醫(yī)療機(jī)構(gòu)在用醫(yī)療器械：Ⅱ級生物安全柜使用現(xiàn)狀及問題解析

王崢崎，張雨晨，牛玉倩

(北京市醫(yī)療器械檢驗所，北京101111)

1 Ⅱ級生物安全柜的臨床作用

Ⅱ級生物安全柜(下稱安全柜)，通過安全柜的前窗操作口進(jìn)風(fēng)來提供人員保護(hù)，被實驗污染的氣流經(jīng)高效過濾器過濾后排出實驗室從而保護(hù)環(huán)境不受微生物因子的污染。但由于窗操作口進(jìn)風(fēng)不直接進(jìn)入實驗操作區(qū)，而是在安全柜內(nèi)經(jīng)工作區(qū)頂部的高效過濾器過濾后，以層流的形式往下單向流向操作區(qū)(稱下降氣流)，這樣既為實驗操作區(qū)提供了潔凈環(huán)境，使得實驗材料免受環(huán)境污染，同時層流又防止了操作區(qū)不同區(qū)域間材料產(chǎn)生氣溶膠的相互交叉污染。

按照結(jié)構(gòu)特點氣流模式又分為A1、A2、B1和B2四種類型，目前廣泛使用的是Ⅱ級A2型和B2型。其中，A2型安全柜的氣流由安全柜內(nèi)單個風(fēng)機(jī)提供動力，風(fēng)機(jī)風(fēng)量的70%在安全柜柜體內(nèi)循環(huán)，形成下降氣流，30%直接排到實驗室，或經(jīng)套管式軟連接管排出實驗室外。這30%的風(fēng)量由流入氣流補(bǔ)充。B2型安全柜的流入氣流和下降氣流由實驗室外風(fēng)機(jī)通過封閉的硬連接管道完全排出室外，下降氣流由安全柜內(nèi)風(fēng)機(jī)提供動力，而流入氣流靠兩個風(fēng)機(jī)提供的氣流量差來保證。從防止微生物氣溶膠污染的保護(hù)能力上看A2和B2型安全柜是相同的。由于B2型安全柜是直接將氣流排出實驗室外，則對在實驗過程中產(chǎn)生有毒氣體時，顯示出它的優(yōu)勢。毒性氣體可以完全排出實驗室而防止對實驗人員的危害，還可以避免實驗中產(chǎn)生的對實驗有影響的氣體循環(huán)進(jìn)入實驗區(qū)。

2 生物安全柜的臨床檢驗要求

根據(jù)強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)YY0569－2005的要求，安全柜在醫(yī)療機(jī)構(gòu)安裝完成或位置被移動后，均應(yīng)進(jìn)行安裝檢驗驗證。對其的維護(hù)檢驗驗證應(yīng)至少每年一次，且當(dāng)更換高效過濾器和內(nèi)部部件維修后，也要進(jìn)行相應(yīng)的維護(hù)檢驗驗證。以上各種驗證檢驗項目包括高效過濾器完整性掃描、氣流流速和氣流模式等必檢項目，下面介紹各檢驗項目的意義。

2.1 高效過濾器完整性

高效過濾器完整性掃描包括下降過濾器和外排過濾器完整性掃描兩部分。下降過濾器完整性是保障產(chǎn)品安全的重要途徑，是保證檢驗結(jié)果準(zhǔn)確有效的前提條件。下降過濾器完整性不合格直接導(dǎo)致吹向安全柜工作區(qū)的下降氣流中有帶有危險生物氣溶膠，從而對檢驗結(jié)果產(chǎn)生干擾，直接影響到檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性。

外排過濾器的完整性是保障安全柜內(nèi)操作的微生物氣溶膠不會污染到安全柜外界的重要途徑，是保證排出空氣潔凈、安全的唯一屏障，是體現(xiàn)安全柜防護(hù)性能的重要指標(biāo)。外排過濾器完整性不合格將導(dǎo)致安全柜內(nèi)的生物氣溶膠直接污染到室內(nèi)或經(jīng)排氣管道污染室外大氣環(huán)境，造成重大影響;對于外排過濾器完整性掃描，大量存在以下現(xiàn)象，安全柜在安裝時加裝外排管道，但由于生產(chǎn)銷售方并沒有按標(biāo)準(zhǔn)要求預(yù)留相應(yīng)的檢測口，導(dǎo)致對外排過濾器無法進(jìn)行掃描檢驗，我們也無法判斷安全柜排出的氣體是否安全，從而留下重大安全隱患。

