青海省玉樹州豬弓形蟲感染情況調(diào)查

代代 青海省玉樹州畜牧獸醫(yī)工作站 815000

弓形蟲病(Toxoplasmosis)是一種世界范圍內(nèi)廣泛流行的專性細(xì)胞內(nèi)寄生的人畜共患寄生蟲病，可自然感染豬、黃牛、水牛、馬、山羊、綿羊、鹿、兔、貓、犬和雞等16 種動(dòng)物。在各種家畜中以豬的感染率最高，在養(yǎng)豬場(chǎng)感染死亡率高達(dá)60%以上。

1 材料與方法

1.1 材料

豬弓形蟲IgG 抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）由深圳芬德生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，主要用于檢測(cè)豬血清或血漿中弓形蟲特異性抗體，評(píng)估豬場(chǎng)弓形蟲感染狀況。我們采用該試劑盒對(duì)玉樹州5 縣1 市的生豬養(yǎng)殖場(chǎng)豬弓形蟲感染概況進(jìn)行了調(diào)查。

我們于2013年4～11月于玉樹州5 縣1 市的生豬養(yǎng)殖場(chǎng)采集豬血液，每只豬采集3～5mL 血液，待血液凝固析出血清后，以2500r/min 離心5min 分離血清，-20℃保存?zhèn)錂z。

1.2 方法

（1）樣品制備。用樣品稀釋液將待檢血清按100 倍稀釋（如2μl 血清加入198 μl 樣品稀釋液中混勻）。陰、陽性對(duì)照不用稀釋。濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20 倍稀釋。

（2）檢驗(yàn)方法。使用前將試劑盒置室溫下30 分鐘，恢復(fù)至室溫。取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽性對(duì)照各2 孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存?？瞻讓?duì)照孔加樣品稀釋液100μl，陰、陽性對(duì)照孔分別加入陰、陽性對(duì)照100μl，樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl?；靹?，置37℃下反應(yīng)30 分鐘?？廴タ變?nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，重復(fù)洗滌5 次，拍干。每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外），置37℃下反應(yīng)30 分鐘。洗滌步驟同前。每孔依次加底物液A、底物液B 各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10 分鐘。每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450 nm(可用630 nm 作參比波長）測(cè)定各孔吸光值（A 值）。

（3）結(jié)果判定。實(shí)驗(yàn)正常的情況下，陰性對(duì)照≤0.20，陽性對(duì)照≥0.5；C.O（臨界值）=2.1×陰性對(duì)照均值（陰性對(duì)照均值小于0.1 時(shí)按0.1 計(jì)算）；樣品值＞C.O 為陽性，樣品值≤C.O 為陰性。

2 結(jié)果

通過本次調(diào)查，我們明確了青海玉樹州5 縣1市的豬弓形蟲感染概況，調(diào)查結(jié)果顯示，在玉樹州所收集到768 份豬血液樣品中，共檢測(cè)到118 份血清樣品呈弓形蟲血清抗體陽性，豬弓形蟲血清抗體陽性率為15.36%；玉樹市、雜多縣、稱多縣、治多縣、囊謙縣及曲麻菜的豬弓形蟲血清抗體陽性率分別為19.25%、16.81%、16.56%、15.94%、8.60%、11.61%及15.36%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析不同縣、市間的豬弓形蟲血清學(xué)陽性率，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

3 討論

弓形蟲是豬的“五大高熱病”的病原之一，感染了弓形蟲的豬肌肉中會(huì)存在弓形蟲孢囊，人們食用了生的或不熟的肉質(zhì)能夠引發(fā)弓形蟲感染。在本次調(diào)查中，我們采集到768 份豬血液樣品中，共檢測(cè)到118份血清樣品呈弓形蟲血清抗體陽性，豬弓形蟲血清抗體陽性率為15.36%，遠(yuǎn)低于先前報(bào)道的我國中部地區(qū)37 個(gè)大規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)24.5%的弓形蟲感染率。由此看來，我州防治弓形蟲的工作取得了一定的進(jìn)展。

然而我州的豬弓形蟲感染率仍然處于較高的感染水平。以往的調(diào)查顯示，弓形蟲流行豬場(chǎng)多與流浪貓的出入(有的場(chǎng)本身養(yǎng)貓)有關(guān)；還有報(bào)道稱，土壤中弓形蟲卵囊污染較嚴(yán)重的豬場(chǎng)，豬群的弓形蟲感染率也較高，土壤的污染程度或許可以反映豬場(chǎng)弓形蟲感染率，而土壤的污染程度又與豬場(chǎng)貓群密度有重要關(guān)系。因此，在一定地域中控制和預(yù)防豬群感染弓形蟲的關(guān)鍵在于控制本區(qū)域內(nèi)的貓和嚙齒動(dòng)物的數(shù)量。因此豬舍內(nèi)應(yīng)嚴(yán)禁養(yǎng)貓并防止貓進(jìn)入圈舍，并嚴(yán)防飲水及飼料被貓糞直接或間接污染。