異氟醚后處理降低新生大鼠缺血缺氧后腦損傷的機制研究

紀(jì)國余，薛杭，于威威，季海音，楊雅婷，趙平

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院麻醉二科，沈陽110004）

異氟醚后處理降低新生大鼠缺血缺氧后腦損傷的機制研究

紀(jì)國余，薛杭，于威威，季海音，楊雅婷，趙平

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院麻醉二科，沈陽110004）

目的探討異氟醚后處理是否通過抑制線粒體通道轉(zhuǎn)換孔（mPTP）的開放降低新生大鼠缺血缺氧后的腦損傷。方法新生SD大鼠210只，7 d齡，體質(zhì)量12～16 g，采用隨機數(shù)字表法，將大鼠隨機均分為7組（n=30）：假手術(shù)組（Ⅰ組）、腦缺血缺氧組（Ⅱ組）、腦缺血缺氧+異氟醚后處理組（Ⅲ組）、蒼術(shù)苷組（Ⅳ組）、蒼術(shù)苷+異氟醚后處理組（Ⅴ組）、環(huán)孢素A組（Ⅵ組）、環(huán)孢素A+異氟醚后處理組（Ⅶ組）。除Ⅰ組外，其他各組均行左側(cè)頸總動脈結(jié)扎手術(shù)，于37℃的水浴環(huán)境中，給予8%O2?92%N2混合氣體處理2 h，制備新生大鼠缺血缺氧性腦損傷動物模型。各組于模型建立或假手術(shù)后，側(cè)腦室注射蒼術(shù)苷、環(huán)孢素A或生理鹽水，然后將Ⅲ組、Ⅴ組、Ⅶ組放入半密閉箱內(nèi)，持續(xù)吸入1.5%異氟醚（30%O2+70%N2）30 min；同時，Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅳ組、Ⅵ組放入半密閉箱內(nèi)，持續(xù)吸入不含異氟醚的混合氣體（30%O2+70%N2）30 min，待大鼠蘇醒后，放回籠中正常喂養(yǎng)。于腦缺血缺氧24 h后，各組隨機取出10只，取腦組織，檢測左側(cè)大腦半球線粒體的吸光度變化，分析mPTP的開放；于缺血缺氧后7 d測定左、右大腦半球質(zhì)量，計算左、右大腦半球質(zhì)量比；計數(shù)丘腦腹后內(nèi)側(cè)核和海馬CA3區(qū)左、右側(cè)神經(jīng)元數(shù)量，計算左、右側(cè)神經(jīng)元密度比。結(jié)果與Ⅰ組比較，Ⅱ組～Ⅶ組左側(cè)大腦半球的質(zhì)量、左右大腦半球質(zhì)量比、丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左右正常神經(jīng)元密度比值降低（P＜0.05），mPTP吸光度值的改變（△OD540nm）顯著升高（P＜0.05）；與Ⅱ組比較，Ⅲ組、Ⅵ組及Ⅶ組左側(cè)大腦半球的質(zhì)量、左右大腦半球質(zhì)量比、丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左右正常神經(jīng)元密度比值升高（P＜0.05），mPTP的△OD540nm顯著降低（P＜0.05）；與Ⅲ組比較，Ⅳ組和Ⅴ組左側(cè)大腦半球的質(zhì)量、左右大腦半球質(zhì)量比、丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左右正常神經(jīng)元密度比值降低（P＜0.05），mPTP的△OD540nm顯著升高（P＜0.05）。結(jié)論異氟醚后處理降低缺血缺氧性腦損傷新生大鼠的腦損傷程度；異氟醚后處理可以抑制缺血缺氧性腦損傷所致的mPTP開放；異氟醚后處理通過抑制mPTP的開放降低新生大鼠缺血缺氧后的腦損傷程度。

