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    丈夫血治療習(xí)慣性流產(chǎn)的療效研究

    2010-08-15 00:49:03王宗軍張業(yè)霞李睿李澤武臺凡銀
    關(guān)鍵詞:主動免疫習(xí)慣性免疫治療

    王宗軍,張業(yè)霞,李睿,李澤武,臺凡銀

    (菏澤醫(yī)學(xué)??茖W(xué)校,山東 菏澤 274030)

    丈夫血治療習(xí)慣性流產(chǎn)的療效研究

    王宗軍,張業(yè)霞,李睿,李澤武,臺凡銀①

    (菏澤醫(yī)學(xué)??茖W(xué)校,山東 菏澤 274030)

    目的探討淋巴細(xì)胞免疫治療不明原因的原發(fā)性及繼發(fā)性習(xí)慣性流產(chǎn)(統(tǒng)稱為習(xí)慣性流產(chǎn))的療效。方法從59例患者丈夫靜脈血中提取淋巴細(xì)胞進(jìn)行主動免疫治療。結(jié)果妊娠晚期成功率為85%。結(jié)論淋巴細(xì)胞主動免疫療法可提高患者免疫反應(yīng)性,有提高妊娠率,對嬰幼兒無影響等優(yōu)點,不失為治療習(xí)慣性流產(chǎn)的一種簡單易行的方法。

    習(xí)慣性流產(chǎn);免疫療法;淋巴細(xì)胞

    習(xí)慣性流產(chǎn),尤其原因不明的流產(chǎn),目前在國內(nèi)外仍屬產(chǎn)科的難題之一。目前,國內(nèi)治療此類患者仍大部分以常規(guī)安胎保胎治療為主,或中藥安胎治療,但療效不一[1]。近年來,國內(nèi)部分大醫(yī)院開始探討用免疫療法治療不明原因的習(xí)慣性流產(chǎn),但鑒于免疫治療不明原因的習(xí)慣性流產(chǎn)的機(jī)理仍不太清楚,總結(jié)病例較少,故免疫療法治療不明原因的習(xí)慣性流產(chǎn)仍在探討之中。我們自1999年以來,對門診習(xí)慣性流產(chǎn)的病例建立常規(guī)病因篩查,對原因不明的原發(fā)性習(xí)慣性流產(chǎn)病例進(jìn)行主動免疫治療,取得較好療效?,F(xiàn)報告如下。

    1 臨床資料

    1.1 研究對象 本研究對象均為1999年 9月至2009年9月連續(xù)流產(chǎn)3次或3次以上者,年齡在22~39歲之間,平均25.15歲。經(jīng)診斷為習(xí)慣性流產(chǎn)的102例,經(jīng)篩查后,有59例未找出明顯病因,診為原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)。采用從丈夫靜脈血中提取的淋巴細(xì)胞進(jìn)行“主動免疫”保胎治療。其中50例經(jīng)治療后妊娠維持時間 32周以上,妊娠晚期成功率為85%。

    1.2 方法

    1.2.1 一般情況:詳細(xì)詢問患者現(xiàn)病史、既往史、月經(jīng)史、生育史、遺傳史等情況。

    1.2.2 婦科常規(guī)檢查:優(yōu)生四項(TORCH);不孕習(xí)慣流產(chǎn)抗體系列:抗精子抗體(AS-Ab)、抗子宮內(nèi)膜抗體(EM-Ab)、抗卵巢抗體(AO-Ab)、抗心磷脂抗體(ACA-Ab)、抗HCG 抗體(HCG-Ab)、抗透明帶抗體等;激素系列:雌二醇(E2)、孕酮(P)、卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、催乳素(PRL)、睪酮(T)、甲狀腺功能(T3、T4);子宮、輸卵管造影;婦科盆腔B超,婦科常規(guī)檢查及陰道分泌物涂片,丈夫精液檢查,夫妻染色體核型等。排除遺傳、解剖、感染、內(nèi)分泌及自身免疫等引起的習(xí)慣性流產(chǎn)。對HLAABC抗體陰性,年齡22~39歲的59例患者,進(jìn)行了免疫治療。

    1.2.3 方法:夫妻雙方對主動免疫治療有充分的了解,并樂意接受治療。主動免疫原采用丈夫的淋巴細(xì)胞。抽取丈夫肘靜脈血20~30 ml,取淋巴細(xì)胞分離液置于滅菌離心管內(nèi),將丈夫血沿管壁徐徐加入離心管,使血液重疊于淋巴細(xì)胞分離液上(分離液與血液體積比例為1:1)兩者之間有一明顯界面,用水平離心機(jī)以2500 rpm離心30 min。離心后管內(nèi)容物分為三層,上層為血漿,中間層為分離液,底層為紅細(xì)胞和多形白細(xì)胞,在上、中層液體界面可見乳白色混濁的單個核細(xì)胞層,用無菌吸管輕輕插到白膜層,沿試管壁周緣吸取該層單個核細(xì)胞(PBMC),移入另一試管,用無菌生理鹽水洗三遍,2500 rpm離心5 min,最后用生理鹽水恢復(fù)1 ml?;罴?xì)胞數(shù)約為219×107~415×107。于妻子前臂掌側(cè)皮內(nèi)注射5個皮丘,每個皮丘0.2 ml,每次間隔1周,共6次,即孕前注射3次,注射后即可讓其懷孕,發(fā)現(xiàn)懷孕后即可治療,再注射三次,間隔同上。對孕期治療3次后仍有先兆流產(chǎn)癥狀的患者,再增強(qiáng)治療2~4次。

