首當(dāng)其沖，而乙醇不但可以損傷肝細(xì)胞，還可造成肝臟毛細(xì)膽管的損傷，造成肝細(xì)胞和毛細(xì)膽管的炎癥，使血中的γ－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶明顯升高[4]。解酒護(hù)肝口服液能加快乙醇代謝率，同時降低肝損傷小鼠AST、ALT、肝損傷評分值，對于減輕肝臟負(fù)擔(dān)、減少肝臟損害、保護(hù)肝臟起到了重要作用。

參考文獻(xiàn)：

[1] 姚 銳，焦河玲，鄧虹珠，等.靈芝蒜顆粒解酒效果及其機(jī)制的研究[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2011，24(1):107－108.

[2] 楊 柱.酒傷中醫(yī)治法探討[J].中國民族民間醫(yī)藥雜志，2004，70(5):261－262.

[3] 羅 眈，易自剛，楊力強(qiáng).加減葛花解酲湯對大鼠酒精性肝損傷的防治作用[J].時珍國醫(yī)國藥，2009，20(8):1 926－1 927.

[4] 汪?；?，成 揚(yáng)，胡義揚(yáng)，等.健脾活血方對大鼠急性酒精性肝損傷的干預(yù)作用[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2009，19(4):221－223.