滋陰方六味地黃丸抗腫瘤研究進(jìn)展*

★ 饒斌 謝斌 余功 劉紅寧

(江西中醫(yī)藥大學(xué) 江西 南昌 330004)

惡性腫瘤是嚴(yán)重危害人類健康的重大疾病，陰虛是該病的基本病機(jī)[1]，臨床采用滋陰方劑可以有效防治惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[2]。近年來，臨床使用經(jīng)典滋陰方六味地黃丸在預(yù)防、治療及輔助治療腫瘤方面均發(fā)揮了較好的療效，這也佐證了“陰虛癌瘤相關(guān)”這一科學(xué)假說[3，4]。本文嘗試從增強(qiáng)免疫、增強(qiáng)抑癌基因表達(dá)、改善細(xì)胞間的物質(zhì)信息通訊、與化療藥物的聯(lián)合作用、防止致癌物所致突變和癌變、對增殖及轉(zhuǎn)移影響、對血管生成的影響等方面，對該方抗腫瘤的作用及機(jī)理作一綜述，以期能更好地了解六味地黃丸在抗腫瘤方面的研究現(xiàn)狀。

1 增強(qiáng)免疫功能

增強(qiáng)機(jī)體免疫功能是六味地黃丸抗腫瘤的主要機(jī)制之一，該方不僅能激活T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞，還能促進(jìn)白細(xì)胞介素(IL)、腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN)細(xì)胞因子等生成，調(diào)節(jié)抗體和補(bǔ)體的生成，對免疫系統(tǒng)發(fā)揮多方面的調(diào)節(jié)作用[5]。藥理學(xué)研究顯示，六味地黃丸藥理活性廣泛，其中包括對機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫均有明顯的增強(qiáng)作用，刺激細(xì)胞免疫及抗體生成反應(yīng)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬及清除細(xì)菌，還能增強(qiáng)紅細(xì)胞的免疫功能等[6]。

六味地黃湯的主要活性部位之一3A對環(huán)磷酰胺(CTX)處理的小鼠、荷瘤小鼠和快速老化小鼠的免疫功能低下具有改善作用及調(diào)節(jié)T、B細(xì)胞的比例或改善其功能[7]。在環(huán)磷酰胺致小鼠免疫低功模型中，觀察六味地黃軟膠囊對特異性免疫機(jī)能的影響，發(fā)現(xiàn)其具有改善T細(xì)胞增殖能力、提高T細(xì)胞數(shù)量，尤其是CD8陽性細(xì)胞,可明顯提高脾細(xì)胞天然殺傷活性，能明顯降低遲發(fā)型超敏反應(yīng)等作用[8]。六味地黃丸對誘發(fā)性肺腫瘤小鼠的脾臟有明顯的增重作用，腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能明顯增強(qiáng)，表明機(jī)體的抗腫瘤免疫功能有所增強(qiáng)[9]。給小鼠灌服六味地黃丸發(fā)現(xiàn)其能對抗環(huán)磷酰胺所致胸腺、脾臟重量減輕,使淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能恢復(fù)至正常水平[10]。

六味地黃丸含藥血清不僅可以促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞的增殖，也可促進(jìn)IL-2的分泌，尚可使IFN水平顯著升高，表明其可通過提高免疫功能達(dá)到抑制腫瘤的目的。六味地黃丸可通過抑制TNF-α過度生成而抑制炎癥瀑布效應(yīng)的產(chǎn)生來延緩腫瘤發(fā)生發(fā)展[9]。在對惡性腫瘤患者的臨床治療中，發(fā)現(xiàn)六味地黃丸對惡性腫瘤在化療中具免疫增強(qiáng)作用，可使外圍血WBC、PLT降低程度變小，血清IgA、IgG、IgM含量增高[11]。

2 增強(qiáng)抑癌基因表達(dá)