異氟醚后處理；缺血缺氧性腦損傷；線粒體通道轉(zhuǎn)換孔；新生大鼠

異氟醚是廣泛應(yīng)用于臨床麻醉的吸入麻醉藥，具有誘導(dǎo)快、蘇醒快、安全有效、易于操作等特點。研究認(rèn)為，異氟醚后處理可以減輕缺血缺氧性腦損傷新生大鼠的腦損傷［1～3］，而對其相關(guān)作用機制并不是十分清楚。在正常的細(xì)胞，線粒體通過氧化磷酸化提供能量，維持細(xì)胞生命活動。當(dāng)缺血缺氧時，線粒體功能受損，產(chǎn)生的能量不足以維持細(xì)胞生存，最終可以導(dǎo)致細(xì)胞的壞死和凋亡，因此認(rèn)為線粒體在細(xì)胞存活和死亡中起著關(guān)鍵作用，角色轉(zhuǎn)換的開關(guān)就是線粒體通道轉(zhuǎn)換孔（mitochondrial perme?ability transition pore，mPTP）。mPTP是橫跨于線粒體內(nèi)外膜之間非特異性、電壓依賴性的特殊蛋白復(fù)合物。研究認(rèn)為，線粒體功能狀態(tài)是決定受損細(xì)胞存活或死亡的重要因素［4，5］，線粒體的功能障礙和不可逆損傷與mPTP的開放密切相關(guān)。本課題組前期實驗結(jié)果顯示異氟醚后處理可以抑制mPTP的開放，而異氟醚后處理對缺血缺氧腦損傷新大鼠的保護作用是否與異氟醚后處理抑制mPTP的開放有關(guān)，還有待進一步研究。本研究采用新生大鼠缺血缺氧性腦損傷動物模型，觀察給予mPTP的開放劑和抑制劑后，異氟醚后處理對缺血缺氧性腦損傷新生大鼠腦保護作用的影響，進一步來探討異氟醚后處理對缺血缺氧性腦損傷新生大鼠的腦保護作用機制，為臨床研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 動物選擇及分組

新生SD大鼠210只，7 d齡，體質(zhì)量12～16 g，由中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院實驗動物中心提供。采用隨機數(shù)字表法，將大鼠隨機均分為7組（n= 30）：假手術(shù)組（Ⅰ組）、腦缺血缺氧組（Ⅱ組）、腦缺血缺氧+異氟醚后處理組（Ⅲ組）、蒼術(shù)苷組（Ⅳ組）、蒼術(shù)苷+異氟醚后處理組（Ⅴ組）、環(huán)孢素A組（Ⅵ組）、環(huán)孢素A+異氟醚后處理組（Ⅶ組）。

1.2 方法

1.2.1 缺血缺氧性腦損傷新生大鼠模型的制備：參照Rice等［6］介紹的方法并加以改良制備缺血缺氧腦損傷動物模型。面罩吸入異氟醚維持麻醉，用7?0絲線2次永久結(jié)扎左頸總動脈，待大鼠清醒后，放回籠中繼續(xù)喂哺2～3 h，然后將大鼠放入自制的半密閉箱中，箱內(nèi)鋪一層鈉石灰吸收CO2和水蒸氣，進氣口連于裝有異氟醚揮發(fā)罐的麻醉機，另一接口連接于氣體監(jiān)護儀，監(jiān)測半密閉箱內(nèi)氣體濃度。半密閉箱置于水浴箱中，水浴箱溫度設(shè)定為37℃，以2 L/min流量經(jīng)進氣孔向半密閉箱內(nèi)持續(xù)輸入8%O2?92%N2組成的濕化混合氣體處理2 h。

1.2.2 側(cè)腦室注射：缺血缺氧腦損傷動物模型制備后，參照Satoh等［7］介紹的方法，于復(fù)氧前行側(cè)腦室注射，Ⅳ組、Ⅴ組側(cè)腦室注射蒼術(shù)苷（Atr，2 mmol/L）5 μL，Ⅵ組、Ⅶ組側(cè)腦室注射環(huán)孢素A（CsA，2 μmol/L）5 μL，其他各組注射等量的生理鹽水，注射速度約維持在2～3 μL/min，注射完畢后留針3～5 s，再緩慢退針，以防藥物沿針道返流顱外。

