結(jié)腸癌組織中KISS-1和KAI-1蛋白的表達(dá)

秦躍輝 李道明

結(jié)腸癌是消化道常見的惡性腫瘤之一，病死率高。研究表明其生物學(xué)行為與某些分子指標(biāo)有關(guān)。作者運(yùn)用免疫組化SP法檢測了結(jié)腸癌組織中腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KISS-1和KAI-1的表達(dá)情況，旨在探討二者在結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移中的作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1一般材料 組織標(biāo)本來自濮陽市人民醫(yī)院及鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2009年1月～2012年12月間存檔蠟塊，所有病例均經(jīng)病理學(xué)復(fù)查確診。選取符合要求的結(jié)腸癌患者49例，其中男35例，女14例，年齡31～69歲。大腸癌診斷和分級參照全國大腸癌協(xié)作組病理組規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。按分化程度高低分為低分化組18例和中高分化組31例，按有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分為轉(zhuǎn)移組23例和無轉(zhuǎn)移組26例，按浸潤深度分為侵及漿膜層30例及未侵及漿膜層組19例。每例標(biāo)本均在無壞死癌灶和癌灶遠(yuǎn)端的手術(shù)殘端(正常組織)。全部標(biāo)本均經(jīng)40 g/L福爾馬林固定，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片備用。

1.2主要試劑與方法 SP法免疫組化，羊抗人KISS-1、KAI-1及SP試劑盒均購自福建邁新公司。操作步驟嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。參照文獻(xiàn)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒的染色細(xì)胞為陽性，根據(jù)染色程度及免疫陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞總數(shù)百分比綜合計(jì)分[1]。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS15.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。KISS-1和KAI-1陽性率的比較采用配對χ2檢驗(yàn)，二者的表達(dá)關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1KISS-1及MMP-9蛋白的表達(dá) KISS-1及KAI-1蛋白在正常腸黏膜和癌組織中均有表達(dá)；KISS-1在正常腸黏膜和癌組織中的陽性表達(dá)率分別為87.75%和34.69%，KAI-1分別為95.92%和32.65%；組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；不同病理特征結(jié)腸癌組織中KISS-1及KAI-1蛋白表達(dá)見表1。

表1 結(jié)腸癌組織中KISS-1和KAI-1蛋白的表達(dá)

2.2KISS-1蛋白與KAI-1蛋白表達(dá)的相關(guān)性 49例結(jié)腸癌組織中，KISS-1、KAI-1兩者均陽性表達(dá)11例，兩者均陰性表達(dá)27例，KISS-1陽性KAI-1陰性6例，KISS-1陰性KAI-1陽性5例，采用Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)，rs=0.264，二者呈正相關(guān)關(guān)系。

3 討論

KISS-1基因是Lee等于1996年間發(fā)現(xiàn)的具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的基因，后經(jīng)證實(shí)該基因與多種腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移行為相關(guān)[2]，同時有研究者認(rèn)為該基因還在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中扮演重要角色[3]。KAI-1 基因主要存在于人類白細(xì)胞表面，在其他組織細(xì)胞表面也有一定程度的表達(dá)，是研究較早的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因[4]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示KISS-1及KAI-1蛋白在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)均低于正常結(jié)腸黏膜；二者在低分化腫瘤中的表達(dá)高于高分化組，在侵及漿膜層的腫瘤組織中的表達(dá)明顯低于未侵及漿膜層者，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組；組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明KISS-1及KAI-1參與結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展，且具有抑制腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移的作用?？赡苁荎ISS-1通過信號傳導(dǎo)通路促使增加細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞的增生、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化，同時誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞過度粘附而使其移動能力受抑[2，3]。KAI-1 也通過影響著腫瘤細(xì)胞與腫瘤之間或腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞間質(zhì)間的相互作用進(jìn)而影響著腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移[4,5]。通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，二者在結(jié)腸癌組織的表達(dá)呈正相關(guān)性，但二者在抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移中是否具有協(xié)同作用，以及二者作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

本研究提示聯(lián)合檢測KISS-1和KAI-1在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)，有助于結(jié)腸癌的早期診斷以及臨床醫(yī)生對其浸潤轉(zhuǎn)移潛能的判斷，對臨床治療有一定的指導(dǎo)意義。

[1] 張延新,宋文剛,高鳳蘭.大黃素對結(jié)腸癌模型鼠兩種細(xì)胞因子影響.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,32(5):583-585.

[2] 王洪興,張潔,宋穎,等. KISS-1 及 MMP-9 基因在胃癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及相關(guān)性.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2012,28(7):761-763.

[3] 徐夏,張志強(qiáng),關(guān)曉軍,等. 胃鏡活檢組織KISS-1 基因與胃癌的關(guān)系.中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用, 2010,4(7):16-17.

[4] 桑溫昌,何慶泗,孫充兵.KISS-1 和 KAI-1 在大腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義.中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展, 2009,12(5)：398-401.

[5] 呂志強(qiáng).KISS-1、KAI-1基因在膽囊癌中的表達(dá)及其意義的實(shí)驗(yàn)研究.江蘇大學(xué), 2009.