2.2 下降氣流流速

下降氣流是指來自安全柜上方經(jīng)高效過濾器過濾的垂直向下流向工作區(qū)的氣流，其作用是保護(hù)產(chǎn)品(試驗樣品)不被污染。下降氣流流速過低將使安全柜工作區(qū)內(nèi)的氣流流向紊亂，導(dǎo)致交叉污染，影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性;過高則有可能抵消或突破前窗流入氣流的保護(hù)，將微生物氣溶膠從前窗吹出，從而危害操作者和柜外環(huán)境的安全。

2.3 流入氣流流速

流入氣流是指從安全柜前窗操作口進(jìn)入安全柜的氣流，其作用是保護(hù)人員的安全。合理的流入氣流會在安全柜前窗開口處形成向安全柜內(nèi)的保護(hù)氣流，防止柜內(nèi)的微生物氣溶膠逸出，但不會進(jìn)入到安全柜工作區(qū)內(nèi)。流入氣流流速過低則無法阻止微生物氣溶膠從前窗開口處逸出，從而使微生物氣溶膠泄露，嚴(yán)重危害操作者的安全和柜外環(huán)境的安全;過高則會使柜外未經(jīng)過濾的空氣進(jìn)入到工作區(qū)內(nèi)，污染試驗樣品，影響實驗的結(jié)果。

2.4 氣流模式

氣流模式檢測可以通過觀察煙霧的流動，看到安全柜工作區(qū)內(nèi)、前窗開口周邊的氣流方向和均勻度，快速、直觀地評估安全柜氣流流向及合理性。安全柜的下降氣流、流入氣流共同形成的氣幕是隔離生物氣溶膠污染的屏障。此種方法是用來甄別安全柜結(jié)構(gòu)設(shè)計、風(fēng)速設(shè)置優(yōu)劣的重要方法。

2.5 報警和聯(lián)鎖系統(tǒng)

報警和連鎖系統(tǒng)是當(dāng)安全柜在使用中發(fā)生誤操作、故障、狀態(tài)異常等危害到生物防護(hù)性能的突發(fā)情況時，提示操作者生物危險的唯一途徑，是減小損害、減輕損失的最后一道防線。報警的范圍包括:前窗開啟高度報警、安全柜內(nèi)部供/排氣風(fēng)機(jī)聯(lián)鎖警報、安全柜排氣報警、安全柜氣流波動報警。安全柜報警系統(tǒng)一旦缺失或失靈，在使用中突然出現(xiàn)異常狀況時，系統(tǒng)無法發(fā)出警報，操作者依然誤認(rèn)為安全柜運(yùn)轉(zhuǎn)正常，繼續(xù)操作，無法控制事態(tài)的蔓延和發(fā)展，此時將導(dǎo)致無法估計的嚴(yán)重后果。

3 在臨床上的突出問題

3.1 產(chǎn)品標(biāo)簽問題

按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求，標(biāo)簽應(yīng)為中文，且應(yīng)包括安全柜的一些重要技術(shù)參數(shù)信息，但大部分進(jìn)口安全柜并無中文標(biāo)簽;且標(biāo)簽中的重要技術(shù)指標(biāo)未標(biāo)明;與注冊產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)和提供的醫(yī)療器械注冊證的相應(yīng)信息要求不一致。

有些安全柜標(biāo)簽中標(biāo)明的注冊標(biāo)準(zhǔn)編號與注冊證中的標(biāo)準(zhǔn)編號不一致，無法證明安全柜是否有醫(yī)療器械注冊證。

3.2 安裝位置不合理

安全柜在安裝落位時，應(yīng)使柜體四周和柜頂與墻壁、天花板、實驗柜臺及其他物體間留有足夠的距離，以免遮擋安全柜的進(jìn)風(fēng)口阻礙進(jìn)風(fēng)，同時，留有足夠的空間便于日后清潔安全柜。條件允許時要在各方向留有30cm的空間，最小應(yīng)留有8cm距離。否則可能會加大安全柜進(jìn)風(fēng)口的阻力，或?qū)е鹿耋w表面積塵等問題。在檢驗中發(fā)現(xiàn)，醫(yī)療機(jī)構(gòu)在用安全柜安放位置普遍不合理，如有些安全柜靠墻或墻角放置，有些安全柜正對著空調(diào)送風(fēng)口、窗口等通風(fēng)設(shè)施，這樣會對安全柜的流入氣流和氣流模式造成非常不利的影響。