1.2.3 異氟醚后處理：室溫下，Ⅲ組、Ⅴ組、Ⅶ組的大鼠放入半密封箱內(nèi)，吸入濃度為1.5%異氟醚（由30%O2?70%N2組成的濕化混合氣體以2 L/min流量輸送）30 min；Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅳ組、Ⅵ組的大鼠放入半密封箱內(nèi)，只吸入30%O2?70%N2組成的濕化混合氣體30 min。所有大鼠自然環(huán)境中恢復(fù)30 min后，放回母鼠身邊繼續(xù)喂哺。Ⅰ組除不結(jié)扎左頸總動脈和不吸入低氧氣體外，處理措施與其他組相同。

1.2.4 線粒體提取及mPTP開放的測定：缺血缺氧后24 h，麻醉處死大鼠，在冰上快速斷頭取腦，用冷鹽水沖掉腦組織表面的血跡濾紙吸干后，取左側(cè)大腦半球，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)，加入1.5 mL冰冷的細(xì)胞裂解緩沖液（凱基線粒體提取試劑盒），0℃冰峪上下研磨組織20次，按線粒體提取試劑盒（凱基生物科技發(fā)展有限公司）進行操作提取線粒體，線粒體提取過程中始終在0～4℃下進行。線粒體的含量以所含的蛋白量表示，將提取的線粒體用GENMED Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒進行定量（杰美基因醫(yī)藥有限公司），最后將定量后的線粒體樣品按照GENMED純化mPTP比色法檢測試劑盒（杰美基因醫(yī)藥有限公司）進行操作，使用酶標(biāo)儀檢測540 nm處腦組織線粒體吸光度值的變化，該值的變化反映線粒體腫脹程度，從而提示mPTP的開放和關(guān)閉程度。

1.2.5 新生大鼠死亡率及體質(zhì)量的測定：在缺血缺氧后7 d，記錄各組大鼠存活只數(shù)，計算各組的生存率；測量各組大鼠缺血缺氧前及缺血缺氧后7 d的體質(zhì)量。

1.2.6 左右大腦半球質(zhì)量比：缺血缺氧后7 d，新生大鼠于麻醉下打開腹腔暴露腹主動脈，將其剪斷放血后，迅速斷頭取腦，用冷鹽水沖洗腦組織表面的血跡，濾紙拭干，分離左右大腦半球并稱重，計算左右大腦半球質(zhì)量比。

1.2.7 腦損傷病理學(xué)檢測：缺血缺氧后7 d，新生大鼠麻醉下心內(nèi)灌注30 mL生理鹽水后，再灌注30 mL 4%多聚甲醛，斷頭取腦，室溫下放置在4%多聚甲醛中固定4 h。用冰凍切片機在前囟后3.3 mm處行冠狀面切片，厚度為8 μm。于室溫下晾干，行尼氏染色，中性樹膠封片、晾干。400倍光鏡顯微鏡下照相，從每張照片上，對應(yīng)的左、右丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及左、右海馬CA3區(qū)隨機各選擇3個0.002 5 mm2范圍，計數(shù)正常神經(jīng)元數(shù)量，取平均值，計算左、右正常神經(jīng)元的密度比。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠生存率及缺血缺氧前后體質(zhì)量的比較

Ⅰ組生存率為100%，Ⅳ組生存率90.0%，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅴ組、Ⅵ組及Ⅶ組生存率均為95.0%；各組間生存率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。各組新生大鼠缺血缺氧前和缺血缺氧后7 d體質(zhì)量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 各組新生大鼠缺血缺氧前和缺血缺氧后7 d體質(zhì)量的比較Tab.1 Body weights of neonatal rats

表1 各組新生大鼠缺血缺氧前和缺血缺氧后7 d體質(zhì)量的比較Tab.1 Body weights of neonatal rats

2.2 各組大鼠大鼠左右大腦半球質(zhì)量及比值的比較

如表2所示，與Ⅰ組比較，Ⅱ組～Ⅶ組左側(cè)大腦半球質(zhì)量及左、右大腦半球質(zhì)量比值顯著降低（P＜0.05）；與Ⅱ組比較，Ⅲ組、Ⅵ組及Ⅶ組左側(cè)大腦半球質(zhì)量及左、右大腦半球質(zhì)量比值顯著升高（P＜0.05）；與Ⅲ組比較，Ⅳ組和Ⅴ組左側(cè)大腦半球質(zhì)量及左、右大腦半球質(zhì)量比值顯著降低（P＜0.05）。

表2 各組大鼠左右大腦半球質(zhì)量及比值的比較Tab.2 Weight ratio of left/right hemisphere

表2 各組大鼠左右大腦半球質(zhì)量及比值的比較Tab.2 Weight ratio of left/right hemisphere

1）P＜0.05 vs groupⅠ；2）P＜0.05 vs groupⅡ；3）P＜0.05 vs groupⅢ.

