前列腺I(mǎi)L-8、COX-2表達(dá)與組織增生伴炎癥的相關(guān)性研究*

陳帝昂俞旭君張培海李廣森常德貴**

1. 成都中醫(yī)藥大學(xué)（成都 610075）; 2. 成都中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院;

3. 成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院泌尿外科

前列腺I(mǎi)L-8、COX-2表達(dá)與組織增生伴炎癥的相關(guān)性研究*

陳帝昂1俞旭君2張培海3李廣森3常德貴1**

1. 成都中醫(yī)藥大學(xué)（成都 610075）; 2. 成都中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院;

3. 成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院泌尿外科

目的觀察良性前列腺增生（BPH）合并前列腺炎癥與前列腺液、前列腺組織中炎癥因子白介素-8（IL-8）、環(huán)氧化酶-2（COX-2）水平的相關(guān)性。方法 80例BPH擬行經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)（TURP）患者，根據(jù)術(shù)后病理學(xué)診斷分為單純性增生組（30例）和增生伴炎癥組（50例），兩組均于術(shù)前進(jìn)行前列腺液IL-8、COX-2含量測(cè)定，術(shù)后前列腺組織IL-8、COX-2含量測(cè)定，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果分別對(duì)前列腺液、前列腺組織中IL-8和COX-2 OD值進(jìn)行組間比較，組間差異性具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；組內(nèi)比較IL-8和COX-2在前列腺液及前列腺組織中的水平變化，趨勢(shì)呈線性正相關(guān)（r＞0.5），其中，IL-8表達(dá)水平在兩種標(biāo)本中呈高度相關(guān)（r＞0.08）。結(jié)論前列腺液中IL-8、COX-2水平能間接反映前列腺組織中IL-8、COX-2水平，通過(guò)檢測(cè)患者前列腺液中IL-8、COX-2水平可以初步判定BPH患者是否合并有前列腺組織學(xué)炎癥。

前列腺增生; 前列腺炎; 白細(xì)胞介素8; 環(huán)氧化酶2

良性前列腺增生癥（benign prostatic hyperplasia, BPH）是導(dǎo)致中老年男性排尿障礙原因中最常見(jiàn)的一種良性病變[1]。慢性前列腺炎（chronic prostatitis, CP）是中青年男性下尿路癥狀的主要原因。二者均是臨床泌尿外科常見(jiàn)疾病。對(duì)前列腺的病理檢查結(jié)果提示，大部分BPH患者伴有前列腺炎癥，因此，我們希望可通過(guò)前列腺液檢測(cè)初步診斷BPH是否伴發(fā)炎癥，為BPH伴炎癥患者的臨床診斷提供新的思路和方法。

資料和方法

一、研究對(duì)象及分組

收集2010年1月至2011年1月，在我院確診BPH并擬行經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)（transurethral resection of the prostate , TURP）的住院患者。期間共納入合符標(biāo)準(zhǔn)的病例共80例，術(shù)后經(jīng)病理檢查分組，其中單純性增生組30例，年齡（75.67±7.16）歲；增生伴炎癥組50例，年齡（67.33±5.66）歲。

二、納入標(biāo)準(zhǔn)

1. 符合《中國(guó)泌尿外科疾病診斷治療指南》（2009）[1]中BPH的診斷標(biāo)準(zhǔn)；

2. 年齡50～80歲；

3. 擬行TURP；

4. 簽署知情同意書(shū)的患者。

三、診斷標(biāo)準(zhǔn)

（一）西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)

參照《中國(guó)泌尿外科疾病診斷治療指南》（2009版）[1]。

（二）病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

IPSS評(píng)分：輕 0～7分；中：8～19分；重：20～35分。

四、排除標(biāo)準(zhǔn)

前列腺腫瘤；既往行前列腺手術(shù)者；長(zhǎng)期留置尿管或手術(shù)前期留置尿管不能行前列腺按摩者；前列腺液難以按摩出或前列腺液達(dá)不到試驗(yàn)要求者；精神病患者；不愿意參加本試驗(yàn)者。

