液基細(xì)胞學(xué)檢測非婦科細(xì)胞標(biāo)本的技術(shù)分析

何新東

液基細(xì)胞學(xué)檢測非婦科細(xì)胞標(biāo)本的技術(shù)分析

何新東

目的 從技術(shù)角度分析基層醫(yī)院應(yīng)用液基細(xì)胞學(xué)檢測非婦科細(xì)胞標(biāo)本，提高病理細(xì)胞學(xué)陽性率，探討開展和推廣的簡便方法。方法回顧2013年5月～2013年11月廣東省興寧市人民醫(yī)院129例在非婦科標(biāo)本中（胸腹腔積液、痰液等）進(jìn)行液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測過程，主要從技術(shù)角度分析非婦科標(biāo)本制片前、制片中、制片后等關(guān)鍵步驟，探討適合基層醫(yī)院開展和推廣的簡便方法。結(jié)果 通過液基細(xì)胞學(xué)檢測，報(bào)告查見核異質(zhì)細(xì)胞胸腔積液8例，腹腔積液3例，痰2例。傳統(tǒng)涂片報(bào)告查見核異質(zhì)細(xì)胞胸腔積液6例，腹腔積液1例，痰1例。結(jié)論 從技術(shù)角度看，嚴(yán)格執(zhí)行非婦科細(xì)胞標(biāo)本的液基細(xì)胞學(xué)檢測操作規(guī)范，確保制片優(yōu)良，提升診斷能力，服務(wù)臨床，提供客觀依據(jù)，適合基層醫(yī)院開展和推廣應(yīng)用。

液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)；非婦科細(xì)胞標(biāo)本

薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)（thin-cytologic test，TCT），已廣泛應(yīng)用于宮頸癌的早期篩查和診斷[1-2]；而用于非婦科細(xì)胞標(biāo)本（胸腹腔積液、痰液等）檢測的報(bào)道也陸續(xù)增多。非婦科細(xì)胞標(biāo)本因血性、炎性及混雜黏液等多樣性，傳統(tǒng)制片較不穩(wěn)定，靈敏度低，從而影響細(xì)胞病理學(xué)的診斷。采用液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)制片質(zhì)量高，細(xì)胞有效成分多、分布均勻，便于觀察診斷[3-4]。本研究回顧2013年5月～2013年11月廣東省興寧市人民醫(yī)院129例在非婦科標(biāo)本中（胸腹腔積液、痰液等）進(jìn)行液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測過程，主要從技術(shù)角度分析非婦科標(biāo)本制片前、制片中、制片后等關(guān)鍵步驟，確保優(yōu)良的制片質(zhì)量，探討適合基層醫(yī)院開展和推廣的簡便方法?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年5月～2013年11月廣東省興寧市人民醫(yī)院住院患者129例非婦科標(biāo)本（胸腹水、痰液）。年齡36～86歲，平均（63.32±10.78）歲。其中胸腔積液86例，腹腔積液22例，痰21例。

1.2 儀器 膜式液基細(xì)胞超薄制片儀TCT3000。

1.3 方法 所有非婦科細(xì)胞標(biāo)本（胸腹腔積液、痰液等）進(jìn)行液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)制片，傳統(tǒng)涂片對比。

1.3.1 制片前 胸腹腔積液標(biāo)本由臨床醫(yī)生采集，送檢量一般應(yīng)100ml以上，及時送檢。陰涼處靜置5min，棄去上層部分，用吸管除去炎性分泌物和黏液，保留50ml自然沉淀。痰液標(biāo)本采集前應(yīng)向患者或家屬說明留取痰液的方法，一般留取晨痰，先清潔咽部、喉部及口腔等分泌物，收集患者咳出的肺深部的新鮮痰，放入細(xì)胞保存液的標(biāo)本瓶中，靜置10min。尿液標(biāo)本通常取清晨中段排空尿，多次送檢。病理技術(shù)人員對送檢標(biāo)本和送檢單仔細(xì)核對并登記編號，對不符合要求的情況及時與臨床聯(lián)系。

1.3.2 制片中 薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)制片胸腹腔積液標(biāo)本取預(yù)處理標(biāo)本底層部分20ml置于液基檢測瓶中，通過液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)儀器選擇“漿液細(xì)胞”按鈕進(jìn)行系統(tǒng)處理，制作為薄層細(xì)胞涂片，直徑為2cm，用95%乙醇濕固定30min，瑞氏染色后制片。痰液標(biāo)本選擇“痰液細(xì)胞”按鈕進(jìn)行制片。

傳統(tǒng)涂片是將預(yù)處理標(biāo)本50ml搖勻后，2000r/min離心，傾去上清液，將沉淀作常規(guī)涂片用95%乙醇濕固定30min，瑞氏染色后制片。痰液標(biāo)本選取帶血絲等典型處傳統(tǒng)涂片。

