海南兩種含笑屬植物葉中提取小白菊內(nèi)酯的研究

夏偉 閆浩 杜金風(fēng)

摘 要：大量的研究證實(shí)小白菊內(nèi)酯具有多種藥理作用，包括抗炎免疫抑制作用、抗氧化、抗腫瘤、抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖、抑制破骨細(xì)胞的活性及抑制細(xì)胞核因子-κB的表達(dá)等。文章在對(duì)已有的香籽含笑、白花含笑兩種植物的葉提取物研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行了深入研究，其研究成果為后期海南地區(qū)小白菊內(nèi)酯的研究和開(kāi)發(fā)打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：小白菊內(nèi)酯；提取方法；HPLC-MS分析

小白菊內(nèi)酯（parthenolide， PAR，分子式C15H20O3，相對(duì)分子質(zhì)量248.32，結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1）是從艾菊內(nèi)純化出的一種倍半萜稀內(nèi)酯化合物（sesquiterpene lactone），被證實(shí)為藥理活性最好的成分[1]。小白菊提取物具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性，研究表明，小白菊內(nèi)酯能夠摧毀急性骨髓性白血病細(xì)胞，對(duì)研制白血病新藥大有幫助；可有針對(duì)性地消滅引發(fā)急性和慢性骨髓性白血病的干細(xì)胞，從根本上遏制疾病的發(fā)生；可用于治從偏頭痛到風(fēng)濕性炎等多種疾??；可用于驅(qū)風(fēng)劑，治療腸胃脹；可用于通經(jīng)劑，殺蟲劑（寄生蟲）可以用于減輕腎痛，頭暈和早上嘔吐現(xiàn)象；還可以幫助改善感冒、發(fā)燒時(shí)的不適癥狀等[2]。

就目前情況看，因植物中小白菊內(nèi)酯的含量低且提取工藝復(fù)雜，國(guó)內(nèi)外小白菊內(nèi)酯的價(jià)格都普遍偏高，但需求情況仍呈現(xiàn)出供不應(yīng)求的狀態(tài)，說(shuō)明了小白菊內(nèi)酯在醫(yī)藥領(lǐng)域的需求的是炙手可熱的，且貢獻(xiàn)非常重要。另外，海南省昌江縣霸王嶺保護(hù)區(qū)內(nèi)大量生長(zhǎng)著香籽含笑、白花含笑兩種植物，在已有的研究基礎(chǔ)上利用高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的分析方法對(duì)小白菊內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品與上述兩種植物葉提取物進(jìn)行了分析對(duì)照，確認(rèn)了該兩種植物葉提取物中存在的類似化合物為小白菊內(nèi)酯的事實(shí)。下面對(duì)該兩種植物研究小白菊內(nèi)酯的進(jìn)一步研究過(guò)程及結(jié)果做一綜述。

1 提取方法

將曬14天后的樣品干葉粉碎后，稱取10.0g粉碎置于250ml燒杯中，加入95%乙醇常溫超聲提取30min后取上清液，再重復(fù)2次提取，合并3次提取液。用30ml95%乙醇溶液分3次洗滌濾渣，將洗滌液合并到提取葉中，減壓旋蒸后制得浸膏，浸膏轉(zhuǎn)移至分液漏斗并分別用20mL、30mL、30mL20%的乙醇溶液溶解圓底燒瓶壁上的浸膏殘留，將溶解液依次轉(zhuǎn)移至分液漏斗內(nèi)，用100mL乙酸乙酯萃取溶液三次并合并乙酸乙酯層萃取液，減壓旋蒸得到浸膏。此方法得到香梓浸膏0.0883g，白花浸膏0.1827g[3]。

2 檢測(cè)條件與方法

高效液相檢測(cè)條件，A相為0.1%磷酸，B相為乙腈，A：B=40：60，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，柱溫25℃，進(jìn)樣量為10μL。檢測(cè)相近的保留時(shí)間內(nèi)是否具有類似的吸收峰，通過(guò)HPLC-MS確定待測(cè)樣品中是否含有與標(biāo)準(zhǔn)品相同的化合物。

3 檢測(cè)結(jié)果

3.1 高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)小白菊內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品的分析結(jié)果，如圖2所示：

3.2 高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)香梓含笑葉樣品的分析結(jié)果，如圖3所示：

3.3 高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)白花含笑葉樣品的分析結(jié)果，如圖4所示：

4 圖譜分析

圖2的小白菊內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品HPLC-MS譜圖反應(yīng)了在液相色譜中停留時(shí)間在10分鐘的位置有一明顯的吸收峰，對(duì)該吸收峰位置的化合物進(jìn)行質(zhì)譜分析時(shí)確定該化合物的分子量為231.4；同時(shí)對(duì)香梓含笑葉樣品和白花含笑葉樣品進(jìn)行HPLC-MS分析，在相同吸收峰的位置的化合物情況基本一致，香梓含笑葉樣品及白花含笑葉樣品檢測(cè)分別得到分子量為231.3和231.9，認(rèn)定為同一化合物，即確定該兩個(gè)樣品中均含有小白菊內(nèi)酯。

參考文獻(xiàn)

[1]周惠瓊.小白菊內(nèi)酯的生物特性與藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜志，2009.

[2]李申恒，李小云，等. 小白菊內(nèi)酯及其衍生物藥理作用研究進(jìn)展[J].中成藥，2012.

[3]閆浩，杜金風(fēng)，等.海南含笑屬植物提取小白菊內(nèi)酯的研究[J].生物制藥技術(shù)，2013.

作者簡(jiǎn)介：夏偉（1984-），男，海南人，本科，助教，研究方向：化學(xué)分析、化工生產(chǎn)。

閆浩（1987-），男，內(nèi)蒙古人，本科，助教、技師，研究方向：化學(xué)、自然科學(xué)。

杜金風(fēng)（1983-），女，山東人，研究生，講師、技師，研究方向：自然科學(xué)，該項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。