另外，在安全柜下部支架處、柜體兩側(cè)甚至柜頂堆放雜物、廢舊儀器設(shè)備、紙箱等物品的現(xiàn)象十分普遍。這些現(xiàn)象導(dǎo)致安全柜周圍遍布衛(wèi)生死角。還有些安全柜的安放位置距離水池水槽等設(shè)施很近，這將增大微生物生存繁殖的可能性。某些安全柜的柜頂堆放了雜物或柜頂與天花板之間被封死，這些都可能影響安全柜進(jìn)風(fēng)口正常工作，直接導(dǎo)致安全柜性能異常。

3.3 使用無證產(chǎn)品和非安全柜產(chǎn)品

安全柜是保證人員安全、產(chǎn)品安全、環(huán)境安全的防護(hù)產(chǎn)品，納入醫(yī)療器械管理，屬三類高風(fēng)險醫(yī)療器械。自行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)正式實施起，所有銷往醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用的安全柜必須取得醫(yī)療器械注冊證。未取得醫(yī)療器械注冊證的安全柜產(chǎn)品，沒有經(jīng)過行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的檢驗，無從考察其設(shè)計的合理性、無法考量其性能能否滿足生物實驗的使用要求、更無法評估其應(yīng)對異常狀態(tài)的能力和防止生物危害的水平。

有些安全柜的柜體兩側(cè)面為單層玻璃結(jié)構(gòu)，與安全柜行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求安全柜為雙層結(jié)構(gòu)明顯不符，但其標(biāo)簽卻明示該產(chǎn)品為“安全柜”，并且醫(yī)療機(jī)構(gòu)也將其按照安全柜管理和使用。非安全柜(類似于改良型超凈工作臺)，在其結(jié)構(gòu)設(shè)計思路、性能設(shè)置水平、標(biāo)準(zhǔn)范圍深度、檢測方法要求等各個方面都與安全柜行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中相應(yīng)的內(nèi)容相差甚遠(yuǎn)。其綜合能力無法與安全柜相提并論。使用無證安全柜和非安全柜，將極大地增大醫(yī)療機(jī)構(gòu)一線工作人員感染的危險，嚴(yán)重干擾實驗結(jié)果的準(zhǔn)確可靠，甚至危害人民健康和公共安全。

3.4 使用老舊設(shè)計產(chǎn)品和落后產(chǎn)品

在安全柜行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)正式發(fā)布實施以前，有部分企業(yè)曾取得安全柜的醫(yī)療器械注冊證。相比于無證安全柜和非安全柜產(chǎn)品，其設(shè)計理念和水平都要提高許多。在國家局規(guī)范了安全柜行業(yè)狀況后，這些在行標(biāo)實施前取證的產(chǎn)品就顯得不能滿足當(dāng)今行業(yè)的要求了。具體方面體現(xiàn)在:

3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)要求籠統(tǒng)含糊

早期產(chǎn)品的注冊標(biāo)準(zhǔn)中，首先對于產(chǎn)品性能的要求敘述不清，標(biāo)準(zhǔn)要求過于籠統(tǒng)。例如對于報警系統(tǒng)的要求，早期產(chǎn)品并沒有依照安全柜的不同類型特點提出相應(yīng)的區(qū)別，對于報警項目也沒有區(qū)分風(fēng)量損失報警和窗高報警等不同方面，對于聲、光報警的不同方式也未作要求。

3.4.2 重要技術(shù)參數(shù)型式不統(tǒng)一

早期不同廠家的注冊標(biāo)準(zhǔn)中對于兩種風(fēng)速的要求型式非常不統(tǒng)一，差異很大。有些廠家要求的風(fēng)速標(biāo)稱值都是一定的范圍，不給出允差值，有些則是一個定值;有些廠家給出的標(biāo)稱值是以英制單位表示的;有些則是以公制單位表示的。在現(xiàn)行行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中統(tǒng)一要求以公制單位給定一限值，并給出允許的誤差范圍。

3.4.3 檢驗方法落后精確度低

早期產(chǎn)品注冊標(biāo)準(zhǔn)中的許多檢驗方法已經(jīng)不能準(zhǔn)確評估當(dāng)今安全柜的性能水平。最關(guān)鍵的高效過濾器漏過率的試驗方法，早期產(chǎn)品采用的是塵埃粒子計數(shù)法，采用的以大氣作為背景，以工作區(qū)塵埃數(shù)記為漏過數(shù)量，以其比值作為漏過率。這種方法最大的問題是背景濃度的大小將直接影響測量的準(zhǔn)確度。即理論上來講，若背景為空，則測試無意義。然而標(biāo)定背景的塵埃濃度幾乎不可能，塵埃粒子計數(shù)器的精密度又很局限，這就直接導(dǎo)致此種方法的可行性和準(zhǔn)確度皆很差。然而現(xiàn)行行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)采用的是氣溶膠光度計法測試過濾器漏過率，不僅嚴(yán)格地給定了上游濃度，而且光度計法具有高精確度、高靈敏度的技術(shù)優(yōu)勢，使得檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性得到保障。

