金線蓮多糖口服液調(diào)節(jié)免疫功能實(shí)驗(yàn)研究

張賽男

（贛南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，江西 贛州 341000）

論 著

金線蓮多糖口服液調(diào)節(jié)免疫功能實(shí)驗(yàn)研究

張賽男

（贛南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，江西 贛州 341000）

目的：研究金線蓮多糖口服液對小鼠免疫功能的影響。方法：用不同劑量的金線蓮多糖口服液對小鼠進(jìn)行灌胃，測定對小鼠免疫器官、巨噬細(xì)胞吞噬功能、溶血素水平和脾淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果：金線蓮多糖口服液可明顯提高小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和吞噬指數(shù)，促進(jìn)小鼠溶血素生成和脾淋巴細(xì)胞增殖。結(jié)論：金線蓮多糖口服液有增強(qiáng)小鼠免疫功能的作用。

金線蓮多糖口服液；小鼠；免疫功能

金線蓮屬多年生草本植物，民間有“藥王”、“金草”之稱［1］，具有廣泛藥用價(jià)值［2］。金線蓮有許多重要藥理活性的物質(zhì)［3］，主要以黃酮和多糖為主，多糖類成分具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫［4］、抗衰老作用［5］。金線蓮多糖口服液是金線蓮經(jīng)超高壓輔助浸提，超濾純化得到多糖的基礎(chǔ)上，輔以檸檬酸、白砂糖、蜂蜜制成，主要成分為金線蓮多糖。我們觀察了金線蓮多糖口服液對健康小鼠免疫功能的影響，總結(jié)如下。

1 材 料

金線蓮多糖口服液制備：金線蓮干品粉碎后過60目篩，超高壓輔助浸提，提取液4000r/min離心20min，得多糖粗提液。粗提液經(jīng)100ku超濾膜超濾分級，再經(jīng)10ku的超濾膜分離純化，冷凍干燥得到金線蓮多糖粉。金線蓮多糖粉按計(jì)量配置不同濃度，輔以1%蜂蜜，0.05%檸檬酸，4%白砂糖制備成金線蓮多糖口服液。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康昆明種小鼠，福建省醫(yī)學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，共50只，雄性，體質(zhì)量為18～22g。

2 分組與方法

小鼠實(shí)驗(yàn)前先適應(yīng)4天，并自由飲水、攝食，復(fù)查合格后將小鼠隨機(jī)分為5組。以多糖含量設(shè)50、100、150、200mg/kg 4個(gè)劑量組和1個(gè)對照組，分別編號為1～5，并按20mL/（kg·d）連續(xù)經(jīng)口灌胃20天，對照組給予等量的生理鹽水灌胃，20天后測定相關(guān)指標(biāo)。

3 指標(biāo)測定

免疫器官指數(shù)測定：小鼠稱重后斷頭處死，無菌摘出脾和胸腺稱重，按［免疫器官指數(shù)（mg/g）=免疫器官質(zhì)量÷小鼠體質(zhì)量］公式計(jì)算脾和胸腺指數(shù)。

巨噬細(xì)胞吞噬功能測定：參照廉宜君、陳韓英等的方法進(jìn)行吞噬指數(shù)測定［6］。

血清溶血素的測定：每只小鼠腹腔注射2%（v/v）SRBC懸液0.2mL，5天后采血檢測血清溶血素，小鼠溶血素的量以半數(shù)溶血值（HC50）表示。

脾淋巴細(xì)胞增殖測定：測定方法參照許丹妮、許健等所用方法測定［7］。

4 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS進(jìn)行分析。

5 結(jié) 果

各組脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和吞噬指數(shù)見表1。

表1 各組脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和吞噬指數(shù)比較（±s）

表1 各組脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和吞噬指數(shù)比較（±s）

注：與第5組比較，△P＜0.05、△△P＜0.01。

組別 劑量（mg/kg） 脾臟指數(shù) 胸腺指數(shù) 吞噬指數(shù)1 50 4.43±0.17 4.96±0.31 0.037±0.053 2 100 4.78±0.24△5.36±0.46△0.043±0.053△3 150 5.74±0.23△△6.23±0.32△△0.063±0.058△△4 200 6.23±0.36△△7.16±0.26△△0.081±0.041△△5 0 4.14±0.25 4.54±0.32 0.031±0.029

