上海市市售青蛙寄生蠕蟲感染情況初步調(diào)查

朱順海，董 輝，趙其平，吳 迪，吳有陵,3，李榴佳,3，韓紅玉，梁思婷,3，李 莎，翟 頎，楊斯涵,4，裴恩樂，黃 兵,5

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所 農(nóng)業(yè)部動物寄生蟲學(xué)重點實驗室，上海 200241；2.上海市野生動植物保護管理站，上海 200023；3.上海師范大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，上海 200234；4.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明 650201；5.江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心，揚州 225009）

上海市市售青蛙寄生蠕蟲感染情況初步調(diào)查

朱順海1，董 輝1，趙其平1，吳 迪2，吳有陵1,3，李榴佳1,3，韓紅玉1，梁思婷1,3，李 莎1，翟 頎1，楊斯涵1,4，裴恩樂2，黃 兵1,5

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所 農(nóng)業(yè)部動物寄生蟲學(xué)重點實驗室，上海 200241；2.上海市野生動植物保護管理站，上海 200023；3.上海師范大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，上海 200234；4.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明 650201；5.江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心，揚州 225009）

為了解上海市市售青蛙蠕蟲的感染情況，對52只黑斑蛙（Rana nigromaculata）進行剖檢，按臟器檢查、收集寄生蟲蟲體，統(tǒng)計寄生蟲的感染率與感染強度。結(jié)果顯示，青蛙蠕蟲感染率為90.38%，平均感染強度為20.21條。不同種類寄生蟲的感染情況明顯不同，線蟲、吸蟲、絳蟲和棘頭蟲的感染率分別為50.00%、86.54%、17.31%和51.92%，感染強度分別為3.38、15.00、5.11和5.22條。不同臟器寄生蟲的感染情況不同，腸道的寄生蟲感染率最高，為90.38%；腸道、肌肉與皮下寄生蟲的感染強度分別為15.34和11.38條，明顯高于其他器官。不同種類寄生蟲的寄生蟲部位明顯不同，線蟲、吸蟲和棘頭蟲主要來源于腸道，絳蟲主要來源于肌肉與皮下。通過對檢出蟲體的形態(tài)進行初步觀察，吸蟲、線蟲、絳蟲和棘頭蟲種類分別約有6、3、1和2種，但具體種類尚需進一步鑒定。本調(diào)查結(jié)果為掌握上海市市售青蛙寄生蟲感染狀況和做好寄生蟲病防控提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

青蛙；黑斑蛙；蠕蟲；寄生蟲；調(diào)查

青蛙是兩棲綱（Amphibia）、無尾目（Anura）、蛙科（Ranidae）動物的統(tǒng)稱，本科現(xiàn)有50余屬600多種，幾乎遍及各大洲[1]，其中以蛙屬（Rana)最常見。我國現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)蛙屬有60種，其中黑斑蛙（R.nigromaculata）是在我國大陸分布最廣的兩棲動物之一，從華北北緣到華南北緣的平原和丘陵地區(qū)最常見，數(shù)量很多[2]。青蛙主要以多種昆蟲為食，能適應(yīng)陸地和水域的不同生存條件，生活環(huán)境多變，使其感染寄生蟲可能性的幅度相應(yīng)擴大[3]。目前，國內(nèi)對青蛙寄生蟲感染情況的調(diào)查主要集中在裂頭蚴[4-16]、廣州管圓線蟲[16,17]等人獸共患寄生蟲，至今尚未見有系統(tǒng)性調(diào)查報道。為了解上海市場青蛙寄生蟲的感染情況，掌握青蛙寄生蟲感染率與感染寄生蟲的類別，我們對52只青蛙的寄生蠕蟲感染情況進行了調(diào)查，現(xiàn)將調(diào)查結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對象黑斑蛙（R.nigromaculata）52只，從市場上購買獲得。

1.2 檢查方法將青蛙編號，用解剖針搗壞脊髓將其處死。用剪刀縱向剪開腹腔，取出心臟、肺臟、肝臟、胃、腸道等臟器，分別置于培養(yǎng)皿內(nèi)，加入適量的生理鹽水，用鑷子輕輕將內(nèi)臟撕碎，靜置15min，在顯微鏡下逐個檢查各器官，其中，肺臟、肝臟、腸道另取適量組織涂片檢查。分離皮膚，檢查皮下與肌肉中的寄生蟲情況。

1.3 蟲體的初步確定檢查中發(fā)現(xiàn)的寄生蟲，用數(shù)碼相機（Nikon D80）或帶顯微成像分析系統(tǒng)（NTE-Elements D 2.20）的顯微鏡（Nikon ECLIPSE 50i）進行活體拍照或錄相，參考文獻[18]進行種類的初步確定，按臟器計數(shù)檢出的各類寄生蟲數(shù)量，按常正山[19]的方法分別保存于有固定液的小瓶中，以備制片染色鑒定。