越來越多的證據(jù)表明，抑癌基因在抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及改變腫瘤細(xì)胞能量代謝等方面都起重要作用。如果說癌基因是難以駕馭的細(xì)胞生長加速器，那么抑癌基因就是細(xì)胞生長的制動(dòng)器。若抑癌基因發(fā)生了突變或缺失，則有可能形成惡性腫瘤。在這些抑癌基因中，人們研究最多的是p53基因，它又被稱為人類基因組衛(wèi)士。

近年來的研究證實(shí)，細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控是癌變的重要原因。p53基因蛋白抑制腫瘤的機(jī)理主要是使細(xì)胞停留在G1或G2期，導(dǎo)致?lián)p傷的細(xì)胞得以修復(fù)，同時(shí)也可以誘發(fā)細(xì)胞凋亡，去除變異細(xì)胞，以此來達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增生的目的[12，13]。p53基因蛋白可通過調(diào)控腫瘤細(xì)胞的某些操縱基因而阻止腫瘤細(xì)胞的生長和增殖，最后引起腫瘤細(xì)胞的凋亡[14]。研究通過氨基甲酸乙酯使p53基因表達(dá)下降誘發(fā)小鼠肺腺瘤，發(fā)現(xiàn)六味地黃湯能夠通過一定的途徑維持p53基因的表達(dá)，從而降低小鼠肺腺瘤的發(fā)病率[15]。

3 改善細(xì)胞間的物質(zhì)、信息通道

縫隙連接(GJ)是存在于細(xì)胞之間進(jìn)行物質(zhì)及信息交換的通道，其對細(xì)胞增殖、分化及機(jī)體的生長發(fā)育至關(guān)重要[16]?？p隙連接蛋白(Cx)即為組成GJ通道的結(jié)構(gòu)蛋白,是進(jìn)行細(xì)胞間通訊的物質(zhì)基礎(chǔ)。Cx與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[17]，Cx的正?；虍惓１磉_(dá)，可直接影響到細(xì)胞組織及器官的功能狀態(tài)?？p隙連接細(xì)胞間通訊(GJIC)可使自殺基因系統(tǒng)的毒性產(chǎn)物能通過GJ通道傳導(dǎo)到未轉(zhuǎn)染自殺基因的細(xì)胞中而引起旁殺傷效應(yīng)[18]。自殺基因治療聯(lián)合補(bǔ)腎方藥六味地黃丸在體內(nèi)和體外均能起到協(xié)同增效的作用[19，20]，其增效作用與提高腫瘤細(xì)胞的Cx表達(dá)相關(guān)。

4 與化療藥物的聯(lián)合作用

化療是惡性腫瘤的主要治療手段之一。但在化療過程中幾乎所有患者均可出現(xiàn)各種毒副反應(yīng)，導(dǎo)致機(jī)體損害、體質(zhì)虛衰、免疫功能下降等。六味地黃丸輔助化療藥物治療惡性腫瘤，既可使化療藥物增效，又能降低化療毒副作用[21]。該方可促進(jìn)骨髓干細(xì)胞和淋巴組織增生，增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬功能，具有明顯的免疫功能雙向調(diào)節(jié)作用，防止化療藥物對心、肝、腎的損害[22，23]。

多數(shù)化療藥物在大劑量應(yīng)用時(shí)輕重不等地引起腎功能損害，臨床觀察發(fā)現(xiàn)六味地黃丸配合化療可使BUN、Cr增高及蛋白尿發(fā)生率降低，說明六味地黃丸能較好的保護(hù)腎的正常細(xì)胞功能，減輕化療引起的腎組織器官損害[4]?；熗鄷?huì)破壞造血系統(tǒng)功能，六味地黃丸加化療可使外周血Hb、WBC、PLT明顯降低，說明六味地黃丸具有保護(hù)和增強(qiáng)患者造血系統(tǒng)功能的作用[11]。

