祝永華 王傳堂 殷銘斌 李樹超
為了保障豬群健康,使其免受豬瘟野毒的攻擊,關(guān)鍵的措施之一,就是選擇使用高效安全的豬瘟疫苗。我場采用選擇若干廠家的豬瘟細(xì)胞苗和脾淋苗進(jìn)行現(xiàn)場試驗,同時結(jié)合實驗室豬瘟抗體檢測結(jié)果,進(jìn)行比較分析和選擇。希望能為其他養(yǎng)殖場選擇疫苗時提供參考。
1 疫苗分組和采樣編號的設(shè)定(表1)
本試驗疫苗分6組:A組、B組、C組、D組、E組、F組。每組選擇4窩仔豬,包括母豬(產(chǎn)后20天免疫),免疫劑量按疫苗說明書使用。
2 豬群分組、免疫、采樣
2.1豬群分組
選擇飼養(yǎng)條件相同、日齡相近哺乳仔豬24窩,隨機分為6組,每組4窩,分別命名為A組、B組、C組、D組、E組、F組。
2.2免疫豬瘟疫苗
分組后,由專職獸醫(yī)按上表疫苗-豬群對應(yīng)組進(jìn)行20日齡、60日齡1頭份對應(yīng)的豬瘟疫苗免疫;
2.3采血樣,分離血清
于20日齡、60日齡、90日齡、5月齡各組隨機采血15份,并對試驗?zāi)肛i全群采血,編號見上表,分離血清。
采樣要求:每份血清清亮,0.5 mL以上,杜絕交叉污染。仔豬每組每次采樣15份,平均分配到每窩,窩中隨機采樣。
3 ELISA檢測
使用全球公認(rèn)的IDEXX公司生產(chǎn)的阻斷ELISA試劑盒,對試驗各組豬瘟抗體進(jìn)行檢測。按試
驗要求嚴(yán)格控制試驗條件,將誤差控制在最小,保證了試驗結(jié)果的有效性。
IDEXX豬瘟抗體檢測試劑盒;FABR:JAN-2012;VENC:31-JAN-2013;REF:99-43220。
樣品排版要求:①把本試劑盒編號為1,試劑盒內(nèi)有5塊板,分別編號為1-1,1-2,1-3,1-4,1-5。②仔豬20日齡樣品用1-1板,60日齡樣品用1-2板,90日齡樣品用1-3板,5月齡樣品用1-4板,母豬樣品用1-5板。
實驗室溫度:完全按照試劑盒的要求,安排一固定熟練技術(shù)人員操作。
酶標(biāo)儀:ANTHOS 17550
4 數(shù)據(jù)處理
根據(jù)實驗室檢測數(shù)據(jù),分組統(tǒng)計分析相對日齡豬瘟抗體陽性百分率、平均抗體阻斷率%、抗體標(biāo)準(zhǔn)差以及變異系數(shù)。
4.1平均阻斷率%變化
從表2和對應(yīng)曲線可以看出:C組免疫空白期最短,D組免疫空白期較短,再就是A組。但90日齡平均阻斷率D組高于C組。90日齡平均抗體阻斷率(%)達(dá)到保護(hù)的有A組、B組、C組、D組,以A、B組最高,但B組免疫空白期太長。
4.2 平均變異系數(shù)變化
從表3和圖2曲線可以看出:變異系數(shù)D組、C組、A組持續(xù)減少,60日齡前C組、D組下降幅度大,D組表現(xiàn)抗體更均勻;A組90日齡抗體最為均勻,80日齡前C組、D組更均勻一些。
5 結(jié)果判定
最理想的免疫模型是仔豬首免選擇C組、D組苗,以縮短保育豬豬瘟免疫空白期;二免選擇A組苗,這樣豬瘟抗體水平可能會更高更均勻。還要進(jìn)一步跟蹤120日齡、150日齡抗體情況,以便對免疫有效持續(xù)期進(jìn)行評估。(編輯:狄慧)