2 結(jié)果

2.1 寄生蟲總體感染情況結(jié)果見表1。47只青蛙發(fā)現(xiàn)有寄生蟲，感染率為90.38%，共檢獲950條寄生蟲，平均感染強度為20.21條。其中，線蟲感染率為50.00%，共檢獲88條，占蟲體總數(shù)的9.26%，平均感染強度為3.38條。吸蟲感染率為86.54%，共檢獲675條，占蟲體數(shù)的71.05%，平均感染強度為15.00條。絳蟲（成蟲與裂頭蚴）感染率為17.31%，共檢獲46條，占蟲體總數(shù)的4.85%，平均感染強度為5.11條。棘頭蟲感染率為51.92%，共檢獲141條，占蟲體總數(shù)的14.84%，平均感染強度為5.22條。

表1 上海市市售青蛙寄生蠕蟲感染情況Table 1 Prevalence and intensify of helminths infection in commercial frogs in Shanghai

2.2 按臟器統(tǒng)計寄生蟲感染情況腸道寄生蟲的感染率為90.38%，共檢出721條寄生蟲，其中吸蟲占69.90%、線蟲占10.54%、棘頭蟲占19.56%，平均感染強度為15.34條。肺臟感染率為40.38%，共檢出35條寄生蟲，其中線蟲占31.43%、吸蟲占68.57%，平均感染強度為1.67條。胃感染率為1.92%，共檢出2條吸蟲，平均感染強度為2條。肝臟感染率為3. 85%，共檢出9條絳蟲，平均感染強度為4.50條。肌肉與皮下感染率為30.77%，檢出182條寄生蟲，其中絳蟲（成蟲與裂頭蚴）占79.67%、吸蟲占20.33%，平均感染強度為11.38條。心臟感染率為1.92%，檢出1條線蟲，平均感染強度為1條（見表2）。

表2 上海市市售青蛙各臟器寄生蠕蟲感染情況Table 2 Prevalence and intensify of helminths infection in different organs of commercial frogs in Shanghai

2.3 蟲體的初步確定通過對檢出蟲體的形態(tài)進行觀察，初步確定感染青蛙的寄生蠕蟲有吸蟲6種（圖1A～F）、線蟲3種（圖1G～I）、絳蟲（裂頭蚴）1種（圖1J）以及棘頭蟲2種（圖1K～L）。

圖1 上海市市售青蛙寄生蠕蟲的蟲種形態(tài)Fig.1 Species of helminths in commercial frogs from Shanghai

3 討論

本文對上海市場的52只青蛙寄生蠕蟲感染情況進行了調(diào)查，結(jié)果顯示，上海青蛙的寄生蟲感染率高（90.33%），感染強度較大（20.12條），種類多（約有12種），感染率明顯高于已有報道。劉鳳霞等[20]對長白山林區(qū)150只中國林蛙體內(nèi)寄生蟲感染情況進行了調(diào)查，發(fā)現(xiàn)感染率為73.33%。祝華[21]研究了環(huán)境污染對蛙類腸道蠕蟲的影響，發(fā)現(xiàn)天津漢沽地區(qū)重、輕、微染區(qū)金線蛙寄生蟲的感染率分別為0%（0/100）、24%（24/100）和10%（10/100）。上海市青蛙體內(nèi)不同種類寄生蠕蟲的感染情況和寄生部位明顯不同，在發(fā)現(xiàn)的吸蟲、線蟲、絳蟲、棘頭蟲等4類寄生蟲中，吸蟲的感染率和感染強度最高，種類最多，說明吸蟲是上海市青蛙最常見的寄生蠕蟲。這可能與青蛙的生活與捕食習(xí)性有關(guān)，青蛙能適應(yīng)陸地和水域的不同生存條件，生活環(huán)境多變，使其感染寄生蟲可能性的幅度相應(yīng)擴大；同時青蛙主要以多種昆蟲為食物，而昆蟲是許多吸蟲的中間宿主[18]。

調(diào)查結(jié)果顯示，上海市青蛙吸蟲的感染率為86.54%，平均感染強度為15.00條，種類有6種，主要來自腸道（74.67%），其次是肌肉與皮下（21.48%），偶見肺吸蟲，感染率和感染強度均高于已有報道。孫希達等[22]從浙江青蛙鑒定出2科45屬5種吸蟲，感染率在6.25%～25%（3/48～12/48），感染強度在1～16條。祝華[21]發(fā)現(xiàn)天津漢沽地區(qū)重、輕、微污染區(qū)金線蛙吸蟲的感染率分別為0%、12%和4%。劉鳳霞等[20]在長白山林區(qū)150只中國林蛙體內(nèi)發(fā)現(xiàn)3種吸蟲，感染率在2.67%～10.67%，平均感染率在0.03～0.59條/只，主要來自腸道和膀胱。