3.5 醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用及管理問題

通過對醫(yī)療機(jī)構(gòu)的調(diào)查問卷，我們發(fā)現(xiàn)被調(diào)查的單位(或科室)在購買安全柜之前，安全柜的性能好壞，是使用單位最關(guān)心的問題;另外，一半以上的使用者還關(guān)注了安全柜廠家的售后服務(wù)，說明大多數(shù)使用者對日常維護(hù)也比較有意識;但只有少數(shù)使用者，在購買之前會考慮安全柜的應(yīng)用范圍是否符合自己的需求，其實應(yīng)用范圍非常重要，就拿我們常見的兩種安全柜來說，由于B2型安全柜是直接將氣流排出實驗室外，所以對于實驗過程中產(chǎn)生有毒氣體時，應(yīng)盡量選擇B2型安全柜，毒性氣體可以完全排出實驗室而防止對實驗人員的危害，還可以避免實驗中產(chǎn)生的對實驗有影響的氣體循環(huán)進(jìn)入實驗區(qū)。所以當(dāng)使用者缺乏安全柜的專業(yè)知識時，大部分生產(chǎn)廠家也不對使用者進(jìn)行推薦與指導(dǎo)，醫(yī)療機(jī)構(gòu)對于安全柜的選購上很難達(dá)到理想的狀態(tài)。

醫(yī)療機(jī)構(gòu)中的安全柜應(yīng)在潔凈環(huán)境中使用，其攜帶的高效過濾器是一種十分精密、脆弱的耗材，它的結(jié)構(gòu)特點和功能作用決定了它是易損壞和易消耗的。而現(xiàn)在更多的是長期暴露在普通環(huán)境下，過濾器堵塞后直接影響到的是風(fēng)速風(fēng)量和氣流均勻程度，也就影響到了安全柜的防護(hù)性能。在普通環(huán)境中使用的安全柜，就應(yīng)該做到定期更換過濾器，但調(diào)查顯示，能夠做到定期更換過濾器的單位非常少，更多的是從未更換過過濾器，安全柜的正常防護(hù)作用就更難得到保障。

少數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)曾經(jīng)不定期請第三方機(jī)構(gòu)檢驗過的安全柜，但其依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)并非行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，或雖依據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但判定結(jié)果只片面依據(jù)行標(biāo)，而不根據(jù)具體產(chǎn)品自身設(shè)定的標(biāo)稱值，具有明顯缺陷。除此之外，絕大多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)自從配備了安全柜后，從未對在用的安全柜進(jìn)行過任何檢驗。由于臨床操作人員和醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理者本身對安全柜的認(rèn)識尚處于初級階段，同時又缺少相應(yīng)的培訓(xùn)和考核制度，從而使安全柜使用操作者及管理者的防護(hù)知識匱乏，對安全柜的監(jiān)控和維護(hù)手段掌握不足。這些都將直接導(dǎo)致安全柜的使用過程中存在重大安全隱患。

4 工作建議

4.1 加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)人員培訓(xùn)

由于醫(yī)療機(jī)構(gòu)儀器使用人員不很了解國家醫(yī)療器械相關(guān)法規(guī)，不了解使用的產(chǎn)品如何正確安裝、使用、維護(hù)，不了解所使用儀器的國家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)人員對醫(yī)療器械法規(guī)、產(chǎn)品各方面相關(guān)知識的培訓(xùn)。

4.2 加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)部管理。

通過藥監(jiān)部門、衛(wèi)生行政部門、政府多方協(xié)作、交流、監(jiān)督，促進(jìn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)對內(nèi)部在用醫(yī)療器械的管理、監(jiān)督。在用醫(yī)療器械品種多、專業(yè)覆蓋廣，而醫(yī)療機(jī)構(gòu)設(shè)備管理人員少，對所有醫(yī)療器械都做到熟悉了解并具備檢查能力，有較大困難?？晌嗅t(yī)療器械檢測機(jī)構(gòu)協(xié)助檢查儀器的安全有效性，可大大降低在用醫(yī)療器械的使用風(fēng)險，降低醫(yī)療事故數(shù)量。