五、研究方法

（一）問(wèn)卷調(diào)查

以國(guó)際前列腺癥狀評(píng)分（IPSS）為主。

（二）標(biāo)本采集與保存

前列腺液的采集與保存：用新潔爾滅消毒尿道外口，患者膝胸位經(jīng)直腸按摩采集前列腺液，并將前列腺液保存于無(wú)菌的Ependorff管中，注意無(wú)菌操作，并儲(chǔ)存于-20℃的冰箱中備用。前列腺組織的采集與保存：將足量的新鮮前列腺電切組織放入10%的甲醛中保存，石蠟包埋切片待測(cè)。

（三）環(huán)氧化酶-2（COX-2）、白介素-8（IL-8）的檢測(cè)

前列腺液IL-8、COX-2采用ABC ELISA法測(cè)定（單位：ng/ml），前列腺組織IL-8、COX-2采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定其光密度（OD值）。操作步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)。IL-8 ELISA試劑盒購(gòu)自深圳達(dá)科為生物技術(shù)有限公司，COX-2 ELISA試劑盒購(gòu)自上海西唐生物科技有限公司；兔IL-8多克隆抗體試劑盒購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司；兔COX-2多克隆抗體試劑盒購(gòu)自美國(guó)SANTA CRUZ公司；鼠抗兔IL-8及COX-2二抗、三抗試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

六、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、一般情況比較

試驗(yàn)總?cè)虢M109例，其中單純性增生組31例，占28.4%，增生伴炎癥組78例，占71.6%；因課題為術(shù)前取前列腺液，根據(jù)術(shù)后病理觀察結(jié)果分組，即在獲取前列腺液前患者已入組課題，而IL-8、COX-2指標(biāo)的測(cè)定對(duì)前列腺液有一定量要求，量過(guò)少則無(wú)法測(cè)定，故被迫剔除，因此單純性增生組剔除1例，增生伴炎癥組剔除28例，總剔出率為26.6%，脫落0例，脫落率0%。符合方案分析集80例。

經(jīng)成組t檢驗(yàn)，兩組患者最大尿流率（maximal urinary flow rate, MUF）比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但在年齡、病程、前列腺體積、IPSS評(píng)分及前列腺特異性抗原方面差異性均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。其中，單純性增生組患者的年齡較增生伴炎癥組患者年齡大，病程更長(zhǎng)，而前列腺體積、IPSS癥狀評(píng)分、前列腺特異性抗原值（prostate specif c antigen, PSA）方面較增生伴炎癥組小，見(jiàn)表1。

二、炎性因子IL-8、COX-2水平比較

經(jīng)成組t檢驗(yàn)，單純性增生組的前列腺液和前列腺組織中IL-8、COX-2水平均低于增生伴炎癥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

三、相關(guān)性研究

經(jīng)線性回歸分析，IL-8、COX-2在前列腺組織中的表達(dá)均與各自組內(nèi)前列腺液的表達(dá)值呈正相關(guān)，詳見(jiàn)表3。

表1 兩組受試者年齡、病程、前列腺體積、IPSS、MUF、PSA差異性比較

表2 兩組IL-8、COX-2分別在前列腺液和前列腺組織中的表達(dá)情況

表3 IL-8、COX-2分別在前列腺液與前列腺組織中含量線性分析

討 論

BPH 是中老年男性最常見(jiàn)的泌尿科疾病。其主要病理變化表現(xiàn)為前列腺尿道周?chē)菩袔У拈g質(zhì)和上皮細(xì)胞的增生。然而，誘發(fā)這一過(guò)程的原因至今尚不完全清楚。近年來(lái)，炎癥在BPH發(fā)病過(guò)程中所起的病理變化引起了人們的關(guān)注。臨床上，中老年男性BPH常合并炎癥[2,3]，BPH與前列腺炎的臨床癥狀有很多重疊之處[4]，且伴有組織學(xué)炎癥的患者其臨床癥狀明顯[5]，因?yàn)檠装Y可以加重纖維化，并促進(jìn)結(jié)節(jié)形成[6]，使前列腺管腔更加狹窄[7]，而通過(guò)抗炎治療后，癥狀能夠得到明顯改善。新近研究[8]亦發(fā)現(xiàn)，免疫球蛋白SIgA及組織受體α++-AR的表達(dá)在伴炎癥BPH標(biāo)本中含量明顯增高。因此學(xué)者普遍認(rèn)為，免疫炎癥反應(yīng)有可能參與了BPH的發(fā)病，炎癥對(duì)BPH的病理變化有促進(jìn)作用。

