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      產(chǎn)蛋雞免疫程序?qū)β腰S抗體效價(jià)的影響

      2014-04-29 00:44:03藏玉婷張楊王彬宋揚(yáng)孫德君丁國(guó)杰
      中國(guó)動(dòng)物保健 2014年12期
      關(guān)鍵詞:產(chǎn)蛋雞

      藏玉婷 張楊 王彬 宋揚(yáng) 孫德君 丁國(guó)杰

      摘 要:試驗(yàn)用小鵝瘟免疫原按8種免疫程序接種120日齡產(chǎn)蛋雞,分別在接種后不同時(shí)間瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)試驗(yàn)檢測(cè)卵黃抗體效價(jià),篩選出最佳免疫接種程序?;A(chǔ)免疫,產(chǎn)蛋雞每只肌肉注射小鵝瘟活疫苗1.0 mL(5羽份);在基礎(chǔ)免疫后14 d進(jìn)行第2次接種,加強(qiáng)免疫,產(chǎn)蛋雞每只肌肉多點(diǎn)注射小鵝瘟滅活疫苗2.0 mL;在加強(qiáng)免疫后14 d進(jìn)行第3次接種,強(qiáng)化免疫,產(chǎn)蛋雞每只肌肉多點(diǎn)注射小鵝瘟滅活疫苗3.0 mL。

      關(guān)鍵詞:卵黃抗體;抗體效價(jià);產(chǎn)蛋雞;免疫程序

      雞卵黃免疫球蛋白(Immunoglobulin of Yolk,IgY)是母雞受到免疫刺激后選擇性將其血清中相應(yīng)的特異性IgG轉(zhuǎn)移至卵黃中并蓄積而成的[1]。目前在IgY的形成、生物學(xué)特性等方面已研究得比較清楚,并且IgY作為診斷試劑和防治藥物的研究愈來(lái)愈受到關(guān)注[2-3]。為此,本實(shí)驗(yàn)將產(chǎn)蛋雞按不同免疫程序接種免疫原,通過(guò)比較抗小鵝瘟IgY效價(jià)高低來(lái)確定雞群免疫程序,現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      1.1.1 小鵝瘟免疫原 小鵝瘟活疫苗(GD株),疫苗批號(hào)GD201001;小鵝瘟滅活疫苗(H株),疫苗批號(hào)H201001;上述兩種疫苗均由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備。

      1.1.2 試驗(yàn)用產(chǎn)蛋雞 120日齡產(chǎn)蛋雞420只,由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;達(dá)到《生產(chǎn)用產(chǎn)蛋雞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》要求。

      1.1.3 小鵝瘟陽(yáng)性血清 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)王君偉教授惠贈(zèng)。

      1.1.4 小鵝瘟瓊擴(kuò)抗原 參照“小鵝瘟診斷技術(shù)” [4]的方法制備。

      1.2 方法

      1.2.1 試驗(yàn)分組 將400只產(chǎn)蛋雞分成8組,每組50只。同時(shí)另設(shè)健康對(duì)照20只,隔離飼養(yǎng)。

      1.2.2 免疫程序設(shè)定 基礎(chǔ)免疫,其中4組產(chǎn)蛋雞每只肌肉注射小鵝瘟活疫苗1.0 mL(5羽份),另外4組產(chǎn)蛋雞每只肌肉注射小鵝瘟滅活疫苗1.0 mL;加強(qiáng)免疫,在基礎(chǔ)免疫后14 d進(jìn)行第2次接種,產(chǎn)蛋雞每只肌肉多點(diǎn)注射不同劑量小鵝瘟滅活疫苗;強(qiáng)化免疫,在加強(qiáng)免疫后14 d進(jìn)行第3次接種,產(chǎn)蛋雞每只肌肉多點(diǎn)注射不同劑量小鵝瘟滅活疫苗,對(duì)照組與試驗(yàn)組同時(shí)進(jìn)行生理鹽水注射,具體免疫程序見(jiàn)表1。

      1.2.3 抽樣 分別于基礎(chǔ)免疫前、加強(qiáng)免疫前、強(qiáng)化免疫前和強(qiáng)化免疫后14 d 4個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集雞蛋,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)從不同組分別收集雞蛋10枚,打蛋分離卵黃,無(wú)菌混合卵黃液各10 mL作為待檢樣品,用于抗體效價(jià)測(cè)定。