2.3 各組大鼠丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左、右側(cè)正常神經(jīng)元密度比結(jié)果（圖1、2，表3）

圖1 各組大鼠缺血缺氧后7 d丘腦腹后內(nèi)測核神經(jīng)元病理改變Nissl染色×400Fig.1 Pathological changes of ventral posterior inferior thalamic nucleus at 7 d after hypoxic/ischemia Nissl staining×400

圖2 各組大鼠缺血缺氧后7 d海馬CA3區(qū)神經(jīng)元病理改變Nissl染色×400Fig.2 Pathological changes of hippocampus CA3 at 7 d after hypoxic/ischemia Nissl staining×400

與Ⅰ組比較，Ⅱ組～Ⅶ組丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左、右側(cè)正常神經(jīng)元密度比值顯著降低（P＜0.05）；與Ⅱ組比較，Ⅲ組、Ⅵ組及Ⅶ組丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左、右側(cè)正常神經(jīng)元密度比值顯著升高（P＜0.05）；與Ⅲ組比較，Ⅳ組和Ⅴ組丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左、右側(cè)正常神經(jīng)元密度比值則顯著降低（P＜0.05）。

2.4 各組大鼠mPTP的吸光度值結(jié)果

Ⅰ組～Ⅶ組的吸光度值（△OD540nm）分別為0.087±0.038、0.237±0.062、0.173±0.039、0.254± 0.048、0.233±0.049、0.181±0.049、0.178±0.036。與Ⅰ組比較，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅶ組大鼠mPTP的△OD540nm顯著升高（P＜0.05）；與Ⅱ組比較，Ⅲ組、Ⅵ組及Ⅶ組大鼠mPTP的△OD540nm顯著降低（P＜0.05）；與Ⅲ組比較，Ⅳ組和Ⅴ組大鼠mPTP的△OD540nm顯著升高（P＜0.05）。

表3 各組大鼠丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左、右側(cè)正常神經(jīng)元密度比Tab.3 The normal neuronal density ratio in ventral posterior inferior thalamic nucleus and hippocampus CA3 of left/right cerebral hemisphere

表3 各組大鼠丘腦腹后內(nèi)側(cè)核及海馬CA3區(qū)左、右側(cè)正常神經(jīng)元密度比Tab.3 The normal neuronal density ratio in ventral posterior inferior thalamic nucleus and hippocampus CA3 of left/right cerebral hemisphere

1）P＜0.05 vs groupⅠ；2）P＜0.05 vs groupⅡ；3）P＜0.05 vs groupⅢ.

3 討論

本課題組前期實驗結(jié)果表明，缺血缺氧性腦損傷新生大鼠，在腦缺血缺氧6 h內(nèi)吸入1.5%異氟醚30 min后，可以減輕缺血缺氧性腦損傷新生大鼠的腦損傷程度［2，3］，對腦損傷的新生大鼠具有腦保護作用。研究還認(rèn)為異氟醚后處理可能通過抑制缺血缺氧性腦損傷所致的mPTP開放，降低缺血缺氧后腦細(xì)胞的死亡或凋亡，從而實現(xiàn)對缺血缺氧性腦損傷新生大鼠的腦保護作用。本研究結(jié)果顯示，缺血缺氧性腦損傷的新生大鼠給予mPTP的特異性抑制劑（環(huán)孢素A）后，可以模擬異氟醚后處理，對缺血缺氧性腦損傷的新生大鼠具有腦保護效應(yīng)，但是，異氟醚后處理和環(huán)孢素A對缺血缺氧性腦損傷新生大鼠的腦保護并沒有呈現(xiàn)出2者有疊加作用。本實驗結(jié)果還顯示，給予mPTP的特異性開放劑蒼術(shù)苷后，其可以逆轉(zhuǎn)異氟醚后處理的腦保護效應(yīng)。