因此，在臨床上判斷出哪些患者伴有炎癥，對(duì)治療和提高患者生活質(zhì)量具有明顯益處。但當(dāng)前臨床判定往往需要活檢來(lái)證實(shí)，如對(duì)前列腺電切術(shù)后的電切組織進(jìn)行病理學(xué)檢査[9]，具創(chuàng)傷性，故臨床較少采用該方法，因此尋找相對(duì)無(wú)創(chuàng)的檢查方法成為當(dāng)務(wù)之急。本課題通過(guò)觀察前列腺液與前列腺組織中炎性因子的變化相關(guān)性來(lái)進(jìn)行研究，為尋找組織學(xué)炎癥提供依據(jù)。IL-8是Yoshimura等[10]從脂多糖（LPS）、植物凝集素（PHA）刺激人單核細(xì)胞培養(yǎng)上清液中純化而來(lái)，是一種多源性、多功能性的細(xì)胞因子，能夠吸引T淋巴細(xì)胞聚集，導(dǎo)致炎性反應(yīng)發(fā)生，有啟動(dòng)和促進(jìn)炎癥反應(yīng)的作用[11]，是診斷前列腺組織的炎癥狀況最可信和最有預(yù)見(jiàn)性的生化標(biāo)記分子[12]。COX-2是環(huán)氧化酶的一種異構(gòu)酶，它參與了炎癥及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展等多種病理生理過(guò)程。最近研究發(fā)現(xiàn)，包括COX-2在內(nèi)的炎癥網(wǎng)絡(luò)參與了BPH的發(fā)生發(fā)展[13]：炎性細(xì)胞能夠通過(guò)釋放炎性因子誘導(dǎo)COX-2在BPH上皮細(xì)胞中的表達(dá)，COX-2表達(dá)增加前列腺素2（PGE2）的合成，PGE2誘導(dǎo)細(xì)胞增殖并刺激BcL-2蛋白表達(dá)，后者抑制細(xì)胞凋亡，使得細(xì)胞增生，提示COX-2對(duì)BPH有誘導(dǎo)作用。

本文研究結(jié)果顯示，BPH伴炎癥在中老年男性中普遍存在，檢出率高達(dá)71.6%，這與國(guó)內(nèi)外對(duì)BPH伴炎癥的研究現(xiàn)狀基本相符[14]。另外，單純BPH與合并炎癥的患者相比較，合并炎癥者平均年齡較小，病程較短，前列腺體積也較大，PSA值較高，這一系列數(shù)據(jù)也與當(dāng)前其他學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)相一致。

通過(guò)對(duì)前列腺組織與前列腺液的指標(biāo)分析，增生伴炎癥組前列腺組織及前列腺液中IL-8、COX-2水平較單純性增生組高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)線性回歸分析，我們發(fā)現(xiàn)前列腺液中IL-8、COX-2水平變化趨勢(shì)與前列腺組織中IL-8、COX-2水平含量變化趨勢(shì)呈線性正相關(guān)，說(shuō)明前列腺液中IL-8、COX-2水平能間接反映前列腺組織中IL-8、COX-2的水平。

通過(guò)本研究，我們認(rèn)為檢測(cè)患者前列腺液中IL-8、COX-2水平含量并結(jié)合患者癥狀評(píng)分可以初步判定BPH患者是否合并有前列腺組織學(xué)炎癥。但由于研究的樣本量較小，可能存在一定的不確定性，但為進(jìn)一步的研究奠定了基礎(chǔ)。

1 那彥群主編. 中國(guó)泌尿外科疾病診斷治療指南. 2011版.北京:人民衛(wèi)生出版社, 2011: 128-137

2 張江磊, 侯建全, 溫端改, 等. 組織學(xué)前列腺炎與良性BPH 臨床進(jìn)展的關(guān)系. 江蘇醫(yī)藥 2010; 36(4): 406-408

