青海省玉樹州羊泰勒蟲感染血清學(xué)調(diào)查

尕松代

摘 要：為了掌握玉樹州羊群的泰勒蟲感染情況，為羊梨形蟲病的防治提供依據(jù)，我們采用ELISA方法對玉樹州五縣一市的養(yǎng)殖場羊群進行了泰勒蟲感染概況的調(diào)查。結(jié)果顯示768份豬血液樣品中，共檢測到382份血清樣品呈泰勒蟲血清抗體陽性，陽性率為49.74%，處于較高的感染水平，表明羊泰勒蟲病在玉樹州羊群中流行相當(dāng)嚴(yán)重，應(yīng)采取滅蜱和藥物治療羊體內(nèi)原蟲相結(jié)合方法防治羊泰勒蟲病。

關(guān)鍵詞：梨形蟲；感染率；血清學(xué)；ELISA

梨形蟲病又稱“焦蟲病”，可導(dǎo)致山羊和綿羊發(fā)熱、消瘦、黃疸、貧血及血紅蛋白尿等癥狀，甚至導(dǎo)致羊只的死亡。梨形蟲病是一種傳染病，但是其又不同于某些其他的傳染病，不能直接感染山羊或綿羊，必須通過適宜的蜱宿主作為媒介才能傳播[1]。由于媒介蜱的活動具有明顯的區(qū)域性和季節(jié)性，因此羊梨形蟲的流行也具有明顯的地區(qū)性和季節(jié)性[2]。為了掌握玉樹州羊泰勒蟲感染情況及制定有效防治措施，我們采用血清學(xué)的方法對玉樹州的羊泰勒蟲感染情況進行了調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 材料

羊血清泰勒蟲抗體ELISA試劑盒（20111）購自中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)所，主要用于檢測羊血清或血漿中的泰勒蟲特異性抗體，評估羊養(yǎng)殖場泰勒蟲感染狀況。我們于2012年的6月-2013年9月于玉樹州5縣1市的羊養(yǎng)殖場采集血液，每只羊采集3～5 mL血液，待血液凝固析出血清后，以2 500 r/min離心5 min，分離血清，-20℃保存?zhèn)錂z。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備

用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2 μL血清加入198 μL樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。

濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

1.2.2 檢驗方法

使用前將試劑盒置室溫30 min，恢復(fù)至室溫。取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存?？瞻讓φ湛准訕悠废♂屢?00 μL；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100 μL；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100 μL。 混勻，置37℃反應(yīng)30 min后洗滌（扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30 s后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干）。每孔加酶標(biāo)記物100 μL（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30 min后再次洗滌。每孔依次加底物液A、底物液B各50 μL，混勻，37℃避光反應(yīng)10 min。每孔加終止液50 μL，混勻，用空白孔調(diào)零，于450 nm（可用630 nm作參比波長）測定各孔吸光值（OD值）。

1.2.3 結(jié)果判定

試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00，陰性對照平均值≤0.10，臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15；陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUT OFF）者為羊泰勒蟲血清抗體陰性，陽性判定：樣品OD值≥臨界值（CUT OFF）者為羊泰勒蟲血清抗體陽性。

2 結(jié)果

通過本次調(diào)查，我們明確了青海玉樹州五縣一市的羊泰勒屬梨形蟲的感染概況，調(diào)查結(jié)果顯示在玉樹州五縣一市所收集到768份羊血液樣品中，共檢測到382份血清樣品呈羊泰勒蟲血清抗體陽性，羊泰勒蟲血清抗體陽性率為49.74%；玉樹市、雜多縣、稱多縣、治多縣、囊謙縣及曲麻菜的豬弓形蟲血清抗體陽性率分別為47.20%、55.75%、51.66%、44.20%、47.31%及53.57%，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析不同縣、市間的羊泰勒蟲感染的血清學(xué)陽性率無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。

3 討論

當(dāng)前經(jīng)報道感染羊的泰勒蟲共有6個種，分別為萊氏泰勒蟲、分離泰勒蟲、隱藏泰勒蟲、綿羊泰勒蟲、呂氏泰勒蟲及尤氏泰勒蟲。其中萊氏泰勒蟲、分離泰勒蟲、隱藏泰勒蟲和綿羊泰勒蟲主要經(jīng)國外學(xué)者報道，在我國并沒有羊只感染的報道；呂氏泰勒蟲和尤氏泰勒蟲主要在我國的羊群中分布感染，且已證實是兩個新種[2]。在此為了掌握玉樹州羊泰勒蟲感染情況及制定有效防治措施，我們采用血清學(xué)的方法對玉樹州的羊泰勒蟲感染情況進行了調(diào)查。結(jié)果顯示玉樹州五縣一市所收集到768份羊血液樣品中，共檢測到382份血清樣品呈羊泰勒蟲血清抗體陽性，羊泰勒蟲血清抗體陽性率為49.74%，呈現(xiàn)了較高的感染率。

羊泰勒蟲主要由青海血蜱和長角血蜱傳播，據(jù)以往的報道玉樹州優(yōu)勢蜱種也為青海血蜱和長角血蜱，因此滅蜱是防治泰勒蟲病最有效的措施。然而，當(dāng)前該病尚無有效的疫苗進行預(yù)防，藥物防治效果也差強人意，因此根據(jù)蜱傳播羊泰勒蟲病的特征，采取體表及放牧環(huán)境滅蜱和藥物治療羊體內(nèi)病原相結(jié)合的方法是從根本上防治羊泰勒蟲病的有效措施，所以我們應(yīng)每年在蜱活躍季節(jié)對羊進行藥浴，殺滅體表蟲體，同時對羊群進行泰勒蟲感染的藥物預(yù)防。（編輯：狄慧）

參考文獻：

[1] 羅建勛， 殷宏， 劉光遠， 等.我國牛羊梨形蟲病病原的收集與鑒定[J].中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志， 2006， 12（S1）： 48-53.

[2] 馬米玲， 羅建勛， 關(guān)貴全，等.羊泰勒蟲病血清學(xué)調(diào)查[J].中國獸醫(yī)學(xué)報， 2009， 29（12）： 1575-1581.