線粒體是細(xì)胞的能量代謝中心，對細(xì)胞的生存和死亡起著至關(guān)重要的作用。線粒體作為一個結(jié)構(gòu)和功能復(fù)雜而敏感的細(xì)胞器，對缺血缺氧非常敏感，缺血缺氧嚴(yán)重時可以引起細(xì)胞凋亡或壞死。正常情況下線粒體由兩層膜結(jié)構(gòu)組成，外膜通透性較高，內(nèi)膜通透性相對較低，而mPTP是橫跨于線粒體內(nèi)外膜之間非特異性、電壓依賴性的特殊蛋白復(fù)合物，主要由線粒體內(nèi)膜上的腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運蛋白（adenine nucleotide translocator，ANT）、線粒體外膜的電壓依賴的陰離子通道（voltage?dependent anion channel，VDAC）、線粒體基質(zhì)的親環(huán)蛋白D（cyclophilin D，CyP?D）以及其他蛋白物質(zhì)等共同組成［8～10］。環(huán)孢素A作為mPTP的特異性抑制劑，可以阻止CyP?D與ANT結(jié)合，從而抑制mPTP的開放；然而，ANT的配體蒼術(shù)苷（mPTP的開放劑）可以通過防止構(gòu)象的改變，從而逆轉(zhuǎn)環(huán)孢素A對mPTP的作用［11，12］。mPTP開放時，引起線粒體基質(zhì)腫脹，導(dǎo)致線粒體滲透性增加，腫脹液中的溶質(zhì)內(nèi)流入線粒體基質(zhì)，引起線粒體膨脹，外膜破裂，從而使得線粒體體積增大，對光的通透性增加。線粒體腫脹是mPTP開放最直接的表現(xiàn)，mPTP開放越高，線粒體腫脹得越明顯。文獻(xiàn)報道m(xù)PTP開放度的測定可以采用可見光分光度法［13］，來測定540 nm處線粒體吸光度值的改變［14，15］，分析和觀察腦組織mPTP的開放。本研究結(jié)果顯示，給予環(huán)孢素A后，缺血缺氧性腦損傷新生大鼠腦組織mPTP的吸光度值的改變明顯降低，這與異氟醚后處理具有相同的作用效果，但是環(huán)孢素A并沒有增加異氟醚后處理抑制mPTP的吸光度值的改變；而給予蒼術(shù)苷后，缺血缺氧性腦損傷新生大鼠腦組織mPTP的吸光度值的改變明顯升高，表明了蒼術(shù)苷可以逆轉(zhuǎn)異氟醚后處理對缺血缺氧性腦損傷新生大鼠腦組織mPTP的吸光度值的改變。研究顯示丘腦腹后內(nèi)側(cè)核和海馬是缺血缺氧后最易受損的部位［3，16］，其神經(jīng)元細(xì)胞對缺血缺氧非常敏感。有文獻(xiàn)報導(dǎo)抑制mPTP的開放則有助于減輕中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元損傷［9］。本課題組前期實驗顯示，吸入1.5%的異氟醚30 min，缺血缺氧后7 d時，腦損傷新生大鼠左側(cè)丘腦腹后內(nèi)側(cè)核和海馬CA3區(qū)正常神經(jīng)元密度明顯增加，表明1.5%異氟醚后處理對缺血缺氧性腦損傷新生大鼠有神經(jīng)元保護作用。本研究結(jié)果顯示，給予蒼術(shù)苷的大鼠正常神經(jīng)元數(shù)較單純給予異氟醚后處理的大鼠明顯降低，而給予環(huán)孢素A的大鼠正常神經(jīng)元數(shù)與單純給予異氟醚后處理的大鼠基本一致，表明了環(huán)孢素A對缺血缺氧性腦損傷新生大鼠的神經(jīng)元細(xì)胞有保護作用，而蒼術(shù)苷可以逆轉(zhuǎn)異氟醚后處理的保護作用。

