滑液尿酸與骨關(guān)節(jié)炎患者病情嚴(yán)重程度相關(guān)性研究

西安市第五醫(yī)院風(fēng)濕科（西安710082） 張 薇 劉昌蓮 劉小玲 李曉明 張 智

骨關(guān)節(jié)炎（Osteoarthritis，OA）是一種以關(guān)節(jié)軟骨變性和丟失為主的常見的關(guān)節(jié)退行性疾病，臨床上可出現(xiàn)關(guān)節(jié)疼痛、活動受限和關(guān)節(jié)畸形等癥狀。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，65歲以上人群中，OA的發(fā)病率為50%，75歲以上的人群中，發(fā)病率為80%左右。隨著社會老齡化及人類壽命的延長，OA已經(jīng)成為影響人類生活質(zhì)量的常見病及多發(fā)病。研究該病的病因、病理，進(jìn)而尋找防治該病的有效手段，是當(dāng)前風(fēng)濕免疫界面臨的重大課題之一。本研究通過檢測血清、滑液中IL-18、IL-1β及尿酸，探討滑液尿酸在骨關(guān)節(jié)炎病理過程中的作用，評價其是否可作為骨關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重程度的一個生化指標(biāo)。

對象與方法

1 研究對象 60例骨關(guān)節(jié)炎患者均為2012年8月至2014年2月在西安市第五醫(yī)院門診及住院治療的骨關(guān)節(jié)炎并發(fā)膝關(guān)節(jié)積液病人，均符合1986年美國風(fēng)濕病學(xué)會制定的膝骨關(guān)節(jié)炎的分類標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)其嚴(yán)重程度分成輕型組和重型組兩組，每組30例。嚴(yán)重程度分組標(biāo)準(zhǔn)采用Kellgren-Lawrence分級，0～Ⅱ級為輕型組，Ⅲ～Ⅳ級為重型組。輕型組30例，男16例，女14例，平均年齡（63．33±10．571）歲，平均病程（3．82±3．870）年。重型組30例，男14例，女16例，平均年齡（64．40±9．673）歲，平均病程（5．516±4．244）年。兩組患者在年齡和病程上比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0．05）。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①試驗(yàn)前3個月內(nèi)使用過糖皮質(zhì)激素；②試驗(yàn)前6個月內(nèi)接收過膝關(guān)節(jié)鏡手術(shù)；③既往有化膿性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)周圍骨折、Paget病、假性痛風(fēng)、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎；④痛風(fēng)病人或既往有痛風(fēng)發(fā)作的病史；⑤有使用降尿酸藥物史（秋水仙堿或別嘌呤醇）。

2 方 法

2．1 標(biāo)本采集：入選患者在首次行膝關(guān)節(jié)腔穿刺時，抽取關(guān)節(jié)滑液2ml，注入一生化試管中。同時抽取患者外周靜脈血2ml，不加抗凝劑，3000轉(zhuǎn)／min，離心5min，獲得血清。滑液和血清均冷藏于-80℃的冰箱內(nèi)備測。

2．2 IL-18和IL-1β濃度的測定：采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清和滑液中的IL-18和IL-1β濃度。采用尿酸酶終點(diǎn)法測定血清和滑液中的尿酸濃度。所用試劑盒購自上海江萊化學(xué)科技有限公司。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，各參數(shù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用成組t檢驗(yàn)，相關(guān)性采用直線相關(guān)分析。P＜0．05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩組患者關(guān)節(jié)滑液和血清尿酸的濃度 輕型組患者關(guān)節(jié)滑液的尿酸平均值（263．43±43．06）μmol／L，重型組患者關(guān)節(jié)滑液的尿酸平均值（372．17±78．513）μmol／L，重型組顯著高于輕型組（t＝-7．744，P＜0．05）。輕型組患者血清尿酸平均值（292．13±31．625）μmol／L，重型組患者血清尿酸平均值（316．47±66．136）μmol／L，兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0．05）。

2 兩組患者關(guān)節(jié)滑液中IL-1β和IL-18濃度 患者關(guān)節(jié)滑液中IL-1β平均值（13．7993±1．66145）ng／L，患者關(guān)節(jié)滑液中IL-18平均值（64．0185±7．49815）ng／L。

3 血清和關(guān)節(jié)滑液中尿酸濃度與IL-1β、IL-18濃度的相關(guān)性分析 滑液尿酸濃度與滑液IL-1β、IL-18濃度呈正相關(guān)（r＝0．603，0．441，P＜0．05）。血清尿酸與血清IL-1β、IL-18無相關(guān)性（r＝-0．027，-0．118，P＞0．05）。