1.3.3 制片后 細(xì)胞學(xué)診斷由病理診斷醫(yī)師診斷，密切結(jié)合患者臨床資料，采取間接分級性診斷，如未見惡性細(xì)胞，查見核異質(zhì)細(xì)胞，查見可疑惡性細(xì)胞，查見高度可疑惡性細(xì)胞，查見惡性細(xì)胞等診斷[5-6]。及時總結(jié)和反饋制片質(zhì)量給病理技術(shù)員，并加強(qiáng)臨床溝通，反饋標(biāo)本采集和臨床資料完善情況。

2 結(jié)果

嚴(yán)格細(xì)胞學(xué)技術(shù)操作規(guī)范，通過液基細(xì)胞學(xué)檢測，報(bào)告查見核異質(zhì)細(xì)胞胸腔積液8例，腹腔積液3例，痰2例。傳統(tǒng)涂片報(bào)告查見核異質(zhì)細(xì)胞胸腔積液6例，腹腔積液1例，痰1例。

3 討論

薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)在婦科宮頸癌應(yīng)用廣泛，其優(yōu)越性明顯[7-8]。在非婦科細(xì)胞標(biāo)本（胸腹腔積液、痰液等）的檢測也處于摸索階段，具有一定臨床應(yīng)用價值。嚴(yán)格液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)操作規(guī)范是細(xì)胞病理學(xué)診斷的前提，涉及到制片前、制片中、制片后等關(guān)鍵步驟。病理技術(shù)主管需對制片工作的每一環(huán)節(jié)實(shí)施必要監(jiān)督，確保良好的制片質(zhì)量。

液基制片前影響因素及對策：胸腹腔積液由于含有纖維蛋白原和組織，細(xì)胞破壞放出的凝血活酶，易凝結(jié)，可加入少量抗凝保存液及時送檢。痰標(biāo)本敏感度低，主要與患者留取痰液的方法不正確，病理技術(shù)員未能選取痰液典型形態(tài)制片有關(guān)。可及時與臨床科室交流，積極宣傳痰液留取方法，重視標(biāo)本的正確采集。

液基制片中影響因素及對策：薄層液基細(xì)胞儀器具有分離提取和沉降技術(shù)，可分離標(biāo)本中血液黏液，提取細(xì)胞沉淀及診斷成分，選擇性捕獲病變細(xì)胞。如胸腹腔積液含血細(xì)胞較多，可加少量抗凝劑。根據(jù)標(biāo)本類型不同，調(diào)整轉(zhuǎn)速和負(fù)壓制片，選擇“宮頸細(xì)胞”、“漿液細(xì)胞”、“痰液細(xì)胞”等按鈕。定期維護(hù)和清洗儀器，確保儀器處于良好的工作狀態(tài)。及時更換染色試劑，避免失效。

液基制片后影響因素及對策：細(xì)胞病理醫(yī)師的診斷水平還不高，患者臨床資料提供不夠詳細(xì)。加強(qiáng)病理診斷醫(yī)師的專業(yè)理論學(xué)習(xí)，提高業(yè)務(wù)能力。加強(qiáng)對技術(shù)室工作的管理，增強(qiáng)意識，完善和建立技術(shù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。加強(qiáng)病理與臨床科室溝通和交流，提高服務(wù)臨床質(zhì)量。

傳統(tǒng)涂片主要采集和處理方法單一，涂片較厚，造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊不清，干擾因素較多。針對送檢標(biāo)本類型采取相應(yīng)預(yù)處理，執(zhí)行細(xì)胞涂片規(guī)范，確保細(xì)胞均勻涂片和染色。

綜上所述，從技術(shù)角度看，嚴(yán)格執(zhí)行非婦科細(xì)胞標(biāo)本的液基細(xì)胞學(xué)檢測操作規(guī)范，確保制片質(zhì)量優(yōu)良，提升細(xì)胞病理診斷能力，進(jìn)一步服務(wù)于臨床，為臨床醫(yī)生提供客觀依據(jù)，適合基層醫(yī)院開展和推廣應(yīng)用。

[1] 劉君芬.TCT結(jié)合HR-HPV檢測在宮頸癌篩查中的應(yīng)用[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2008，14（16）:55.

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[3] 李建華，付志民，吳廣平，等.液基細(xì)胞學(xué)檢測對非婦科細(xì)胞標(biāo)本腫瘤細(xì)胞診斷的意義[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，33(5):414-420.

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[8] 劉長云.液基細(xì)胞學(xué)檢測在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價值[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，17（31）：107-108.

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.3.026

廣東 514500 廣東省興寧市人民醫(yī)院（何新東）