4.3 持續(xù)進(jìn)行跟蹤檢驗

在用醫(yī)療器械檢驗結(jié)果，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于往年監(jiān)督抽驗的結(jié)果，說明醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用的醫(yī)療器械使用風(fēng)險更高。經(jīng)過檢驗，對已經(jīng)查出問題的器械，要通過幾年連續(xù)檢查，做到檢查一類產(chǎn)品，一類產(chǎn)品的醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用合格率就明顯上升，并持續(xù)穩(wěn)定。逐步降低因醫(yī)療器械產(chǎn)生的醫(yī)療事故風(fēng)險。

4.4 逐步覆蓋全市醫(yī)療機(jī)構(gòu)

今年接受在用醫(yī)療器械檢驗的醫(yī)療機(jī)構(gòu)均為三級以上醫(yī)院，在儀器設(shè)備的管理上應(yīng)好于三級以下的醫(yī)療機(jī)構(gòu)，但檢驗結(jié)果的合格率仍比較低，因此，在我們總結(jié)在用醫(yī)療器械檢驗經(jīng)驗的基礎(chǔ)上，逐步擴(kuò)大對三級以下醫(yī)療機(jī)構(gòu)的在用醫(yī)療器械檢驗。

4.5 加大檢驗資金的投入

在用醫(yī)療器械檢驗的樣品，是醫(yī)療機(jī)構(gòu)正在使用的設(shè)備，其中大型設(shè)備很難從醫(yī)療機(jī)構(gòu)抽到檢驗所來檢驗，需要檢驗工程師攜帶檢驗設(shè)備、配備車輛到醫(yī)療機(jī)構(gòu)現(xiàn)場檢驗，且北京市醫(yī)療機(jī)構(gòu)上千家。因此，檢驗機(jī)構(gòu)需要配備相關(guān)檢測設(shè)備、人員、車輛滿足檢驗需求。

4.6 加大評價、研究標(biāo)準(zhǔn)的力度

目前現(xiàn)有的國家、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)以及注冊產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)評價指標(biāo)是針對新產(chǎn)品而言，檢測機(jī)構(gòu)也是按照針對新產(chǎn)品的監(jiān)管工作進(jìn)行配置資源配置。而在用醫(yī)療器械在醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用多年的設(shè)備十分常見。應(yīng)聯(lián)系實際科學(xué)地制定技術(shù)要求、評價原則、確定判定指標(biāo)，需要大量深入調(diào)研、討論、統(tǒng)計、評估和驗證，需要政府在人力資源和檢驗場地、工裝設(shè)備等方面的經(jīng)費(fèi)支持與保障。

5 安全柜的正確操作

安全柜雖然是一種能夠保護(hù)人員、保護(hù)樣品、保護(hù)環(huán)境的防護(hù)性設(shè)備，但其性能能否正常發(fā)揮卻與操作者的操作方法正確與否密切相關(guān)。正確地使用安全柜，能有效攔截微生物顆粒及塵埃顆粒，保證實驗操作人員的安全以及護(hù)理人員配置藥液的質(zhì)量，同時實現(xiàn)對操作人員、實驗樣品及環(huán)境的有效保護(hù)。醫(yī)護(hù)人員必須樹立良好的個人防護(hù)意識，建立健全生物安全防護(hù)制度，規(guī)范操作行為。

5.1 操作前準(zhǔn)備

在進(jìn)行安全柜的工作實驗之前，針對某一特殊作業(yè)，事先準(zhǔn)備一份物料需求清單，并將所需要的物料盡可能的先置于安全柜內(nèi)，以使在安全柜內(nèi)的手部移動次數(shù)能減到最小。因為手臂在安全柜內(nèi)移動會破壞柜內(nèi)脆弱的空氣屏障，工作者的手部快速的進(jìn)出安全柜也會破壞柜內(nèi)已完整的空氣氣幕，使得柜內(nèi)原本已經(jīng)形成的屏障遭遇部分破壞而失去保護(hù)功能，因此在安全柜內(nèi)移動手臂，其動作要緩慢，方向要垂直于開啟門的表面，如此才能減低風(fēng)險。