本次調(diào)查，上海市青蛙線蟲的感染率50.00%，與劉鳳霞等[20]的45.33%～67.33%相當，高于祝華[21]的0～12%，低于何鑫[23]的96.2%（434/451）。平均感染強度為3.38條，與劉鳳霞等[20]的2.27～9.25條相當。約有3種，與劉鳳霞等[20]的3種、何鑫[23]的2種相當。主要來源于腸道（86.36%），偶見于肝臟和心臟，與何鑫[23]的相似，但不同于劉鳳霞等[20]（主要來自肺部）。

上海市青蛙肌肉中發(fā)現(xiàn)有裂頭蚴，感染率17.31%，感染強度為5.11條，感染率與崔晶等[14]報道河南的15.02%（728/4848）、蔣紅濤等[12]報道貴州的18.04%（882/4888）相當，而明顯低于戚日玲等[11]報道廣州市的66.46%（850/1279）、張小萍等[15]報道上海的31.37%（32/102）、謝文海等[9]報道廣西玉林市的77.63%（59/76）、孫占峰等[8]報道江西上饒市的77.03%（114/148）、徐衛(wèi)民等[13]報道杭州市的31.15%（209/671）；感染強度為5.11條/只，與崔晶等[14]的5.54條/只、謝文海等[9]的7.20條/只相當，而高于戚日玲等[11]的3.24條/只、蔣紅濤等[12]的2.64條/只以及徐衛(wèi)民等[13]的1.41條/只。

上海青蛙棘頭蟲約有2種，感染率為51.92%，感染強度為5.22條，均低于已有報道。汪彥愔[24]調(diào)查發(fā)現(xiàn)黑眶蟾蜍偽棘頭蟲的感染率為70%，感染強度為l～32條。棘頭蟲全部來自腸道，說明它是專一性寄生的。

上海市青蛙中初步確定的寄生蠕蟲種類有12種，但具體種類以及有無人獸共患寄生蟲等尚需進一步鑒定。已有研究表明，青蛙可作為廣州管圓線蟲、曼氏裂頭蚴、斯氏貍殖吸蟲等人獸共患寄生蟲病的轉(zhuǎn)續(xù)宿主，其感染率分別在34.72%～66.67%[16,17]、15.02～77.03%[4-16]、13.3%[25]。由于我國民間有吃蛙的習(xí)慣，以及很多農(nóng)村地區(qū)有用青蛙肉皮治療瘡癤等舊習(xí)，近年來，常有由于生食或半生食青蛙以及敷貼青蛙皮引起的裂頭蚴病的報道[26-32]。因此，改變不良的飲食衛(wèi)生習(xí)慣，杜絕使用并無治療效果的民間偏方，是防止青蛙寄生蟲感染人的重要措施。

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A PRELIMINARY INVESTIGATION ON THE PREVALENCE OF HELMINTHS IN FROGS AT SHANGHAI FARMERS’ MARKETS

ZHU Shun-hai1, DONG Hui1, ZHAO Qi-ping1, WU Di2, WU You-ling1,3, LI Liu-jia1,3, HAN Hong-yu1, LIANG Si-ting1,3, LI Sha1, ZHAI Qi1, YANG Si-han1,4, PEI En-le2, HUANG Bing1,5
(1. Key Laboratory of Animal Parasitology of the Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, CAAS, Shanghai 200241, China; 2. Department of Wildlife Protection Administration, Shanghai 200023, China; 3. College of Life and Environment Sciences, Shanghai Normal University, Shanghai 200234, China; 4. College Animal Science and Technologe, Yunan Agricultural University, Kunming 650201, China; 5.Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, China)

To investigate the infective status of helminthes in frogs at Shanghai farmers’ markets, hearts, lungs, muscles, livers and stomachs, intestinal organs were collected from 52 frogs(Rana nigromaculata)and examined under microscopy. The helminth infection rate was 90.38% and average intensity of infection was 20.21 per frog. The infection rates and intensities were 50.00% and 3 for nematodes, 86.54% and 15 for trematodes, 17.31% and 5 for tapeworms and 51.92% and 5 for acanthocephalan, respectively. The highest infection rates were found in intestines (90.38%). The infection intensity of intestine and musclel subcutaneous was 15.34 and11.38, respectively, which were signif cantly higher than those of other organs. The nematodes, trematodes and acanthocephalan were mainlyfound in intestines and tapeworms in muscles. Based on the morphological identity, 6, 3, 1, and 2 species of trematodes, nematodes, tapeworm and acanthocephalans (Dos) were revealed in the study. These results would provide the basic information for infective status of market frogs and its signif cance for public health.

Frogs;Rana nigromaculata;helminths; parasites; investigation

S852.73

A

1674-6422（2014）06-0053-05

2014-06-25

上海市野生動植物保護管理站科技項目（HX201203）；上海市閔行區(qū)高層次人才科研項目（2012RC030）

朱順海，男，獸醫(yī)師，主要從事動物寄生蟲病流行病學(xué)研究

黃兵， E-mail：hb@shvri.ac.cn；裴恩樂，E-mail：peienle@hotmail.com