氣相色譜-質(zhì)譜法測定藤茶揮發(fā)油中化學(xué)成分

張世仙，敖克厚，曾啟華，劉 炎

（遵義師范學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院 黔北特色資源應(yīng)用研究實驗室，貴州 遵義 563002）

藤茶（Ampelopsis grossedentata）俗稱端午茶、藤婆茶、山甜茶、龍須茶，為葡萄科、蛇葡萄屬木質(zhì)藤本植物[1]。藤茶富含蛇葡萄素、二氫楊梅素、胡蘿卜素、維生素E等化學(xué)成分及鎂、鐵、鈣等礦物質(zhì)元素[2]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，藤茶具有抗菌消炎、清熱解毒、祛風(fēng)除濕、強筋骨、降血壓、降血脂、保肝護肝、抗癌等功效[3-6]，民間常作為代茶[7]食品。

目前我國對藤茶的研究重點是對湖南、江西、福建、廣西等省份藤茶化學(xué)成分的種類、含量和主要成分的分離、鑒定及相關(guān)分析方法的建立等方面，尤其對藤茶總黃酮及其分離成分二氫楊梅素的研究較為系統(tǒng)和全面[8-12]，然而對具有抗氧化性的藤茶揮發(fā)性成分研究僅見張友勝等[13]報道。藤茶在干制加工過程中，包括氣味在內(nèi)的風(fēng)味組成會發(fā)生一系列的變化，為此，本研究選取藤茶干制品為研究對象，采用固相微萃?。╯olid-phase microextraction，SPME）頂空吸附法[14-15]對屬于省級重點自然保護區(qū)并具有“動植物基因庫”之稱的貴州省石阡縣佛頂山溝壑中藤茶的揮發(fā)油成分進行采樣，運用氣相色譜-質(zhì)譜（gas chromatographymass spectrometry，GC-MS）聯(lián)用技術(shù)對樣品揮發(fā)性成分進行分析，經(jīng)過檢索Nist2005和Wiley275標(biāo)準(zhǔn)譜圖庫的定性分析，確定了63種揮發(fā)性化學(xué)成分，再以峰面積歸一化法計算了各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對含量，目的在于為規(guī)模化開發(fā)和加工貴州省石阡縣的佛頂山藤茶資源提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

藤茶：采挖于貴州省銅仁市石阡縣佛頂山；正己烷（優(yōu)級純）：杭州勝行生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

HP6890/5975C GC/MS聯(lián)用儀：美國安捷倫公司；手動固相微萃取裝置：美國Supelco公司；萃取纖維頭為2 cm-50/30 μm DVB/CAR/PDMS StableFlex。

1.3 方法

1.3.1 藤茶揮發(fā)油的提取

將藤茶干制品碾細，稱取約3.0 g，置于25 mL固相微萃取儀采樣瓶，插入裝有2 cm-50/30 μm DVB/CAR/PDMS StableFlex纖維頭的手動進樣器，在85 ℃左右頂空萃取30 min取出，快速移出萃取頭并立即插入氣相色譜儀進樣口（溫度250 ℃）中，熱解析3 min進樣。

1.3.2 氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）分析

揮發(fā)油的分離鑒定在HP6890/5975C GC-MS聯(lián)用儀上進行。

色譜條件：色譜柱為ZB-5MSI彈性石英毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；柱程序升溫：初始溫度40 ℃，保持2 min；以4 ℃/min速率升溫至220 ℃，保持2 min。汽化室溫度250 ℃；載氣為高純He（99.999%）；載氣流量1.0 mL/min；柱前壓52.5 kPa；不分流進樣；溶劑延遲時間1.5 min；進樣量1 μL。

質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源，離子源溫度230 ℃，電子能量70 eV；四極桿溫度150 ℃，接口溫度280 ℃；發(fā)射電流34.6 μA，倍增器電壓1 206 V；質(zhì)量范圍20～450 m/z。

2 結(jié)果與討論

2.1 藤茶揮發(fā)油成分的總離子流圖

藤茶揮發(fā)油成分的總離子流圖見圖1所示。

圖1 藤茶揮發(fā)油成分的總離子流圖Fig.1 Total ion chromatogram of volatile oil from Ampelopsis grossedentata

由圖1可知，藤茶揮發(fā)油經(jīng)GC-MS分離測定，共得到78個色譜峰。

2.2 艾葉藤茶揮發(fā)油成分

用SPME/GC-MS分離鑒定出艾葉藤茶揮發(fā)油成分見表1。

表1 藤茶揮發(fā)油化學(xué)成分分析結(jié)果Table 1 Chemical composition analysis results of volatile oil from Ampelopsis grossedentata

續(xù)表

由表1可知，采用固相微萃取分離貴州省銅仁市石阡縣佛頂山藤茶的揮發(fā)油，經(jīng)GC-MS分析成分共檢測出63種化合物，占色譜流出峰面積的80.6%。其中烷烴類25種（相對含量占21.45%）、烯烴類15種（相對含量占21.85%）、醛類7種（相對含量占3.08%）、酮類5種（相對含量占2.95%）、苯類5類（相對含量占10.28%）、酯類3種（相對含量占3.65%）、醇類物質(zhì)2種（相對含量占17.01%）、酚類1種（相對含量占0.33%）。

3 結(jié)論

SPME采集是在85 ℃的低溫條件下，利用非極性萃取頭直接頂空、吸附、富集樣品，不破壞香氣成分組成和性質(zhì)，類似用鼻子感覺藤茶氣味的客觀實際，無液-液萃取引起的水、高沸點或非揮發(fā)性物質(zhì)的超載或污染。通過GC-MS分離分析貴州省銅仁市石阡縣佛頂山藤茶的揮發(fā)油主要化學(xué)成分為乙醇、1，3-二叔丁基苯、2-甲基癸烷、2，4-二甲基-1-癸烯、2，4-二甲基-1-庚烯、7-甲基-十一烯、2，6-二甲基壬烷、檜烯、α-蒎烯、甲酸乙酯、十三烷、β-崖柏酮、1-十一烯、2，3，5，8-四甲基-十一烷、4，6-二甲基-十二烷等，為藤茶呈香機理的明晰提供了分子水平上的理論依據(jù)，也為其干制加工方式及深度加工奠定了基礎(chǔ)。

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