實驗室內(nèi)的人員活動(如快速移動，開關(guān)門等)也會干擾柜內(nèi)的空氣屏障。人員應(yīng)穿著實驗衣進(jìn)行試驗，一種前封后扣(Solid front，backclosing)的實驗外套可以提供人員更佳的保護(hù)，人員需配戴橡膠手套以保護(hù)手部，手套必須戴超過實驗外衣的袖口。工作開始前，操作者應(yīng)調(diào)整其所坐椅子的高度，以使臉面向安全柜前端對外開口的上方，并應(yīng)在雙手置于操作間至少1min之后才進(jìn)行動作，此步驟的目的乃是使柜內(nèi)氣流流過操作者的手及手臂以去除表面的細(xì)菌污染。安全柜運(yùn)轉(zhuǎn)后，操作面前方的格狀開口應(yīng)盡量避免被手臂、紙張或試驗器具所阻礙，以減少實驗室的空氣污染試驗空間中試料。所有試驗的操作必須在前方格狀開口后緣至少10cm的位置處進(jìn)行。試驗前，操作面下的排水閥門需關(guān)閉，以使所有的污染物質(zhì)可保持在安全柜中以免于溢出。

放置于安全柜內(nèi)的器具或試料，可能會造成柜內(nèi)氣流的干擾而引起亂流，亂流的形成會引起防護(hù)氣流的失效及交叉污染試料，因此多余的用品(如多余的手套、培養(yǎng)皿、器具與培養(yǎng)物等)應(yīng)在柜外加以貯藏存放，在柜內(nèi)只應(yīng)有工作期間所需要的物品。在開始工作之前安全柜內(nèi)的風(fēng)機(jī)，必須先開啟至少3～5min，以便凈化安全柜內(nèi)殘留氣溶膠或微粒。

5.2 操作安全

在安全柜中工作時應(yīng)遵守下列一般程序:

(1)使用安全柜時應(yīng)遵守作業(yè)規(guī)范。

(2)安全柜內(nèi)不應(yīng)存放不常使用的物品，可以放置一些經(jīng)常用到的儀器，如:電熱環(huán)形滅菌器等。

(3)避免手和手臂在工作區(qū)域中做不必要的移動。手臂移動時，速度要緩慢，以維持風(fēng)簾(air curtain)的完整性。

(4)小心避免實驗樣本之間的交叉感染，最好不要同時處理兩個不同樣本。

(5)工作完成之后，維持安全柜運(yùn)轉(zhuǎn)下進(jìn)行下列步驟:

——將培養(yǎng)皿疊放好，或置于培養(yǎng)桶中;

——清理工作臺面，將污染物整理包裹嚴(yán)密。對于具危險性的廢物要用適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ幚?

——移出設(shè)備前，應(yīng)以適當(dāng)?shù)南緞┏浞植潦昧栏?，以防止可能的生物危害擴(kuò)散;

——以適當(dāng)?shù)南緞┎脸浞质谜麄€工作區(qū)域的臺面、各側(cè)壁和前窗玻璃。

(6)脫掉手套并棄至感染廢物桶中，洗手。

(7)使安全柜繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)至少10min，以便關(guān)掉電源之前可以驅(qū)除被污染的空氣，關(guān)閉前窗。

(8)對Ⅱ級安全柜，集液槽應(yīng)定期(最好每周一次)或在有液體溢出之后清潔。在安全柜運(yùn)轉(zhuǎn)時，將工作臺面抬起并用消毒劑清潔底面、格柵后面、空氣入口格柵、集液槽面和可觸及的表面。

除一般使用安全外，使用者還應(yīng)學(xué)習(xí)以下的注意事項:

(1)試驗器具:在安全柜內(nèi)所有的物品必須盡可能的放置在操作平面后半段，且須遠(yuǎn)離兩端的格狀開口，易產(chǎn)生氣溶膠的藥品或設(shè)備(如混合器、離心機(jī))應(yīng)置于平面的最遠(yuǎn)端。安全柜平面上試驗品與材料的擺放原則，應(yīng)考慮使供氣氣流由低污染流向高污染試料的配置原則。大型物件如丟棄式吸管盒及安瓶等應(yīng)被放置在平面的一角。具有潛在危害的物料不可以被直接取出于安全柜外，應(yīng)事先經(jīng)過消毒處理程序。安全柜中已受到污染的物料應(yīng)被放置于一個封閉的容器內(nèi)，然后送入滅菌鍋執(zhí)行消毒處理。

(2)火焰的使用:Ⅱ級安全柜不建議使用本生燈，因為會干擾層流和防護(hù)氣流，使用拋棄式接種環(huán)或以其他方式加熱比較好。假如使用瓦斯燈時，將之連接到安全柜瓦斯開關(guān)的軟管應(yīng)再度加強(qiáng)、封上兩層膠帶。另外，不可以在安全柜中使用瓦斯罐，其他如瓦斯管線和插座不可以經(jīng)由工作入口進(jìn)入安全柜。