    2 結(jié)果

    接受淋巴細(xì)胞主動免疫治療的患者59例都妊娠,其中9例早中期再次發(fā)生流產(chǎn),妊娠32周以上者50例,成功率為85%。隨訪至今,最大的為9歲,最小的妊娠33周。出生后的嬰幼兒均發(fā)育正常。

    3 討論

    生殖免疫學(xué)認(rèn)為不明原因習(xí)慣性流產(chǎn)絕大多數(shù)與免疫因素有關(guān),有研究認(rèn)為可能是由于胚胎抗原的免疫低反應(yīng)性所致,即患者由于對胚胎同種異體抗原無法產(chǎn)生足夠的封閉抗體而使胚胎得不到免疫防護(hù)而流產(chǎn)[2],或是夫妻雙方HLA不相容性過弱,不能產(chǎn)生胎兒保護(hù)性抗體而使胎兒流產(chǎn)所致[3];還有研究認(rèn)為可能與CD8細(xì)胞數(shù)量下降,CD4/CD8比率上升有關(guān)[4-5]。

    妊娠是成功的半同種異體移植過程,胚胎所攜帶的夫源性HLA抗原能刺激母體免疫系統(tǒng),并產(chǎn)生一類型IgG抗體,稱之為封閉抗體。它存在妊娠婦女血清中,可抑制針對丈夫特異性抗HLA體的淋巴細(xì)胞毒活性,并可抑制異體移植物的排斥[6],原因不明的習(xí)慣性流產(chǎn)婦女血清中缺乏該封閉抗體,但通過注射丈夫的PBMC可刺激機(jī)體產(chǎn)生封閉抗體[7-8]。本研究成功50例中,其中40例治療前HLA-ABC抗體均為陰性,而治療后HLA-ABC抗體均為陽性,說明治療有效。

    不明原因習(xí)慣性流產(chǎn)的發(fā)病機(jī)制及病因尚不完全清楚,目前認(rèn)為絕大多數(shù)與免疫因素有關(guān),但由于檢測一些免疫項目(HLA、CD4、CD8)等的設(shè)備昂貴、技術(shù)要求高,故給診斷帶來困難,從而限制了其治療的開展[5]。我們用PBMC皮內(nèi)注射治療的59例無名原因習(xí)慣性流產(chǎn)患者中,有效率達(dá)85%,方法安全可靠,對孕婦及胎兒未發(fā)現(xiàn)任何負(fù)反應(yīng)。

    用丈夫淋巴細(xì)胞主動免疫法治療原發(fā)性習(xí)慣性流產(chǎn),其免疫反應(yīng)性強(qiáng),發(fā)生快、持續(xù)時間短,是一種簡便可行的方法,目前未發(fā)生明顯的副反應(yīng)。本研究用丈夫的血液分離PBMC進(jìn)行治療,較無關(guān)個體免疫原來說,可減少潛在的血源性感染的危險性[7]。此方法經(jīng)濟(jì)方便,患者易接受,具有較可靠的臨床效果及應(yīng)用價值。

    [1] 李景林.中華醫(yī)學(xué)檢驗全書[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996,659.

    [2] 林其德,趙愛民,周涵春,等.原發(fā)性習(xí)慣性流產(chǎn)的主動免疫治療[J].中華婦產(chǎn)科雜志,1996,31(6):351-356.

    [3] 畢愛華,龔非力.醫(yī)學(xué)免疫學(xué)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,1995.160-162.

    [4] 趙愛民,林其德,周涵春,等.原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化[J].中華婦產(chǎn)科雜志,1994,29(4):227-229.

    [5] 李弘,王懷秀,王靜,等.淋巴細(xì)胞注射治療免疫因素引起的習(xí)慣性流產(chǎn)[J].山西醫(yī)藥雜志,2003,32(4):308-309.

    [6] 任平,章曉梅,嚴(yán)新民,等.淋巴細(xì)胞培養(yǎng)后免疫治療原發(fā)性習(xí)慣性流產(chǎn)的研究[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2003,11(1):83-85.

    [7] 林其德,趙愛民,周涵春,等.原發(fā)性習(xí)慣性流產(chǎn)的主動免疫治療[J].中華婦產(chǎn)科雜志,1996,31(6):351-356.

    [8] 嚴(yán)坤,劉敏,廖丹,等.淋巴細(xì)胞免疫治療習(xí)慣性流產(chǎn) 55例療效研究[J].海南醫(yī)學(xué),2008,19(1):48-49.

    R365;R63

    A

    1008-4118(2010)01-0044-02

    ① 通訊作者

    10.3969/j.issn.1008-4118.2010.01.32

    2009-12-05

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