海南地區(qū)衣原體病血清學(xué)調(diào)查

陳有文 （青海省海南州畜牧獸醫(yī)站 813000）

應(yīng)用間接血凝(IHA)試驗對海南州5縣的1202份牛血清和1732份羊血清進行了衣原體病血清學(xué)檢測，結(jié)果檢出：牛陽性血清91份 ，陽性率為7.6 %，羊陽性血清63份，陽性率為3.6%。

衣原體病是由鸚鵡熱衣原體引起羊、牛等多種動物的傳染病.臨床病理特征為流產(chǎn)、肺炎、腸炎、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎和腦炎。衣原體為革蘭氏陰性病原體，是專性細(xì)胞內(nèi)寄生，能在雞胚和易感的脊椎動物細(xì)胞內(nèi)生長繁殖，在自然界中傳播很廣泛[1]。主要通過性接觸傳播，牛羊衣原體性流產(chǎn)常呈地方性流行，本病沒有明顯的季節(jié)性，但以冬春季節(jié)較多見，遇降雪、降溫、寒流等氣候突變時流產(chǎn)率顯著升高。母牛羊懷孕各期都可能發(fā)生流產(chǎn)，以中后期居多。感染牛羊可長期帶毒，但以后直至流產(chǎn)都無明顯癥狀，對養(yǎng)殖業(yè)造成重大危害[2]。為摸清海南州牛羊衣原體病的感染情況，筆者于2013年6月，應(yīng)用間接血凝試驗(IHA)對海南州地區(qū)的牛羊隨機抽樣進行衣原體病血清學(xué)檢測，現(xiàn)將檢測結(jié)果報告如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 待檢血清 無菌采集牛羊靜脈血，分離血清，4℃冰箱保存，待檢。

1.1.2 診斷試劑 所用衣原體標(biāo)準(zhǔn)抗原，標(biāo)準(zhǔn)陰性、陽性血清。均由青海省動物疫病預(yù)防控制中心提供。

1.1.3 儀器 96孔1100V型血凝板，微量振蕩器、恒溫箱、微量加樣器等。

1.2 方法

1.2.1 加稀釋液 在96孔1100V型血凝板上每孔加稀釋液75μl。

1.2.2 稀釋待檢血清 用微量加樣器取待檢血清25μl，加入第1排第1孔，并將塑咀插入孔底，右手拇指輕壓彈簧1～2次混勻(避免產(chǎn)生過多的氣泡)，從該孔取出25μl移入第2孔，混勻后取出25μl移入第3孔，混勻后從第3孔取出25μl丟棄。此時第1排1～3孔待檢血清的稀釋度(稀釋倍數(shù))依次為：1:4⑴、1:8⑵、1:16⑶；其他待檢血清、標(biāo)準(zhǔn)陰性、陽性血清均按上法稀釋。

1.2.3 加抗原 被檢血清各孔、陰性對照血清各孔、陽性對照血清各孔、稀釋液對照孔均各加衣原體血凝抗原(充分搖勻，瓶底應(yīng)無血球沉淀)25μl，血凝板置于微量振蕩器上1～2min，然后將血凝板放在白紙上觀察各孔紅血球是否混勻，不出現(xiàn)血球沉淀為合格。蓋上玻板，37℃恒溫箱靜置1.5～2h判定結(jié)果，也可延至翌日判定。

1.2.4 判定標(biāo)準(zhǔn) 對照孔各孔均成立的前提下，被檢血清1:16孔出現(xiàn)“﹢﹢”以上者為陽性，1:4孔出現(xiàn)“﹢”者為陰性，1:4孔“﹢﹢”1:16孔出現(xiàn)“﹢”以下者為可疑。

2 結(jié)果

檢測牛血清共1202 份，陽性數(shù)91 份，陽性率為7.6%；檢測羊血清共1732份，陽性數(shù)63份，陽性率為3.6%。詳見表1、表2。

表1 牛衣原體病血清學(xué)檢測結(jié)果 （%）

表2 羊衣原體病血清學(xué)檢測結(jié)果 （%）

3 討論

（1）本次衣原體病血清學(xué)檢測對海南州5 縣范圍內(nèi)天然放牧牦牛和藏系羊進行隨機抽樣，檢測結(jié)果表明，海南地區(qū)牛羊群中在一定程度上存在衣原體病的感染，而且牛衣原體病的平均陽性率(7.6%)高于羊的平均陽性率(3.6%)，尤其是同德縣牛的陽性率高達(dá)11.4%，筆者認(rèn)為這與近幾年牛羊頻繁流產(chǎn)有一定關(guān)系。因此，建議各級畜牧獸醫(yī)主管部門和廣大牧民群眾應(yīng)從思想上提高認(rèn)識，重視該病的防治工作。（2）據(jù)近幾年的監(jiān)測結(jié)果表明，衣原體病在青海省范圍內(nèi)的牛羊中普遍感染情況。說明隨著市場的活躍，牲畜的流通頻繁，在縣與縣之間、村與村之間牲畜的流通串換，導(dǎo)致疫源由外輸入的現(xiàn)象存在。（3）建議通過血清學(xué)方法檢測，及時淘汰檢出的陽性畜。對已污染的畜棚、環(huán)境用2%～5%來蘇兒或20%苛性鈉等有效消毒劑進行消毒，力求從源頭上控制和凈化此病。（4）制定合理有效的防治措施。在衣原體病流行地區(qū)，應(yīng)制定疫苗免疫計劃，定期進行預(yù)防接種； 加強牛羊衣原體流行病學(xué)調(diào)查，建立疫情監(jiān)測制度；加強檢疫工作力度，防止疫病傳入。

致謝：在牛羊衣原體病的采樣和部分檢測中得到了魏有梅、王烈琴、萬瑪吉、謝仁卓瑪、巴特等同志的大力支持，在此表示衷心的感謝！

[1]陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)[m].北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2001.378-382.

[2]張紹賢.家畜傳染病學(xué)[m].北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 1995.146-147.

[3]李世雙.門源縣西部地區(qū)牛羊衣原體病血清學(xué)調(diào)查[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志.2012.(6): 26.

[4]謝昌元.王光華等.青海省羊衣原體病綜合防制措施[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志.2013(3): 39-40.

[5]祁小英.樂都縣牛衣原體病血清學(xué)調(diào)查[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志.2013(4): 10.