5.3 危害處理

安全柜操作者必須受過安全訓(xùn)練或有良好的微生物處理技術(shù)與經(jīng)驗，以降低操作者暴露于傳染性疾病材料的潛在危險。建議操作者在進(jìn)行易產(chǎn)生氣溶膠的試驗時，干凈的試料應(yīng)與之距離至少達(dá)30cm以減小交叉感染的機(jī)率。柜內(nèi)的氣流方向應(yīng)從干凈區(qū)域流向污染區(qū)域，試料與用品應(yīng)以這種原則擺放于柜內(nèi)，以避免受污染的試料流過干凈的試驗品。操作試驗時，打開的管子或瓶子勿以垂直的方式握住，研究人員進(jìn)行組織培養(yǎng)等有關(guān)的工作時應(yīng)握取無菌面上方的蓋子以減少向下氣流的直接沖擊，瓶子或管子的蓋子不要放置于擦拭巾上，打開的容器應(yīng)盡速在將其關(guān)閉，以減少交叉感染的機(jī)會。

5.3.1 消毒作業(yè)

測試人員必須決定使用何種消毒藥品與器具及使用的方法，這些物料必須在工作完成后從安全柜內(nèi)移出。當(dāng)選定以化學(xué)方法進(jìn)行消毒時，適用的消毒材料在工作進(jìn)行前就應(yīng)擺入安全柜內(nèi)，并依照每一個步驟需求進(jìn)行。進(jìn)行蒸氣高溫消毒前，已受污染的物料必須被放入可丟棄式的器皿中，滅菌鍋內(nèi)部須含有足夠的水份以確保蒸氣的產(chǎn)生。在安全柜操作平面，柜體內(nèi)壁及視窗內(nèi)部玻璃等都應(yīng)使用70%濃度的酒精加以擦拭或是用1∶100稀釋的家用的漂白劑，或是用針對某些特別實驗操作所使用的其他消毒劑進(jìn)行清潔。當(dāng)使用漂白劑時，必須使用無菌水(sterile water)再進(jìn)行一次的清潔擦拭，以避免殘留下來的氯腐蝕不銹鋼表面。試驗前，應(yīng)將放入安全柜中的所有物品及容器的表面利用70%的酒精擦拭清潔以降低污染源進(jìn)入安全柜內(nèi)。定期將培養(yǎng)器及冷凍室加以消毒，可減小在安全柜造成污染的微生物量。當(dāng)試驗不慎導(dǎo)致危害藥品液體溢出時，若已流經(jīng)安全柜前后的格狀開口，則整個消毒的工作必須包括柜內(nèi)所有物品及安全柜內(nèi)部。消毒后的排放水槽必須用水沖洗;排放管也必須清除殘留的液體;若試驗含放射性物質(zhì)，則必須對排放管與水槽檢測。

暫時不使用安全柜時，安全柜必須進(jìn)行最后的表面清潔工作，包括工作平面的擦拭，安全柜的周邊以及玻璃的內(nèi)部，如果有必要，安全柜應(yīng)進(jìn)行放射性污染檢測及監(jiān)控，操作人員應(yīng)將手套及外衣以預(yù)定的方式擺放或丟棄。安全柜在執(zhí)行處理傳染性病菌的工作后，在高效過濾器更換或內(nèi)部維修工作進(jìn)行之前必須進(jìn)行高效過濾器的消毒工作，最常使用的消毒氣體為甲醛(formaldehyde)熏蒸。

5.3.2 溢出物處理

應(yīng)以適當(dāng)?shù)南舅梢暂p易地將小滴或約1.0mL的外溢物質(zhì)擦拭或清洗干凈，假如溢出的量較大或是瓶子破裂時，可能需要較多的處理，安全柜的氣流會將氣溶膠掃除，清潔工作可能需要馬上進(jìn)行，Ⅱ級安全柜內(nèi)有物體溢出的清潔步驟建議如下:

(1)確認(rèn)安全柜仍在運(yùn)轉(zhuǎn)，保證期間將氣溶膠留在安全柜中。

(2)以適當(dāng)?shù)南舅w住溢出的物質(zhì)及鄰近區(qū)域，并且10min內(nèi)不要接觸。在安全柜中消毒戴手套的手并脫掉保護(hù)用的手套，若受到污染時，將衣物進(jìn)行滅菌并洗凈雙手及手臂，穿戴上干凈的手套及防護(hù)衣繼續(xù)進(jìn)行其余的清潔步驟。

(3)在對溢出物體做過初步的消毒之后，用吸水性材料移除多余的液體，并丟棄至要滅菌的容器中，并將培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿和溢出物有關(guān)的固體物質(zhì)丟棄到同一個容器中，對培養(yǎng)物質(zhì)、培養(yǎng)液和在溢出物質(zhì)附近的丟棄式器材進(jìn)行除污(或移除進(jìn)行滅菌)。