綜上所述，我們可以認(rèn)為異氟醚后處理通過抑制缺血缺氧性腦損傷所致的mPTP開放對缺血缺氧腦損傷新大鼠產(chǎn)生腦保護作用，而異氟醚后處理的腦保護作用是否有其他機制參與還有待于進一步研究。

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（編輯 武玉欣）

Mechanism Study of Isoflurane Postconditioning on Reducing Hypoxic?ischemia Brain Injury in Neonatal Rats

JI Guo?yu，XUE Hang，YU Wei?wei，JI Hai?yin，YANG Ya?ting，ZHAO Ping
（Department of Anesthesiology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China）

ObjectiveTo investigate whether isoflurane postconditioning reduce hypoxic?ischemia brain injury by inhibiting the openness of mito?chondrial permeability transition pore（mPTP）in neonatal rats.MethodsTwo hundred and ten 7?day?old Sprague?Dawley（SD）rats，weighing 12?16 g，were randomly divided into 7 groups（n=30 pergroup）：sham surgery group（groupⅠ），hypoxic ischemia brain injury（groupⅡ），isoflu?rane inhalation after hypoxic ischemic brain damage group（groupⅢ），Lateral cerebral ventricle injection of atractyloside group（groupⅣ），iso?flurane inhalation after lateral cerebral ventricle injection of atractyloside group（groupⅤ），lateral cerebral ventricle injection of cyclosporine A group（groupⅥ）and isoflurane inhalation after lateral cerebral ventricle injection of cyclosporine A group（groupⅦ）.To establish hypoxic isch?emic brain damage model in neonatal rats，pups with left common carotid arterial ligation were followed by exposure to 8%O2+92%N2for 2 h with 37℃water bath.The model（or control）groups were injected with atractyloside，cyclosporine A or physiological saline in lateral cerebral ventricle after hypoxic ischemic brain damage.In Ⅲ，Ⅴ and Ⅶgroups，1.5% isoflurane were inhaled for 30 min after hypoxic ischemia brain damage，while the other groups were exposed to 30%O2and 70%N2for 30 min.24 h after brain hypoxia/ischemia，10 rats were randomly selected from each group to measure activity of mitochondrial permeability transition pore.The survival rates of the rest rats at7 days were recorded and calculated.Brains were removed and the right and the left cerebral hemispheres were weighed separately.Ratio of left/right cerebral hemisphere was calculated.The normal neuronal density in ventral posterior inferior thalamic nucleus and hippocampus CA3 of left and right cerebral hemisphere were measured and normalneuronal density ratios of left to right cerebral hemisphere were calculatedResultsCompared with groupⅠ，the weight of left cerebral hemisphere，ratios of left/right cerebral hemisphere，normal neuronal density ratios of left to right cerebral hemisphere were significantly decreased and mPTP△OD540nmwas significantly increased in groups Ⅲ?Ⅶ（P＜0.05）.Compared with group Ⅱ，the weight of left cerebral hemisphere，ratios of left/right cerebral hemisphere，normal neuronal density ratios of left to right cerebral hemisphere were significantly increased and mPTP△OD540nmwas signifi?cantly decreased in groups Ⅲ，Ⅵ and Ⅶ（P＜0.05）.Compared with group Ⅲ，the weight of left cerebral hemisphere，ratios of left/right cerebral hemisphere，normal neuronal density ratios of left to right cerebral hemisphere were significantly decreased and mPTP△OD540nmwas significantly in?creased in groups Ⅵ and Ⅴ（P＜0.05）.ConclusionIsoflurane postconditioning reduced hypoxic ischemic brain injury in neonatal rats and inhibit?ed the openness of mPTP.Isoflurane postconditioning might inhibit mPTP openness to reduce hypoxic ischemic brain injury in neonatal rats.

isoflurane postconditioning；hypoxic ischemia brain injury；mitochondrial permeability transition pore；neonatal rat

R614.2

A

0258-4646（2014）07-0592-06

國家自然科學(xué)基金（81171782）

紀(jì)國余（1985-），男，碩士研究生.

趙平，E-mail：zhaop@sj?hospital.org

2014-04-08

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