3 Mishra VC, Allen DJ, Nicolaou C,et al. Does intraprostatic inflammation have a role in the pathogenesis and progression of benign prostatic hyperplasia.BJU Int2007; 100(2): 327-331

4 沙鍵, 唐來(lái)坤, 酈俊生, 等. 前列腺增生癥與慢性前列腺炎臨床關(guān)系的研究. 中華現(xiàn)代外科學(xué)雜志 2009; 6(1): 6-8

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8 高衛(wèi)軍, 王養(yǎng)民, 王長(zhǎng)海, 等. 良性前列腺增生合并慢性前列腺炎組織中SIgA、α1-AR的表達(dá)與意義. 中華男科學(xué)雜志 2013; 19(4): 315-320

9 Piovesan AC, Freire Gde C, Torricelli FC. Incidence of histological prostatitis and its correlation with PSA density.Clinics (Sao Paulo)2009; 64(11): 1049-1051

10 Yoshimura T, Matsushima K, Oppenheim JJ,et a1. Neutrophil chemotactic factor produced by lipopolysaccharide (LPS)-stimulated human blood mononuclear leukocytes: partial characterization and separation from interleukin 1 (IL-1).J Immunol1987; 139(3): 788-793

11 Hoheisel G, Izbicki G, Roth M,et al. Pro-inf ammatory cytokine levels in patients with lung cancerand carcinomatous pleurisy.Respiration1998; 65(3): 183-186

12 Penna G, Mondaini N, Amuchastegui S,et al. Seminal plasma cytokines and chemokinesin prostate inf ammation: interleukin 8 as a predictive biomarker in chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome and benign prostatic hyperplasia.Eur Urol2007; 51(2): 524-533

13 Konig JE, Seng T, Allhoff EP,et a1. Analysis of the inf ammatory network in benign prostate hyperplasia and prostate cancer. Prostate,2004,58(2):121-129.

14 Nickel JC, Roehrborn CG, O＇Leary M,et al. Examination of the relationship between symptoms of prostatitis and histological: Baseline data from the REDUCE chemoprevention trial.J Urol2007; 178(3 Pt 1): 896-900

（2013-11-05收稿）

Correlation between the level of IL-8, COX-2 in prostate and benign prostatic hyperplasia with prostatitis*

Chen Diang1, Yu Xujun2, Zhang Peihai3, Li Guangsen3, Chang Degui1**
1. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu, Sichuan 610075 2. Department of Andrology, the Second Aff liated Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; 3. Department of Urology, Aff liated Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

Chang Degui, E-mail: cdg998@sina.com

ObjectiveTo investigate the relationship between benign prostatic hyperplasia (BPH) with inf ammation and level of interleukin-8 (IL-8) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in prostate tissue and expressed prostatic secretions.MethodsA total of 80 BPH patients who would be treated by transurethral resection of the prostate (TURP) were divided into simple hyperplasia group (30 patients) and huperplasia with inf ammation group (50 patients) identif ed by postoperative pathologic diagnosis. Preoperative levels of IL-8 and COX-2 in expressed prostatic secretions and postoperative levels of IL-8 and COX-2 in prostate tissue were detected and comparatively analyzed.ResultsThe levels of IL-8 and COX-2 from prostate tissue and expressed prostatic secretions were higher in huperplasia with inf ammation group than those in simple hyperplasia group (P<0.01). The levels of IL-8 and COX-2 in prostate tissue were positively correlated with those in expressed prostatic secretions(r>0.05), and IL-8 level in prostate tissue was highly correlated to that of expressed prostatic secretions (r>0.8).ConclusionThe levels of IL-8 and COX-2 in prostate f uid could indirectly ref ect the levels of IL-8 and COX-2 in prostate tissue. A BPH patient with prostatitis can be def ned by analyzing the levels of IL-8 and COX-2 in expressed prostatic secretions.

prostatic hyperplasia; prostatis; interleukin-8; cyclooxygenase 2

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.03.008

R 697.33; R 697.32

*資金項(xiàng)目資助: 四川省衛(wèi)生廳課題（編號(hào): 090124）; 四川省人事廳課題（編號(hào): Z006）**

, E-mail: cdg998@sina.com