各組血清溶血素水平見表2。

表2 各組溶血素水平比較 （±s）

表2 各組溶血素水平比較 （±s）

注：與第5組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組別 劑量（mg/kg） 溶血素水平（HC50）1 50 112.13±13.42 2 100 149.58±23.32△150 170.96±19.35△△4 200 206.23±16.23△△5 0 103.35±10.29 3

各組脾淋巴細(xì)胞增殖指標(biāo)比較見表3。

表3 各組脾淋巴細(xì)胞增殖指標(biāo)比較 （±s）

表3 各組脾淋巴細(xì)胞增殖指標(biāo)比較 （±s）

注：與第5組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組別 劑量（mg/kg） OD值1 50 0.343±0.012 2 100 0.399±0.023△3 150 0.436±0.011△△4 200 0.493±0.040△△5 0 0.315±0.029

6 結(jié) 論

胸腺中樞免疫器官，胸腺功能的增強(qiáng)可以提高細(xì)胞免疫功能。脾臟屬機(jī)體外周重要的免疫器官，脾臟功能直接反映著機(jī)體免疫的強(qiáng)弱。巨噬細(xì)胞是消除機(jī)體內(nèi)致病微生物重要的效應(yīng)細(xì)胞，在機(jī)體發(fā)揮極非特異性免疫中具有及其重要的作用。試驗(yàn)研究表明，金線蓮多糖口服液可明顯提高小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和吞噬指數(shù)，隨著劑量的增加效果趨于明顯，說明金線蓮多糖口服液具有增強(qiáng)免疫功能的作用。

溶血素水平反映免疫反應(yīng)后期抗體形成水平。淋巴細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)重要的免疫活性細(xì)胞，脾淋巴細(xì)胞增殖的強(qiáng)弱反映了淋巴細(xì)胞功能的高低。不同劑量金線蓮多糖口服液對小鼠溶血素生成和脾淋巴細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用，隨著劑量的增加效果明顯，說明金線蓮多糖口服液對增強(qiáng)小鼠免疫功能具有一定的促進(jìn)作用。

［1］ 余杰，李偉，張曉輝．金線蓮多糖抗糖尿病作用的研究［J］．海峽藥學(xué)，2013，25（11）：37-40．

［2］ 劉青，劉珍伶，周娟． 金線蓮多糖的體外抗氧化活性［J］．華僑大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2010，41（6）：718-720．

［3］ 趙保發(fā)，張志信．金線蓮多糖提取工藝的研究［J］．云南師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2008，28（4）：60-63．

［4］ 許丹妮．金線蓮多糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的研究［D］．福建農(nóng)林大學(xué)，2011．

［5］ 林麗清，黃麗英，鄭艷潔，等．金線蓮多糖的提取及清除氧自由基作用的研究［J］．福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，16（5）：37-39．

［6］ 廉宜君，陳韓英，李炳奇，等．沙棗多糖對免疫抑制小鼠的調(diào)節(jié)作用［J］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（16）：7481-7482．

［7］ 許丹妮，許健，馬玉芳，等．金線蓮多糖對免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖及免疫器官的影響［J］．中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2011，30（3）：15-17．

Objective：From anoectochilus extracted polysaccharide into anoectochilus polysaccharide oral liquid，to investigate the effects of oral liquid on immunologic function in mice.Methods：Perpare different measurement of anoectochilus polysaccharide oral liquid for intragastric administration，To determine the influence of the immune organ index，phagocytic function of macrophage，hemolysin level and the proliferation of the lymphocytes.Results：Anoectochilus polysaccharide oral liquid significantly increased spleen index，thymus index and phagocytic index，it also promote the formation of hemolysin and the proliferation of the lymphocytes in mice. Conclusions：Anoectochilus polysaccharide oral liquid can reinforce immune function on the mice.

Anoectochilus；Polysaccharide；Oral liquid；immunologic function

R255.99

B

1004-2814（2014）11-0987-02

2014-06-20

漳州科技計(jì)劃項(xiàng)目（zz2012043）