(4)以新制備的消毒水擦拭工作臺面、安全柜工作區(qū)域及其他設(shè)備，安全柜內(nèi)格柵的兩面及工作臺面都要進(jìn)行消毒，不管工作臺是否堅固，確認(rèn)溢出物質(zhì)沒有污染到集水槽，假如集水槽被污染時，加入足夠的消毒水以完全覆蓋集水槽面，假如溢出大量時，使用足夠的消毒水稀釋并使感染物質(zhì)失去活性。

(5)考慮再次使用之前是否應(yīng)用甲醛氣體進(jìn)行安全柜的除污工作。

依據(jù)于安全柜中所處理的微生物選擇適合的消毒劑，但是如果是在臨床檢體外溢時，可能會含有許多不同的微生物，澳標(biāo)AS/NZS 2243.3中有指出應(yīng)如何選擇適當(dāng)消毒劑。腐蝕性消毒劑(例如:氧化物、酸和堿)可能適合用于一些不常見的微生物，然而使用后必需進(jìn)行化學(xué)中和以避免損壞安全柜表面。進(jìn)行處理的表面仍應(yīng)依據(jù)建議的接觸時間保持一段時間的潮濕，后再進(jìn)行清潔與干燥的工作。

6 安全柜的維護(hù)

生物防護(hù)設(shè)施的設(shè)立并非一勞永逸，安全柜作為生物試驗室重要的防護(hù)設(shè)備，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)密監(jiān)控其運(yùn)行狀態(tài)。安全柜的高效過濾器是一種十分精密、脆弱的耗材，它的結(jié)構(gòu)特點和功能作用決定了它是易損壞和易消耗的。醫(yī)療機(jī)構(gòu)中在用安全柜的使用環(huán)境極其惡劣，不僅絕大多數(shù)都放置在普通環(huán)境中使用，而且有些醫(yī)院放置安全柜的房間窗口面向直接面向道路街面，甚至面向土建工地。高效過濾器的設(shè)計性能是能夠保證對空氣中0.3μm粒子的過濾效率高于99.99%，然而未經(jīng)潔凈系統(tǒng)處理的大氣中不僅分布全粒徑范圍的粒子，而且數(shù)量濃度巨大。長期在這種環(huán)境中使用安全柜，對于其過濾器的損耗是災(zāi)難性的。過濾器堵塞后直接影響到的是風(fēng)速風(fēng)量和氣流均勻程度，也就影響到了安全柜的防護(hù)性能。安全柜在注冊檢驗時要求對其風(fēng)機(jī)性能進(jìn)行考察，其意義在于評估安全柜在正常的使用過程中，能夠抵御一定程度的不良情況和正常的高效過濾器損耗。但由于安全柜的使用環(huán)境不同、工作時間長短不同，我們發(fā)現(xiàn)不同機(jī)構(gòu)使用的安全柜或者同一機(jī)構(gòu)中不同部門使用的安全柜的損耗情況差異非常大。目前，我們只能通過檢驗安全柜的性能來綜合評估其高效過濾器的損耗情況。所以，每年定期地對在用的安全柜進(jìn)行性能驗證能夠有效地掌握安全柜的運(yùn)行狀況，避免危害的發(fā)生。

另外，在安全柜搬運(yùn)過程中的顛簸、碰撞，都有可能會使高效過濾器的邊框松動，從而導(dǎo)致生物氣溶膠的泄露。生物氣溶膠一點泄露出來，不僅會直接導(dǎo)致工作區(qū)內(nèi)的實驗樣品受到污染，還有可能導(dǎo)致微生物危害的擴(kuò)散，危及到實驗人員和環(huán)境。在安全柜行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中明確規(guī)定了安全柜在搬運(yùn)后應(yīng)進(jìn)行維護(hù)檢驗，以保證安全柜的性能可靠。

［1］張晨光，賀志安，申海玲.基層醫(yī)務(wù)人員生物安全防護(hù)的現(xiàn)狀分析［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2007，34(15):2921－2924.

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［8］北京市醫(yī)療器械檢驗所等 YY 0569－2005安全柜［S］.中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2005

［9］NSF/ANSI 49－2009，Biosafety Cabinetry:Design，Construction，Performance，and Field Certification［S］.

［10］EN 12469:2000，Biotechnology－Performance criteria for microbiological safety cabinets［S］.

［11］YY 0569－2011《Ⅱ級生物安全柜》