此外，該方對阿霉素治療小鼠肝癌實(shí)體型及腹水型的協(xié)同系數(shù)均小于1，說明六味地黃湯對阿霉素治療小鼠肝癌實(shí)體型及腹水型均具有協(xié)同作用[24]。在治療復(fù)發(fā)和難治性多發(fā)性骨髓瘤(MM)中發(fā)現(xiàn)，聯(lián)用六味地黃丸、三氧化二砷和VitC治療MM具有良好的療效，且毒副反應(yīng)小，患者可耐受，不影響治療，是治療復(fù)發(fā)或難治性MM的有效方案[25]。

六味地黃湯能拮抗CTX的遺傳毒性，抑制CTX誘發(fā)的微核和姐妹染色單體互換。其機(jī)制之一可能是通過提高機(jī)體超氧化物歧化酶(SOD)活性、增強(qiáng)自由基清除能力，減輕自由基對DNA的損傷。對使用CTX的腫瘤患者選用六味地黃湯作為輔助藥物，既能發(fā)揮CTX的抗腫瘤作用，又可減輕其遺傳毒性，具有積極的意義[26]。

5 降低化學(xué)致癌物引起的突變與癌變

人類癌癥的80%～90%是受環(huán)境因素影響而產(chǎn)生的，其中化學(xué)致癌物的數(shù)量最多，危害最大，是環(huán)境中的主要致癌因素。研究證實(shí)，六味地黃方藥(湯、丸)可以預(yù)防致癌物所導(dǎo)致的突變和癌變，抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖以及抑制腫瘤生長[27]。六味地黃丸中硒含量較高，能防止誘發(fā)各種癌癥的過氧化酶和自由基的生成，能延長荷瘤小鼠的存活時(shí)間，降低亞硝胺誘發(fā)腫瘤的機(jī)會(huì)[28]。

6 對增殖、轉(zhuǎn)移的影響

腫瘤細(xì)胞的主要特性是處于無限增殖狀態(tài)，其增殖與凋亡失去平衡，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖是治療腫瘤的重要研究方向之一。六味地黃湯體內(nèi)給藥可顯著提高荷瘤小鼠生存率，抑制腫瘤生長[29]。在體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，六味地黃丸含藥血清對人肝癌細(xì)胞BEL-7402、肺癌細(xì)胞A549均有明顯的抑制作用[30]。

能夠局部浸潤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤又一重要特點(diǎn)，也是惡性腫瘤導(dǎo)致死亡的主要原因[31]。六味地黃丸具有不同程度改善荷瘤小鼠存活期的作用，對實(shí)體型肝癌移植腫瘤體積以及腫瘤肺轉(zhuǎn)移數(shù)目等也有一定改善作用[32]。

7 對血管生成的影響

腫瘤的增殖、浸潤轉(zhuǎn)移等均與腫瘤的血供密切相關(guān)，腫瘤患者體內(nèi)有多種血管生成因子，其在腫瘤血管生成的過程中起到了誘導(dǎo)和促進(jìn)的作用[33]。VEGF是誘導(dǎo)腫瘤血管形成的作用最強(qiáng)、特異性最高的血管生長因子，且無論在體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞中，還是在腫瘤細(xì)胞接種荷瘤裸鼠動(dòng)物模型的腫瘤細(xì)胞中，抑或是在人體癌組織中均有VEGF的高表達(dá)[34，35]。

在對原發(fā)性肝癌患者的治療中，運(yùn)用由六味地黃丸及四君子湯加減組成的補(bǔ)腎健脾方，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎健脾方能夠有效改善原發(fā)性肝癌患者的細(xì)胞免疫功能，并可顯著抑制血清VEGF的表達(dá)水平[36]。

8 小結(jié)及展望

在人類與腫瘤的斗爭長史中，一種種抗腫瘤機(jī)制被發(fā)現(xiàn)，一類類抗腫瘤藥物被研制，這些人類對腫瘤的戰(zhàn)斗成果雖已充分的運(yùn)用到了治療腫瘤的臨床實(shí)踐中，但所取得的成效卻不盡人意。