      1.2.4 抗體效價(jià)測(cè)定 在8.0%氯化鈉溶液100 mL中加入1 g優(yōu)質(zhì)瓊脂粉,加熱融化后,加入終濃度為0.01%硫柳汞防腐,澆制凝膠板。在其上按中央1孔外圍6孔打孔,孔徑5 mm,間距3 mm。將抗體作2倍系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),抗原及其抗體加樣量以孔滿為度(約25 μL),加樣后置37~38℃濕盒孵育24~48 h。當(dāng)陰、陽(yáng)性血清對(duì)照成立時(shí),與標(biāo)準(zhǔn)抗原形成白色沉淀線的抗體最大稀釋倍數(shù)即為卵黃抗體的效價(jià)。

      2 結(jié)果

      2.1 不同時(shí)間點(diǎn)抗體測(cè)定結(jié)果

      8組免疫程序接種產(chǎn)蛋雞后不同時(shí)間點(diǎn),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)檢測(cè)卵黃抗體效價(jià),基礎(chǔ)免疫中小鵝瘟活疫苗(GD株)的免疫效果優(yōu)于小鵝瘟滅活疫苗(H株)的免疫效果,而在以活苗作為基礎(chǔ)免疫的試驗(yàn)組中,第4組=第3組>第2組>第1組。第4組和第3組抗體效價(jià)無(wú)差異,確定第3組免疫程序?yàn)樾※Z瘟卵黃抗體最佳免疫程序(表2)。

      2.2 小鵝瘟卵黃抗體最佳免疫程序

      小鵝瘟卵黃抗體最佳免疫程序詳見(jiàn)表3。

      3 討論

      用小鵝瘟免疫原按不同免疫程序接種120日齡產(chǎn)蛋雞,8組免疫程序接種產(chǎn)蛋雞后不同時(shí)間點(diǎn)卵黃抗體效價(jià)檢測(cè),基礎(chǔ)免疫中小鵝瘟活疫苗(GD株)免疫后14 d,瓊擴(kuò)效價(jià)達(dá)到1∶8,而基礎(chǔ)免疫中小鵝瘟滅活疫苗(H株)免疫后14 d,瓊擴(kuò)效價(jià)只達(dá)到1∶4,因此基礎(chǔ)免疫中小鵝瘟活疫苗(GD株)的免疫效果優(yōu)于小鵝瘟滅活疫苗(H株)的免疫效果;而在以活苗作為基礎(chǔ)免疫的試驗(yàn)組中,加強(qiáng)免疫多點(diǎn)注射小鵝瘟滅活疫苗2.0 mL 優(yōu)于1.0 mL;強(qiáng)化免疫接種3.0 mL與4.0 mL免疫效果相同,考慮到節(jié)約疫苗用量以及避免免疫抑制問(wèn)題,因此,加強(qiáng)免疫選擇肌肉多點(diǎn)注射小鵝瘟滅活疫苗3.0 mL。通過(guò)比較接種后不同時(shí)間卵黃抗體效價(jià),確定小鵝瘟卵黃抗體免疫程序?yàn)椋夯A(chǔ)免疫接種,產(chǎn)蛋雞每只肌肉注射小鵝瘟活疫苗1.0 mL(5羽份);加強(qiáng)免疫接種,在基礎(chǔ)免疫后14 d進(jìn)行第2次接種,產(chǎn)蛋雞每只肌肉多點(diǎn)注射小鵝瘟滅活疫苗2.0 mL;強(qiáng)化免疫接種,在加強(qiáng)免疫后14 d進(jìn)行第3次接種,產(chǎn)蛋雞每只肌肉多點(diǎn)注射小鵝瘟滅活疫苗3.0 mL?!觯ň庉嫞旱一郏?/p>

      參考文獻(xiàn):

      [1] Peterson R. Antibody production and transfer to egg yolk in chicken [J].Immunol.1962,89:272.

      [2] 張玲,蒙永祥,等.雞蛋黃免疫球蛋白IgY的特性及其應(yīng)用[J].新中醫(yī),2003(4): 78-79.

      [3] 羅函祿.高免卵黃抗體的應(yīng)用及其展望(二)[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),1997(6): 59-60.

      [4] 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社第一編輯室編. 動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2004,473-478.

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