討 論

目前認(rèn)為骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生發(fā)展的主要機(jī)制是關(guān)節(jié)局部免疫性炎癥反應(yīng)，滑膜細(xì)胞和炎性細(xì)胞分泌的炎性細(xì)胞因子，如IL-18、IL-1等參與了OA的病理損傷過程［1，2］。尿酸是細(xì)胞代謝的正常成分，在細(xì)胞損傷或凋亡過程中，其在細(xì)胞內(nèi)的濃度會有所增加。既往的研究多集中在尿酸在痛風(fēng)發(fā)病中的作用［3，4］。近年來有文獻(xiàn)顯示滑液中尿酸也可能參與了骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病［5，6］。尿酸可以激活 NLRP3炎癥反應(yīng)，當(dāng)被激活時，NLRP3炎癥反應(yīng)將導(dǎo)致IL-18和IL-1β等的產(chǎn)生。IL-18和IL-1β與膝關(guān)節(jié)OA的嚴(yán)重程度呈密切正相關(guān)，這已被關(guān)節(jié)影像學(xué)檢查所證實(shí)［7，8］。本研究中，在年齡和病程相同的情況下，重型組（即K-L分級為Ⅲ-Ⅳ級）患者滑液中的尿酸水平明顯高于輕型組，提示滑液中的尿酸在骨關(guān)節(jié)炎病情進(jìn)展中可能發(fā)揮一定的作用，較高的滑液尿酸水平預(yù)示骨關(guān)節(jié)炎的病情較重。研究已表明，尿酸可以激活炎癥反應(yīng)，促進(jìn)致炎因子IL-18和IL-1β的表達(dá)。本研究中滑液中的尿酸水平與滑液中IL-18和IL-1β的水平呈正相關(guān)也再次證實(shí)了這一觀點(diǎn)。由此我們推斷滑液中的尿酸水平可作為膝關(guān)節(jié)OA嚴(yán)重程度的一個生物標(biāo)志。

關(guān)節(jié)滑液來源于病變局部，相對于血清檢測，其更能客觀而直接地反映關(guān)節(jié)病變程度，因?yàn)楦鞣N標(biāo)志物在進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)之前，將在關(guān)節(jié)液或淋巴系統(tǒng)中進(jìn)一步降解。因此，關(guān)節(jié)液為識別從關(guān)節(jié)軟骨釋放出的所有片段提供了更多機(jī)會，同時還可以避免或減少其他疾病及干擾因素對結(jié)果造成的影響［9］。本研究顯示，血清尿酸濃度與血清中IL-1β、IL-18的水平無相關(guān)性，而滑液尿酸濃度與滑液中IL-1β、IL-18的水平呈正相關(guān)，據(jù)此可推斷滑液尿酸可作為一種簡便、易于推廣的指標(biāo)來預(yù)測OA嚴(yán)重程度，將為臨床醫(yī)生選擇治療方案提供重要參考指標(biāo)。因此，檢測分析膝關(guān)節(jié)滑液中IL-18、IL-1及尿酸的表達(dá)水平較血清檢測具有更大的臨床意義。

綜上所述，滑液尿酸作為一種簡便、易于推廣的指標(biāo)可用于預(yù)測骨關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度，可為臨床醫(yī)生治療方案的選擇提供參考，同時可為骨關(guān)節(jié)炎生物治療的新靶點(diǎn)提供新的思路。但該結(jié)論有待更多的大樣本前瞻性研究的證實(shí)。

［1］ Frank L van de Veerdonk，Mihai G Netea，Charles A Dinarello，etal．Inflammasome activation and IL-1βand IL-18processing during infection［J］．The Netherlands Trends in Immunology，2011，32（3）：110．

［2］ 李 勇，江建明，楊德鴻，等．骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)滑液中白細(xì)胞介素18及其他相關(guān)因子含量測定［J］．南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2009，29（4）：729-731．

［3］ 青玉鳳，周京國．痛風(fēng)發(fā)病機(jī)制及藥物治療研究現(xiàn)狀及進(jìn)展．中華臨床醫(yī)學(xué)雜志，2012，6（10）：2719-2723．

［4］ Roddy E，Zhang W，Doherty M．Are joints affected by gout also affected by osteoarthritis［J］．Ann Rheum Dis，2007，66：1374–1377．

［5］ Kono H，Chen C-J，Ontiveros F，etal．Uric acid promotes an acute in flammatory response to sterile cell death in mice［J］．J Clin Invest，2010，120：1939–1949．

［6］ Denoble AE，Huffman KM，Stabler TV，etal．Uric acid is a danger signal of increasing risk for osteoarthritis through inflammasome activation［J］．PNAS，2011，108：2088–2093．

［7］ Kraus VB．Association of bone scintigraphic abnormalities with knee malalignment and pain［J］．Ann Rheum Dis，2009，68：1673–1679．

［8］ Kraus VB，Vail TP，Worrell T，etal．A comparative assessment of alignment angle of the knee by radiographic and physical examination methods［J］．Arthritis Rheum，2005，52：1730–1735．

［9］ Caramés B，Taniguchi N，Otsuki S，etal．Autophagy is a protective mechanism in normal cartilage，and its agingrelated loss is linked with cell death and osteoarthritis［J］．Arthritis Rheum，2010，62：791–801．