惡性腫瘤在發(fā)病早期常無明顯癥狀，多數(shù)患者明確診斷時(shí)已是晚期，姑息治療是惟一能夠提高患者生活質(zhì)量，延長生命的治療方法。因此，深入剖析惡性腫瘤的發(fā)病原因和病理機(jī)制，探尋相應(yīng)的防治方法，特別是預(yù)防方法，已成為降低惡性腫瘤發(fā)病率和死亡率的關(guān)鍵。六味地黃丸是滋陰經(jīng)典名方，在臨床上已廣泛用于腫瘤的預(yù)防與治療，尤其適用于正常人群中嗜好煙酒、心情郁悶或中醫(yī)體質(zhì)分類中的火體質(zhì)等有陰虛傾向者，其或是未來腫瘤病證的高發(fā)群體。上工不治已病治未病，在腫瘤的防治中，理應(yīng)對經(jīng)典滋陰名方六味地黃丸抗腫瘤的機(jī)理作深入的研究，以期早日攻克惡性腫瘤這一頑疾。

[1]孫有智,劉紅寧,朱衛(wèi)豐,等.“陰虛癌瘤相關(guān)”假說的提出及其意義[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008,20(4):1-5.

[2]鄭里翔,張玉仁,鄧科穗,等.二至丸對陰虛陽虛荷瘤小鼠腫瘤生長的影響[J].陜西中醫(yī),2008,29(12):1 678-1 680.

[3]林業(yè)勤,李玉新,張瑾熔,等.六味地黃湯化裁配合放射治療食管癌的臨床研究.中華腫瘤防治雜志,2009,13(18):1 428-1 430.

[4]葛彩鳳.六味地黃丸減輕消化道腫瘤化療毒副反應(yīng)34例觀察與護(hù)理.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2007,16(9):1 283-1 284.

[5]張靜,單保恩.中藥抗腫瘤的免疫學(xué)調(diào)節(jié)作用和作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國免疫學(xué)雜志,2006,22(4):385-388.

[6]吳煒景,李立平,趙亞剛.六味地黃丸免疫調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,20(32):4 180-4 182.

[7]楊勝,張永祥,呂曉東,等.六味地黃湯活性部位3A的免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)制研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2001,21(2):119-122.

[8]馬健,樊巧玲,龔婕寧,等.六味地黃湯對大鼠巨噬細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用[J].中藥藥理與臨床,1999,15(4):5.

[9]郭慧君,朱金華,劉春花,等.不同滋陰中藥對小鼠誘發(fā)性肺腫瘤發(fā)生及抗腫瘤免疫功能的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18(13):226-229.

[10]賴益忠,黃倬偉.六味地黃丸(湯)現(xiàn)代研究新進(jìn)展.中醫(yī)藥信息,1999,16(1):13-15.

[11]夏清山,張旭升.六味地黃丸在化療中增效減毒作用的臨床觀察[J].湖北中醫(yī)雜志,2005,27(11):14.

[12]Apollonia Tullo, Anna Maria D'Erchia, Elisabetta Sbisa.Methods for screening tumors for p53 status and therapeutic exploitation[J].Expert Rev Mol Diagn,2003,3(3),289-301.

[13]Bert Vogelstein, David Lane，Arnold J Levine.Surfing the p53 network[J].Nature,2000,408(6810),307-310.

[14]Sioris T，Husgafvel-Pursiainen K，Karjalainen A,et al.Survival in operable non-small-cell lung cancer: Role of p53 mutations, tobacco smoking and asbestos exposure[J].International Journal of Cancer,2000,86(4):590-594.

[15]李惠,金亞宏,姜廷良.六味地黃湯對小鼠誘發(fā)性肺腺瘤P53基因表達(dá)的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,1997,3(3):17-19.

[16]Juan C SEAZ，Viviana M Berthoud，Maria C Branes，et al.Plasma Membrane Channels Formed by Connexins: Their Regulation and Functions[J].Physiological Reviews,2003,83(4):1 359-1 400.

[17]Trosko J E,Ruch R J.Cell-Cell communication in carcinogenesis[J].Frontiers in Bioscience,1998,15(3):208-236.

[18]邢毅飛,魯功成.間隙連接細(xì)胞間通訊與胸苷激酶系統(tǒng)“旁觀者效應(yīng)”的關(guān)系及其調(diào)控[J].細(xì)胞生物學(xué)雜志,2004,15(2):162-166.

[19]杜標(biāo)炎,王慧峰.六味地黃丸對小鼠移植性肝癌自殺基因治療的增效作用[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2007,12(2):132-137.

[20]杜標(biāo)炎,張愛娟.自殺基因系統(tǒng)聯(lián)合六味地黃丸對肝癌細(xì)胞殺傷的協(xié)同作用[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2008,25(4):319-324.

[21]高芳,王大慶.六味地黃丸在腫瘤化療中的應(yīng)用[J].中國中醫(yī)急癥,2010,16(2):210-211.

[22]趙良輔,嚴(yán)述常.六味地黃湯對誘變和自發(fā)腫瘤的抑制作用[J].中西醫(yī)結(jié)合雜志,1990,10(7):433-435.

[23]許繼平,周振鶴.六味地黃口服液抗腫瘤化療藥物毒副作用的研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,1992,12(2):734-737.

[24]楊義明,杜鋼軍.六味地黃湯及其拆方對阿霉素治療小鼠試驗(yàn)性肝癌的影響[J].河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2009,28(2):129-132.

[25]付慧穩(wěn),徐秀芹,權(quán)學(xué)蓮,等.三氧化二砷聯(lián)合六味地黃丸及維生素C治療復(fù)發(fā)和難治性多發(fā)性骨髓瘤療效觀察[J].河北醫(yī)藥,2009,31(10):1 236.

[26]王明麗,趙鳳鳴,周坤福,等.六味地黃湯對環(huán)磷酰胺遺傳毒性的拮抗作用[J].海峽藥學(xué),2000,12(2):19，54.

[27]郭明興.六味地黃方藥在腫瘤化療患者中的應(yīng)用[J].山東醫(yī)藥,2010,50(39):116-117.

[28]杜標(biāo)炎.腎陰虛造型及補(bǔ)腎中藥對小鼠免疫功能的影響[J].廣州中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1995,12(4):30-32.

[29]王高升.六味地黃丸(湯)的藥理學(xué)研究進(jìn)展[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2003,22(8):561-562.

[30]趙益,羅蓉.六味地黃丸對腫瘤細(xì)胞抑制作用的研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2011,22(6):598-602.

[31]Haynes BP,Straume AH,Geisler J,et al. Intratumoral Estrogen Disposition in Breast Cancer[J].Clin Cancer Res,2012,16(6):1 790-1 801.

[32]張棟,孫靜,孫金芳,等.中藥干預(yù)對荷瘤小鼠腫瘤生長及轉(zhuǎn)移的影響[J].中醫(yī)藥信息,2010,27(1):103-106.

[33]Carmeliet P.Angiogenesis in lige,disease and medicine[J].Nature，2005,438(70):932-936.

[34]Neufeld G, Cohen T,Gengrinovitch S,et al.Vascular endothelial growth factor(VEGF) and its receplors[J].FASEB，1999,13(1):9-22.

[35]Volm M, KoomagiR, Mattern J,et al.PD-ECGF,b FGF, and VEGF expression in non small cell lung carcinomas and their as-sociation with lymph nodemetastasis[J].AnticancerRes,1999,19(1):65-112.

[36]羅春蕾,周榮耀.補(bǔ)腎健脾方治療肝腎陰虛兼脾氣虛肝癌30例[J].中醫(yī)研究,2010,23(6):30-32.